动物细胞培养和核移植技术(苗)

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1、知识回顾植物细胞工程植物细胞工程技术植物细胞工程应用植物组织培养植物体细胞杂交植物繁殖的新途径作物新品种的培育细胞产物的工厂化生产动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养技术、动物细胞核移植技术、动物细胞融合技术、生产单克隆抗体技术动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。胰蛋白酶胶原蛋白酶.培养条件动物组织分散成单个细胞细胞悬液培养胰蛋白酶胶原蛋白酶原理：细胞增殖（有丝分裂）结果：细胞群，细胞产物原代培养传代培养动物细胞培养过程胚胎的细胞或刚出生不久动物的组织动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液原代培养

2、细胞增殖部分细胞无限传代去掉组织间蛋白动物细胞培养不能最终培养成生物体传代培养动物细胞培养思考题1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？２、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗？３、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？４、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？５、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？没有是成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理胰蛋白酶水解蛋白质细胞间的成份是蛋白质思考题６、细胞膜的主要成份是什么？７、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？８、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物

3、组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？９、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？１０、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因？蛋白质和磷脂能注意时间的控制不能，因为两的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛思考题11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？13、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？易于培养细胞贴壁，进行生长增殖当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫接

4、触抑制。将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后继续增殖。这样的过程叫做传代培养思考题14、如何理解原代培养和传代培养？15、传代培养的细胞能一直传代下去吗？16、有些为何能一直传下去吗？17、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗？18、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？上述过程中，在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养不都能发生突变，朝着癌细胞方向发展不是保存10代以内的细胞，因为10－50代部分细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮

5、液原代培养动物细胞培养细胞增殖部分细胞无限传代去掉组织间蛋白动物细胞培养不能最终培养成生物体传代培养请总结出动物细胞培养的定义动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。相互接触接触抑制单层胰蛋白酶衰老或死亡不死性降低减少活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入细胞，故不染色。中低温新陈代谢酶抗原思考题多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢？1、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、促生

6、长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基）保证细胞顺利的生长增殖培养条件：动物细胞培养液的主要成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。与植物培养基相比其特点是：（1）液体培养基（2）含有血清、血浆动物体细胞大都生活在液体的环境培养条件：3、温度和pH36.5+（-）0.5度,7.2-7.44、气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）培养条件：1、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基）思考题动物细

7、胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？主要成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。独特之处有：1、液体培养基2、成分中有血清、血浆等获得细胞或细胞产物细胞的全能性细胞数目增多一般为植物体培养结果快速繁殖、培育脱毒作物等培养目的葡萄糖、动物血清促生长因子蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较.动物细胞培养技术的实际应用1、大量生产细胞或产物。如：病毒疫苗干扰素单克隆抗体胰岛素2、给基因工程提供受体细胞。3、检测有毒物

8、质及毒性。4、用于生理、病理、药理等方面的研究，为治