柑橘与其近缘属植物5SrDNA的FISH位点分析

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1、5.45SrDNA的FISH位点在染色体识别上的应用.........................….........................….........345.5柑桶天然四倍体的发生与利用价值.................……….......….........…...................................35参考文献................................................................

2、...............................................................................37缩略词表...............................................................................................................................................45致谢...............…..

3、.....….......….......….......…......................….........……......…......................….................47发表论文及参研课题...........................................................................................................................49论文发

4、表...............….......................…................…........….....................................…..................49要参加研究课题:…....................................…...............................................…...............................

5、49II万方数据摘要柑情及其近缘属部分植物5SrDNA的FISH位点研究果树学专业硕士研究生:陈志指导教师:向索琼研究员摘要柑楠因其巨大的经济、社会与文化影响力，使其在世界范围类广泛种植。由于其微弱的生殖障碍和多胚性，以及长期的栽培历史还有体细胞突变，这些造成柑桶分类极其困难。柑桶的中期染色体基本上都很短小，长度仅在1-4~m之间，而且它们的形态特征十分相似，缺乏鉴别标记，分类比较困难。利用荧光原位杂交技术，能准确把核酸序列定位在染色体上，结合传统细胞遗传学，为柑捕及其j段缘属植物在分子水平上对

6、染色体的结构有更加详细的了解，同时为染色体识别和1基因物理定位等方面的进一步研究提供了快速、准确、有效的方法。本论文用5SrDNA作为探针，利用FISH技术，对柑桶属及其近缘属植物的5SrDNA位点进行研究分析，以期所获得的相关信息可以用于柑楠系统演化研究，以及为柑桶类植物染色体识别增加更多有效标记。另外，也进行了部分柑桶的二倍体与天然四倍体的内的NA位点差异分析。主要研究结果如下:1.对柑桶染色体制片及染色体原位杂交体系进行了一系列优化:染色体制片时不用火焰干燥，而是自然晾干，降低对染色体的损

7、伤:针对探针特性减少杂交时间和洗脱次数，使其快速简便有效，省时省力。2.柑楠、金柑属和积属16份材料的5SrDNA位点数目位点数目包含1、2、6三种情况，其中具2个位点的有13份材料。5SrDNA16份材料的体细胞染色体的第2、4、6、7，8,9号染色体上，尤其以位于7和8号染色体的位点居多，7份材料5SrDNA位点位于8号染色体，5份材料到rDNA位点位于7号染色体。除红枯5SrDNA位点位于2条染色体(6号和9号)，积约rDNA位点位于4条染色体(2号、3号、8号和9号)外，其余具2个位点的

8、材料其位点均位于一对间源染色体上。其中供试的柑楠属植物13份材料染色体上有1-2杂交位点，除资阳香橙和尤力克拧棱为1个位点，其余11份材料均具2个位点。2个位点的其位点一般位于染色体短臂近端部位置，且处于一对同源染色体上。只有红捕的两个位点有所差异，一个位于一条染色体的短臂近端部，另一个位于另一条染色体的短臂中部。供试的金柑属2份材料，滑皮金柑和金弹都有2个位点，位点都位于染色体矩臂端部，倍号强度没有明显提异。供试帜属材料有1份材料，荧光原位杂交结果显示有6个位点，分别位于第2对、第8号和9号染