《胚胎工程技术》PPT课件

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1、胚胎和配子生物工程(1)(Embryonicandgametalbioengineering)陈从英2009.10.169.1概述一、胚胎移植的含义胚胎移植技术—ET（embryotransfer）胚胎移植：将一头良种母畜（供体）配种后的早期胚胎取出，移植到另一头同种（受体）的生理状态相同的母畜体内，使胚胎继续发育成为新个体，俗称借腹怀胎。.提供胚胎的个体为“供体”，接受胚胎的个体为“受体”，不管供体还是受体动物都应为雌性个体。2、胚胎移植的意义①、大大提高优良母畜的使用效率；②、缩短世代间隔，大大提高品种改良的速度；③、通过冷冻胚胎进口，可实现更有利的种畜遗传物质的跨

2、国界交换；④、有利于防疫工作；⑤、可以克服不孕；⑥、利用胚胎冷冻保存品种资源。⑦、是发展家畜生物技术重要的研究手段。胚胎移植的实质胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转换，而胚胎本身的遗传物质并不发生改变，因此各种性状均能保持其原来的优良特性。为什么胚胎移植能成功?移动到任何一头动物子宫内都能发育吗?同种动物发情排卵后,在一段时间内供体受体具有相同的生理环境为什么能收集到胚胎?早期胚胎一定时间内处于游离状态供体和受体会不会发生排斥/同种动物之间基本上不排斥为什么移植的胚胎能保留供体双亲的特性?胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系,但遗传特性不受受体的影响

3、.生理学基础3、家畜胚胎移植的发展历史①、1890首次实现了兔的胚胎移植；②、1934年成功地进行羊的胚胎移植；③、50年代初羊、猪、牛的胚胎移植取得成功；④、1964年在日本完成了世界上首次非手术牛胚胎移植并得到犊牛；⑤、国外，1976年牛的非手术胚胎移植技术推广，1977年开始商业化应用；⑥、在国内，牛胚胎移植在1978年实验成功，80年代后期到90年代初，奶牛胚胎移植开始在国内生产中应用。流程图.激素经受体产生更多后代示意图.对供体受体的选择和处理配种或人工授精对胚胎的收集检查培养保存移植胚胎移植后检查(1)对供、受体的选择，用促性腺激素进行同期发情处理↓(

4、2)用激素对供体母牛做超数排卵处理(对供体注射促性腺激素，促进排卵)↓(3)选择同种优秀的公牛进行配种或人工授精(多个卵子与多个精了结合形成多个受精卵，受精的部位在输卵管)；受精卵→卵裂→早期胚胎↓(4)胚胎收集(特制的冲卵装置从母体子宫中冲出胚胎)步骤↓(5)对胚胎质量检查(此时的胚胎处于桑椹期或囊胚期)↓(6)胚胎移植或保存(保存条件：-196℃的液氮)↓(7)胚胎移植操作方法(手术法和非手术法)↓(8)对受体母牛进行是否妊娠的检查↓(9)体内孕育，产下胚胎移植的犊牛四、牛胚胎移植的技术路线１、供体牛和受体牛的选择供体应具有相当高的育种价值(供体牛选择遗传性能和生产性

5、能优良个体，而受体选择则重在健康的体质和正常的繁殖能力，供体牛一般为引进的优良个体，受体为本地牛；）供体生殖机能应处于较高的状态：产后60天以上，无生殖系统疾病，体质强健受体应容易购买，繁殖性能好，对地方适应性强，体型中上等，非优良品种受体健康状况良好，已进入发情季节供受体发情时间应接近或一致。２、超数排卵和人工授精PMSG+PGF2а法：在母牛发情期第8—12天，肌注PMSG2000单位，48小时后，肌注15-甲基前列腺素4mg。发情后12小时进行第一次输精；第一次输精后8小时进行第二次输精。现在使用的超数排卵的方法一般为ＦＳＨ＋ＰＧ法；具体操作方法为：在供体牛发情后的

6、９－１２天，经检查黄体较好的牛，采用四天减量注射ＦＳＨ的方法；羊：发情周期的第12-15天，促性腺激素处理的第二天或第三天，注射PG③为什么在９－１２天开始？④为什么要使用ＰＧ？牛超数排卵时间表时间第一天第二天第三天第四天第五天第六天ＦＳＨ剂量早上２.０１.５１.００.５发情人工授精下午２.０１.５１.００.５发情人工授精ＰＧ剂量四支供体超排处理供体母畜的配种必须用优秀的种公畜进行多次配种，一般隔8-12小时进行一次配种，直到发情结束。配种前应对种公畜的精液进行质量检查。可优秀种公畜不足时，可考虑首次采用本交，以后采用人工授精，也可以全部采用人工授精。供体配种4.胚胎的收

7、集胚胎冲洗液的配制：杜氏磷酸缓冲液PBS，布林斯特液SOF合成输卵管液手术法收集胚胎输卵管冲胚：顺向冲胚、逆向冲胚子宫角冲胚非手术法收集胚胎二路法三路法3、胚胎回收（冲胚）①牛胚胎回收（冲胚）：在牛发情后（发情之日计为第0天）的第七天采用非手术法回收胚胎。②一般供体牛每两个月超排一次，平均每次超排能获得可用胚胎6-7枚。在新疆的最高记录是一头牛一次超排获得48枚可用胚胎。③冲胚所用的液体为PBS液，其主要成分有：Nacl、Kcl、KH2PO4、Mgcl2.6H2O、Na2HPO4、丙酮酸钠、葡萄糖、牛血清白蛋白、青霉素、链霉素