2017年主管检验技师考试微生物检验讲义第14章肠杆菌科及检验

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1、肠杆菌科及检验　　一、概述和通性　　肠杆菌科（enterobacteriaceae）是由多个菌属组成，其生物学性状相似，均为革兰阴性杆菌。这些细菌常寄居在人和动物的消化道并随粪便等排泄物排出体外，广泛分布于水和土壤中。大多数肠道杆菌属于正常菌群。当机体免疫力降低或侵入肠道外组织时成为条件致病菌而引起疾病。　　其中包括常引起腹泻和肠道感染的细菌（埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌属）和常导致院内感染的细菌（枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、多源菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、普罗威登菌属和摩根菌属），以及一些在一定条件下偶可引起临床感染的细菌。　　（一）分类　　肠杆菌科

2、细菌的种类繁多。主要根据细菌的形态、生化反应、抗原性质以及核酸相关性进行分类。根据《伯杰系统细菌学手册》（1984年）将肠杆菌科的细菌分为20个属即埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、哈夫尼亚菌属、爱德华菌属、普罗威登斯菌属、变形杆菌属、摩根菌属、耶尔森菌属等。　　（二）生物学特性　　1.形态与染色肠杆菌科的细菌均为革兰阴性杆菌，其菌体大小为（1.0～6.0）μm×（0.3～1.0）μm。多数有周鞭毛，能运动，少数菌属如志贺菌属和克雷伯菌属无鞭毛，无运动能力。均不形成芽胞，少数菌属细菌可形成荚膜。　　2.培养和生化反应需氧或兼性厌

3、氧，营养要求不高，在普通琼脂培养基和麦康凯培养基上均能生长并形成中等大小的菌落，表面光滑，液体培养基中呈混浊生长。发酵葡萄糖产酸、产气，触酶试验阳性，除少数菌外，氧化酶阴性。硝酸盐还原为亚硝酸盐，但欧文菌属和耶尔森菌属的某些菌株例外。　　3.抗原构造肠杆菌科细菌的抗原构造复杂。包括菌体（O）抗原，鞭毛（H）抗原和表面抗原（如Vi抗原、K抗原）3种。0抗原和H抗原是肠杆菌科血清学分群和分型的依据。表面抗原为包绕在0抗原外的不耐热的多糖抗原，可阻断0抗原与相应抗体之间的反应，加热处理能破坏其阻断作用。　　4.变异包括菌落S～R变异和鞭毛H～0变异。肠道杆菌易出现变异菌株，表

4、现为耐药性或生化反应性质的改变。肠道杆菌易变异在细菌学诊断，治疗方面具有重要意义。　　5.抵抗力不强。加热60℃，30分钟即被杀死。不耐干燥，对一般化学消毒剂敏感。对低温有耐受力，能耐胆盐。　　6.肠杆菌科的初步分类可根据苯丙氨酸脱氨酶试验和葡萄糖酸盐试验（也可用V-P试验）将肠肝菌科初步分为三大类。见下表。　　如表：肠杆菌的初步分类菌属名苯丙氨酸葡萄糖盐酸变形杆菌属普罗维登斯均属＋＋--摩根菌属＋-克雷伯菌属-＋肠杆菌属-*＋*沙雷菌属-＋哈夫尼亚菌属-＋埃希菌属--志贺菌属--沙门菌属--枸橼酸杆菌属--爱德华菌属--第13页共13页·耶尔森菌属--　　*有例外　　

5、（三）致病性肠杆菌科细菌种类多，可引起多种疾病：　　1.伤寒和副伤寒由伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌引起。　　2.食物中毒由部分沙门菌（如丙型副伤寒沙门菌，鼠伤寒沙门菌）或变形杆菌引起。　　3.细菌性痢疾由志贺菌引起。　　4.其他感染由大肠埃希菌、变形杆菌及克雷伯菌等条件致病菌可引起泌尿生殖道、伤口等部位的感染。　　（四）微生物检验　　1.分离培养　　将粪便或肛拭标本立即接种在肠道菌选择培养基上或先增菌后再分离；血、尿或脓汁等其他标本原则上不使用选择培养基。分离纯菌后，根据菌落特点，结合革兰染色及氧化酶反应结果作进一步鉴定。　　2.鉴定　　（1）初步鉴定：原则是：①确定肠杆菌

6、科的细菌，应采用葡萄糖氧化-发酵试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌加以鉴别；②肠杆菌科细菌的分群，多采用苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，将肠杆菌科的细菌分为苯丙氨酸脱氨酶阳性、葡萄糖酸盐利用试验阳性和两者均为阴性反应三个类群；③选择生化反应进行属种鉴别。　　有很多临床实验室习惯将选择培养基或鉴别培养基上的可疑菌落分别接种于克氏双糖铁琼脂（KIA）和尿素-靛基质-动力（MIU）复合培养基管中，并根据其六项反应结果，将细菌初步定属。　　（2）最后鉴定：肠杆菌科各属细菌的最后鉴定是根据生化反应的结果定属、种，或再用诊断血清做凝集反应才能作出最后判断。　　　　二、埃希菌属　　埃

7、希菌属包括5个种，即大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。临床最常见的是大肠埃希菌。　　大肠埃希菌俗称大肠杆菌，是人类和动物肠道正常菌群。　　（一）生物学特性（性状）　　1.形态与染色为革兰阴性短杆菌，（1.0～3.0）μm×（0.4～0.7）μm。多数有周鞭毛，能运动，有菌毛、荚膜或微荚膜。　　2.培养特性　　营养要求不高，在普通营养肉汤中呈浑浊生长。普通营养琼脂上，呈圆形，凸起，边缘整齐，灰白色的光滑型菌落，直径2～3mm。血琼脂平板上，少数菌株产生溶血环。在伊红亚甲蓝琼脂上，由于发酵乳糖，菌落呈蓝紫色并有金