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1、第七章微生物的生长繁殖及其控制本章主要内容微生物生长研究方法？微生物如何进行生长？影响微生物生长的因素是什么？如何控制微生物的生长？生物个体物质有规律地、不可逆增加，导致个体体积扩大的生物学过程。生长:生物个体生长到一定阶段,通过特定方式产生新的生命个体,即引起生命个体数量增加的生物学过程。繁殖:生长是一个逐步发生的量变过程，繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程.在高等生物里这两个过程可以明显分开,但在低等特别是在单细胞的生物里,由于细胞小,这两个过程是紧密联系又很难划分的过程。一个微生物细胞合适的外界条件,吸收营养物质,进行代谢.如果同化作用的速度超过了异化作
2、用个体的生长原生质的总量(重量、体积、大小)不断增加如果各细胞组分是按恰当的比例增长时,则达到一定程度后就会发生繁殖,引起个体数目增加.群体内各个个体的进一步生长群体的生长群体生长=个体生长+个体繁殖个体生长→个体繁殖→群体生长在一定时间和条件下细胞数量的增加（微生物群体生长）微生物生长:在微生物学中提到的“生长”,一般均指群体生长,这一点与研究大生物时有所不同。一、微生物纯培养方法纯培养(pureculture)——微生物学中把从一个细胞经过培养繁殖而得到的后代,称纯培养。第一节微生物生长的研究方法①平板涂布分离法（SpreadPlate）简单易行，但易造成机
3、械损伤②平板划线分离法（StreakPlate）特点：快速、方便。分区划线（适用于浓度较大的样品）连续划线（适用于浓度较小的样品）③稀释倒平板法（PourPlate）1ml1ml1ml1ml1ml1ml9ml9ml9ml9ml首先将待分离的样品进行连续稀释,目的是得到高度稀释的效果,使一支试管中分配不到一个微生物.这种方法适合于细胞较大的微生物.④液体稀释法⑤选择性培养分离法为了从混杂的微生物群体中分离出某种微生物，可以根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等，采用选择培养的方法进行分离。利用选择培养基进行直接分离富集培养⑥单细胞（单孢子）分离法毛细管法：
4、用毛细管提取微生物个体，适合于较大微生物。显微操作仪：用显微针、钩、环等挑取单个细胞或孢子以获得纯培养。小液滴法：将经过适当稀释后的样品制成小液滴，在显微镜下选取只含一个细胞的液滴来进行纯培养物的分离。二、微生物的培养方法通常情况下，微生物的培养方法根据培养过程中对氧的需要与否分为好氧培养和厌氧培养；根据所用培养基的物理特性分为固体培养和液体培养。（一）、好氧培养方法1、固体培养方法2、液体培养方法（二）、厌氧培养方法实验室中常用厌氧手套箱、Hungate滚管及厌氧罐通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况或样品中所含微生物个体的数量(细菌、孢子、酵母菌
5、)三、生长繁殖测定方法（一）、计数法1、显微镜直接计数法1）常规方法：采用细菌计数板或血球计数板,在显微镜下对微生物数量进行直接计数(计算一定容积里样品中微生物的数量).缺点:不能区分死菌与活菌;不适于对运动细菌的计数;需要相对高的细菌浓度;个体小的细菌在显微镜下难以观察;2）其它方法:将已知颗粒浓度的样品(例如血液)与待测细胞细胞浓度的样品混匀后在显微镜下根据二者之间的比例直接推算待测微生物细胞浓度。比例计数:2、涂布平板计数法采用培养平板计数法要求操作熟练,准确,否则难以得到正确的结果:样品充分混匀；每支移液管及涂布棒只能接触一个稀释度的菌液；同一稀释度三个
6、以上重复,取平均值；每个平板上的菌落数目合适，便于准确计数；一个菌落可能是多个细胞一起形成,所以在科研中一般用菌落形成单位(colonyformingunits,CFU)来表示,而不是直接表示为细胞数。3、倒平板计数法（PourPlate）1ml1ml1ml1ml1ml1ml9ml9ml9ml9ml4、膜过滤培养法当样品中菌数很低时,可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品通过膜过滤器,然后将将膜转到相应的培养基上进行培养,对形成的菌落进行统计。（二）、生物量法1、比浊法在一定波长下,测定菌悬液的光密度,以光密度(opticaldensity,即O.D.)表示菌
7、量。实验测量时应控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内,否则不准确。2、重量法干重法：将微生物菌体或离心得到的细胞沉淀物置100—105℃的烘箱中干燥至水份去除，然后再称重。湿重法：收集微生物菌体，或将微生物培养液离心，收集细胞沉淀物，然后称重。通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算微生物群体的生物量；测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法（三）、生理指标法微生物的生理指标,如呼吸强度,耗氧量、酶活性、生物热等与其群体的规模成正相关。样品中微生物数量多或生长旺盛,这些指标愈明显,因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量热计等设备来测定相应的指标。常用于对微
8、生物的快速鉴定与检测四、
