《生长与环境条》PPT课件

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1、第七章生长与环境条件第二节生长的定义与测定方法第三节环境条件对微生物生长的影响重点:1、微生物生长的特点2、微生物群体生长的测量3、细菌群体的生长曲线及意义4、环境因子对微生物生长的影响第一节微生物的分离和纯培养微生物的分离和纯培养无菌技术用固体培养基分离纯培养用液体培养基分离纯培养单细胞(单孢子)分离选择培养分离二元培养物微生物的保藏技术第 七 章 微 生 物 的 生 长一、无菌技术在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染的技术被称为无菌技术(aseptictechnique).它是保证

2、微生物学研究正常进行的关键。第 七 章 微 生 物 的 生 长微生物培养的常用器具及其灭菌试管、玻璃烧瓶、平皿(culturedish,petridish)灭菌,不含任何生物。培养基在器皿中灭菌,也可单独灭菌后加入无菌的器具中。高压蒸汽灭菌高温干热灭菌第 七 章 微 生 物 的 生 长防止杂菌污染棉花塞,金属、塑料及硅胶帽,空气通过,微生物不能通过。平皿是由正反两平面板互扣而成,这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。第 七 章 微 生 物 的 生 长接种操作技术用接种环或接种针分离微生物

3、,或在无菌条件下把微生物由一个培养器皿转接到另一个培养容器进行培养。微生物实验的所有操作均应在无菌条件下进行。第 七 章 微 生 物 的 生 长二、用固体培养基分离纯培养菌落或菌苔大多数细菌、酵母菌,以及许多真菌和单细胞藻类能在固体培养基上形成孤立的菌落,平板分离法利用固体培养基让孤立的活微生物体生长、繁殖形成菌落,形成便于移植的菌落,进而得到纯培养。第 七 章 微 生 物 的 生 长什么是纯培养?p197所谓平板,即培养平板(cultureplate)的简称,它是指熔化的固体培养基倒入无菌平皿,

4、冷却凝固后,盛有固体培养基的平皿。Koch建立的平板分离微生物纯培养的技术简便易行,100多年来一直是各种菌种分离的最常用手段。第 七 章 微 生 物 的 生 长稀释倒平板法(pourplatemethod)涂布平板法(spreadplatemethod)平板划线分离法(streakplatemethod)稀释摇管法(dilutionshakeculturemethod)第 七 章 微 生 物 的 生 长稀释倒平板法取样---系列稀释---混菌---培养---单菌落(可能是由一个细菌细胞繁殖形成的

5、)---挑取单菌落,或重复操作---纯培养。涂布平板法无菌平皿---无菌平板---稀释样品悬液---涂布---培养---单菌落第 七 章 微 生 物 的 生 长平板划线分离法待分离材料---平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线(微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来)---培养---单菌落。第 七 章 微 生 物 的 生 长稀释摇管法对氧气更为敏感的厌氧性微生物的分离则可采用稀释摇管培养法进行。将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后,冷却并保持在50℃左右,用这些试管进

6、行梯度稀释待分离材料,试管均匀,冷凝,倾注一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合物,将培养基和空气隔开。培养后,菌落形成在琼脂柱的中间,挑取和移植单菌落。第 七 章 微 生 物 的 生 长三、用液体培养基分离纯培养接种物在液体培养基中依序稀释,以达高度稀释的效果,使一支试管中分配不到一个微生物。如果稀释后的多数试管微生物不生长,则有微生物生长的试管得到的培养物可能就是纯培养物。第 七 章 微 生 物 的 生 长四、单细胞(单孢子)分离采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培

7、养,称为单细胞(单孢子)分离法。难度用途第 七 章 微 生 物 的 生 长五、选择培养分离通过选择培养进行微生物纯培养分离的技术称为选择培养分离。可利用选择培养基进行直接分离或富集培养。第 七 章 微 生 物 的 生 长选择培养基?富集培养基?利用选择培养基进行直接分离主要根据待分离微生物的特点选择不同的培养条件,得到纯培养物。富集(选择)培养主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同,制定特定的环境条件,使仅适应于该条件的微生物旺盛生长,从而使其在群落中的数量大大增加,人们能够更容易地从自然界中

8、分离到所需的特定微生物。富集(选择)条件温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养第 七 章 微 生 物 的 生 长六、二元培养物只有一种微生物的培养物称为纯培养物,含有二种以上微生物的培养物称为混合培养物,而如果培养物中只含有二种微生物,而且是有意识地保持二者之间的特定关系的培养物称为二元培养物。例如二元培养物是保存病毒的最有效途径。第 七 章 微 生 物 的 生 长七、微生物的保藏技术传代培养保藏冷冻保藏干燥保藏法第 七 章 微 生 物 的 生

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