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时间:2019-06-22
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1、实验十三琼脂扩散试验一、实验目的学习掌握琼脂扩散试验的原理与应用熟悉掌握其基本操作方法二、实验原理沉淀反应是指可溶性抗原与相应抗体特异性结合,在二者比例适当并有电解质存在及一定的温度条件下,可形成肉眼可见的沉淀物的反应。根据反应中使用的介质和检测方法不同,可将沉淀反应分为液相沉淀反应和凝胶内沉淀反应两种类型适合比例性抗体含量抗原含量前带后带等价带网格学说(latticetheory)抗体过剩抗原过剩抗体抗体比例合适液相沉淀反应环状沉淀絮状沉淀(免疫比浊)凝胶内沉淀反应单向琼脂扩散双向琼脂扩散免疫电泳凝胶内沉淀反应免疫扩散技术免疫电泳技术单向扩
2、散试验双向扩散试验火箭电泳对流电泳免疫电泳免疫扩散根据沉淀线的数量、位置和形状,与已知的标准(或正常)抗原抗体形成的沉淀线比较,即可对样品中所含成分及其性质进行分析、鉴定。由于电场的作用,限制了抗原、抗体的自由扩散,而使其定向泳动,因而增加了试验的灵敏度,并缩短反应时间。根据样品的沉淀峰长度即可计算出待测抗原的含量;反之,当琼脂中抗原浓度固定时,便可测定待测抗体的含量。三、实验器材兔抗BSA抗体BSA0.01mol/LPBS缓冲液1%离子琼脂打孔器四、实验内容及步骤1、琼脂板制作2、打孔3、加样4、反应5、结果观察
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