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时间:2019-06-21
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1、第五章、植物人工繁殖植物人工繁殖植物组织培养人工种子植物胚胎培养脱毒植物培养一、植物人工繁殖器官形成方式植物无性繁殖过程中器官形成方式有:不定芽型器官型器官发生型胚状体发生型原球茎型1、不定芽型:诱导顶端分生组织产生不定芽,再生成植株的方式。即选取已经发育成熟的顶芽和腋芽,连同它们的短枝经表面消毒后,在无菌条件下培养,诱导不定芽并使其生根形成植株的方式。只要有明显的顶端分生组织和次生分生组织的植物均适用。特点:不仅繁殖率高,利用外植体原有的芽,包括隐芽在内繁殖数量大,同时能保持该物种的遗传稳定性。不定芽型2、器官型:从器官外植体诱导不定芽,再生成植株的方式。即选取充分发育的器官诸如
2、茎、叶、花器、鳞片等,经离体培养而产生植株的方式。如烟草、大蒜、甘蓝的花茎培养诱导不定芽;水仙、百合、风信子、贝母的鳞片培养诱导不定芽;亚麻的下胚轴培养诱导不定芽;虎眼万年青的任何一部分均可诱导不定芽。特点:遗传性也比较稳定,但繁殖速度慢。3、器官发生型:从器官外植体诱导愈伤组织,经愈伤组织细胞的分化再生成植株的方式。例:禾本科:甘蔗、水稻、小麦,百合、小苍兰、菊花、番茄、石刁柏、柑橘、棕榈等常以器官发生型方式再生植株。特点:繁殖速度快,由于经愈伤组织而再生植株,遗传性不稳定。愈伤组织分化不定芽4、胚状体发生型由植物器官、组织和细胞培养而直接发生类胚体结构,最后以胚状体成苗的方式。
3、在被子植物中有胚状体发生的植物已达100余种,分属近40个科。特点:遗传性一致,有些植物体细胞发生数量也相当大。如胡罗卜1L培养基有10万个以上的胚状体。器官发生与胚状体发生几种器官发生方式的优点、缺点比较(1)不定芽型容易成苗,对培养基要求不高,后代遗传性较为稳定,但取材受到一定的限制,仅限于具有明显顶端分生组织和次生分生组织的物种;(2)器官型和胚状体发生型,对培养基要求高,器官发生条件苛刻。繁殖数量不如不定芽型和器官发生型多,但遗传性稳定;(3)器官发生型成苗数量大,对培养基要求不算高,容易调配。但由于是通过愈伤组织成苗,细胞的染色体容易发生数量和结构变异,很难使再生植株群体
4、保持稳定的遗传性。5、原球茎型是兰属特有的器官发生方式。种子消毒后,在培养基上播种,经一段时间培养而发生原球茎,然后由原球茎直接长成植株。原球茎分化蝴蝶兰原球茎分化二、植物组织培养植物组织培养(planttissueculture):将植物器官、组织、细胞或原生质体等外植体材料于无菌条件下培养在人工培养基上,在适当条件下诱发长成完整植株的一种技术。主要内容发展历史植物组织培养的基本步骤植物细胞分化与脱分化植物组织培养再生植株的途径植物组织培养的问题分析1、发展历史1细胞学说SchwannSchleiden植物组织培养之父Haberlanclt1902年细胞全能性White1934年
5、诱导愈伤组织。1943年正式提出细胞全能性植物激素的发现F.W.Went发现生长素1934年1948年,崔徴和Skoog发现激素杠杆现象1956年,发现KT细胞-胚状体-植株Steward胡萝卜1958年发展历史220世纪60年代后期,植物组织培养开始走向大规模应用阶段。法国Morel(1952年)等以大丽花茎尖进行培养试验,得到了无病毒植株。通过原球茎途径快繁,成为“兰花工业”1964-1966年,印度科学家Guha和Maheswari在曼陀罗花药培养中首次由花粉诱导得到了单倍体植株。1972年,Carlson通过两个种的烟草原生质体融合培养,获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。2
6、、植物组织培养的基本步骤培养基的准备-培养材料的采集-消毒-制备外植体-接种和培养-芽和根的诱导-练苗移栽涉及内容:培养基及其配制外植体的选择及处理接种和培养(环境条件的控制)芽和根的诱导组培苗的练苗和移栽(1)、培养基及其配制基本培养基MS,B5,HE,SH,ER,NT,KM-8P,White,N6,RM,BM,Hoagland,CPW等完全培养基培养基中包括植物生长所必需的16种营养元素和某些生理活性物质。生长物质配制:IAA、IBA、GA3先溶于少量95%酒精,再加水定容至一定浓度;NAA可溶于热水或少量95%酒精中,再加水定容至一定浓度2,4-D用1MNaOH溶解后,再加水
7、定容至一定浓度KT和BA先溶于少量1MHCl中,再加水定容玉米素先溶于少量95%酒精中,再加热水至一定浓度。培养基的配制配制母液:按顺序加药,避免沉淀;配制培养基:琼脂、糖、大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素、调pH值常用培养基富盐平衡培养基:MS、LS、BL、BM、ER高硝态氮培养基:B5、N6、SH。中盐培养基:Nitsch、Miller、Blaydes、H低盐培养基:White、WS、HE、HB母液配制母液配制顺序是:用灵敏度为0.1mg的天平称取药品。往烧
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