GBT 19371.2-2003 饲料中液态蛋氨酸羟基类似物的测定 高效液相色谱法

《GBT 19371.2-2003 饲料中液态蛋氨酸羟基类似物的测定 高效液相色谱法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、ICS65120B46中华人民共和国国家标准GB/T19371.2-2003饲料中液态蛋氨酸轻基类似物的测定高效液相色谱法Determinationofliquidmethioninehydroxyanalogueinfeeds-Highperformanceliquidchromatography2003-11一10发布2004-05-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局GB/T19371.2-2003月U舀本标准由国家质量监督检验检疫总局提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准由国家饲料质量监督检验中心(北京)负责起草，诺伟

2、思国际营养有限公司参加起草。本标准主要起草人:闺惠文、赵小阳、王彤、杨文军、张秉范。GB/T19371.2-2003饲料中液态蛋氨酸轻基类似物的测定高效液相色谱法范围本标准规定了高效液相色谱法(HPLC)测定配合饲料及浓缩饲料中液态蛋氨酸轻基类似物的方法。本标准最低检出量为1Ago2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准GB/T66

3、82分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样方法原理用10%的乙睛水溶液提取样品中的液态蛋氨酸经基类似物，用氢氧化钾将蛋氨酸轻基类似物水解为有活性的单体，磷酸调节水解液的PH值。反相高效液相色谱分离，紫外检测器210nm处测定。4试荆和溶液以下所用的试剂，除特别注明外均为优级纯试剂，水符合GB/T6682一级用水的规定。4.1乙睛:色谱纯。4.2提取剂:10%乙睛水溶液4.3氢氧化钾溶液:500g/L.4.4磷酸溶液:1十1(V+V).4,5HPLC流动相:0.05%三氟乙酸水溶液4.6液态蛋氨酸轻基类似物标准样品:除非购买标有准确含量的

4、标样，否则需准确测定含量。5仪器设备5.1振荡器:水平方向振荡，频率250r/min-300r/min,5.2溶剂过滤系统:全玻璃滤器，孔径。.2[Cmo5.3HPLC系统，由下述部件组成:—泵，无脉冲。—UV检测器，适合在210nm处测定。—保护柱:填有C,a键合硅胶的预柱或性能相当的其他保护柱—分析柱:填有粒度为5um键合硅胶的C,。柱或性能相当的其他分析柱。6采样6.1采样步骤:按GB/T14699.1采集实验室样品GB/T19371.2-20036.2试样的制备:将实验室样品粉碎，全部通过。.45mm筛，充分混匀，贮于磨口瓶中备用。分析步骤注意:液

5、态蛋氨酸轻基类似物PH较低，操作时应避免接触皮肤，如不慎接触皮肤，立即用水清洗。7.1参比样品的制备为了检验分析的准确性，每次分析(尤其是初次测定)均应进行参比样品的测定。参照以下步骤制备不同浓度的参比样品注:添加用液态蛋氨酸轻基类似物要准确测定含量，混合样品可以用家庭用食品搅拌机，确保样品混合均匀。称量样品时，准确至小数点后两位。空白样品是指确保没有加人液态蛋氨酸经基类似物的饲料样品。7.1.15.0%参比样品的制备:准确称取282.95g空白样品，准确加人17.05g液态蛋氨酸经基类似物(88.00)标准样品，混合均匀。7.1.20.4%参比样品的制备

6、:准确称取138.00g空白样品，准确加人12.00g5.0%参比样品，混合均匀7.1.30.2%参比样品的制备:准确称取144.00g空白样品，准确加人6.00g5.0%参比样品，混合均匀。根据需要配制不同浓度的参比样品。参比样品配制后室温下平衡三天后使用，6个月内有效。7.2提取称取试样2g-5g(精确至。.0001g)，置于150ml一具塞三角瓶中，准确加人一定量的提取液(一般50mL-100mL),混合后置于振荡器上剧烈振荡30min,静置10min，离心或过滤，滤液备用。7.3水解准确移取滤液(7.2)5ml于10mL具塞试管中，准确加人0.1m

7、l氢氧化钾溶液(4.3)，手摇至少10s，准确加人0.2mL磷酸溶液(4.4)，手摇至少10s，水解液离心或过滤，滤液过。.2pm滤膜后备用。7.4标准溶液的制备准确称取1.1360g液态蛋氨酸经基类似物(88.00%)标准样品，用提取剂(4.2)定容至1000mL,该溶液的浓度为1.00mg/mL.准确吸取2.5m工=5.0mL,10.0mL,20.0mL以上溶液至50mL容量瓶，用提取剂(4.2)定容至刻度后摇匀，此标准系列的浓度为0.05mg/mL,O.10mg/mL,O.20mg/mL,0.40mg/mL,1.00mg/mL,用以上标准系列与试样提

8、取液同时做水解，测定。7.5HPLC测定7.5.1色谱条件a)流速