GBT 14924.10-2001 实验动物 配合饲料 氨基酸的测定

《GBT 14924.10-2001 实验动物 配合饲料 氨基酸的测定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、c.B;,r14924.102001前言本标准的全部技术内容为推荐性的。本标准从GB14924---1994(1实验动物全价营养饲料沙中分离出来。形成独立的标准本标准规定r实验动物配合饲料中三种色氨酸的测定方法:第一法高效液相法:第二法荧光分光光度法;第_法分光光度法。第一法为仲裁法。本标准及其配套标准自实施之日起.代替GB14924-1994本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会木标准主要起草人:张瑜、周瑞华、贾建斌、王国栋、刘素梅、郑陶、刘秀梅本标准由国家科学技术部委托技术归口单位中国实验动物

2、学会负责解释。本标准于1994年1月首次发布中华人民共和国国家标准实验动物配合饲料GB/'r14924.10-2001氨基酸的测定Laboratoryanimals-Formulafeeds代替(Ii1,1921--1994-Determinationofaminoacids1范围本标准规定了实验动物配合饲料中氨基酸的测定方法。本标准适用于实验动物小鼠、大鼠、兔、豚鼠、地鼠、犬和猴的配合饲料及其原料中氨基酸的测定2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文本标准出版时，所示版本均为有效.所有标准都会被修订，使

3、用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB门_14965一1994食物中氨基酸的测定方法GI3/T15400-1994饲料中色氨酸的测定方法分光光度法GB/T18246-2000饲料中氨基酸的测定3测定方法3门配合饲料中抓基酸的测定按GB/r18246,GB/T14965中相关规定执行。3.2配合饲料中色氨酸的测定3.2.1第一法色氨酸的测定挂GB/r15400--1994中的规定执行。12.2第二法荧光分光光度法3.2.2，原理伺料中蛋白质在酸水解过程中，其色氨酸极易被水解本法用碱水解蛋白质直接测定色氨酸的天然荧光。在蛋

4、自质水解液中，只有色氨酸和酪氨酸可以检测到荧光。在pH为11时，色氨酸的荧光强度比隋氨酸大10。倍，且两种氨基酸的荧光峰相差40nm以上。根据该特点.可在有大量酩氨酸存在F，检测色}4i酸的含量。3.2.22试P,I]12.22.1氢氧化钠溶液(5mol/I):将20g氢氧化钠用0.5%可溶性淀粉溶解并定容至100m1，临!月1111N指」。3.2.2.2.2尿素溶液(4mol/I、:调pH到113.2.2-2.350少‘盐酸:1份浓盐酸(优级纯功口1份重蒸水3.2.2.2.4嗅}1里酚9水溶液(0.5g/I_):0.1g浪百里酚蓝指

5、示剂，加。Im01八氢氧化钠溶液中华人民共和国国家质i$监督检验检疫总局2001-08-29批准2002-05一01实施Gs/T14924.10一2001I.(;till，配成终浓度为。.5g/I的水溶液3.2-2.2,5高纯氮(含量99.99yo)3.2.22.6辛醇甲苯溶液:含l洲辛醇3-2-2.2-7色氨酸标准贮备液(1mg/mI):准确称取色氨酸100mg，用。.005mol/I氢氧化钠溶液溶解并定容至100nil。32.2.2.8色氨酸标准应用液(0.2mg/m工):准确吸取色氨酸标准贮备液70m工于50m工容量瓶中用水稀释

6、至刻度，使用时现配。32.2.3仪器荧光分光光度计、减压蒸发器、聚四氟乙烯管(5m工一)3.2.2.4样品处理植物性样品粉碎后，贮于样品瓶中备用。3.2-2.5分析步骤3.2.2.5.1样品制备准确称取含粗蛋白质约5mg的样品，置于聚四氟乙烯管中。加含可溶性淀粉5mol/工氢氧化钠溶液1MI，加人一滴辛醇，将样品管放在一容器内。该容器外加冰、盐降温，抽真空1.3kPa(10mmHg)以下，保持15min充氮气再减压，反复进行三次。将充氮减压容器密封，放人110C烘箱中，碱水解样品22h。样品冷却后加(1:1)盐酸。.7m工，用重馏水将

7、样品分别洗人25ml容量瓶，}，用嗅百93酚蓝作指示剂调pH至中性，用重蒸馏水定容至刻度3.22.5.2测定:吸取样品液1ml，于10ml带塞刻度试管中，加4mol/I尿素溶液(pHll)稀释至10ml。于激发波长280nm，发射波长360rim下测定荧光强度，从标准曲线上查出该样品中色氨酸的含叭〕3.2-2.5.3标准曲线的绘制取双份聚四氟乙烯试管分别取色氨酸标准应用液。.0,0.5,1.5,2.0ml.,相当T-色氨酸含量0.0,0.1,0.3,0.4mg。按样品制备的同样步骤进行碱水解(3.3.1.5.1)，以测出的标准系列的荧

8、光强度为纵坐标，以色氨酸标准含量为横坐标，绘制标准曲线。3-2,2.6计算见式(l)X=‘x了、，、。.................···。·⋯⋯(1)一n1VV刀刁式中:x一色氨酸含量,mg/100g;‘从标准曲线