GB 4789.7-1994 食品卫生微生物学检验 副溶血性弧菌检验

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1、中华人民共和国国家标准GB食品卫生微生物学检验4789.7一94副溶血性弧菌检验储GB4789.7-84MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneExaminationofVibrioparahaemolyticus1主题内容与适用范围本标准规定了副溶血性弧菌的检验方法。本标准适用于食品和食物中毒样品中副溶血性弧菌的检验。2引用标准GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3设备和材料3.1试管:20mmX200mm,15mmX100mm,3.2吸管1mL,5mL,10mL,3.3平皿:皿底直径90mm,3.4广口瓶或三角瓶

2、。3.5电动均质器或乳钵。3.6酒精灯。3.7接种灯和接种环。3.9试管架。3.10载玻片。3.11温箱。3.12显微镜。4培养墓和试荆4.1氯化钠结晶紫增菌液:按GB4789.28中4.39规定。4.2氯化钠蔗糖琼脂:按GB4789.28中4.40规定。4.3嗜盐菌选择性琼脂:按GB4789.28中4.41规定。4.43.500氯化钠三糖铁琼脂:按GB4789.28中4.42规定。4.5氯化钠血琼脂:按GB4789.28中4.43规定。4.6嗜盐性试验培养基:按GB4789.28中4.44规定。4.73.500氯化钠生化试验培养基:按GB4789.28中4.45规定。4.8

3、革兰氏染色液:按GB4789.28中2.2规定。4.9甲基红试剂:按GB4789.28中3.4规定。中华人民共和国卫生部1994一03-18批准1994一09一01实施GB4789.7一944.10靛基质试剂:按GB4789.28中3.13规定。4.11V-P试剂:按GB4789.28中3.4规定。5检验程序副溶血性弧菌检验程序如下:6操作步骤6.1分离培养:首先称取祥品25g，加225mL3.5%灭菌盐水，用均质器打碎或用乳钵磨碎，接种氯化钠琼脂平板和嗜盐菌选择性琼脂平板各I个，同时取10mL，加人100mL增菌液中，放370C8^16h培养后，涂上述平板进行分离，于370

4、C18-24h培养后取出观察。6.2挑取上述可疑菌落，转种3.50/n氯化钠三糖铁斜面，37`C.24h观察结果。6.3涂片镜检:将三搪铁培养基反应可疑者(底层变黄葡萄糖产酸不产气，斜面不变乳塘蔗糖不分解，有动力，不产生硫化氢)进行涂片革兰氏染色镜检形态。6.4嗜盐性试验:将上述可疑培养物分别接种于不同浓度的盐膝水中，370C24h培养后观察生长情况，在无盐和10肠以上盐的陈水中不生长，在7%盐的陈水中生长良好者进行下列有关试验。6.5生化试验:分别接种各类生化培养基，放37C,除V-P,靛基质、甲基红试验培养48h后加试剂观察外，其他均可在24h观察。GB4789.7一94

5、表1副溶血性弧菌的生化学性状葡萄糖产酸+葡萄糖产气+V-P蔗糖靛基质乳塘赖氨酸十甘露醉牛鸟氮酸+/一硫化氢一精氨酸甲基红+溶血+/注:+阳性;一阴性;+/一多数阳性，少数阴性表2副溶血性弧菌主要性状与其他弧菌的鉴别葡阿，氧萄赖精鸟靛V甘拉甘鼠半硝无化糖氮氨奴基明乳蔗露肌伯露李乳酸泳盐盐陈水，%名称酶产酸酸酸质胶P掩糖醉醉胶糖糖搪盐动陈气糖昔水6810副榕血性弧菌+++d十干d++V.parahaemolyticus溶燕性弧菌++++++++十++V.alginolyticusO,霍乱弧菌+++d(d)++十++ldV.choleraeO,非O,霍乱弧菌+++d(d)+++++

6、}dV.choleraenonO,拟态弧菌十++(d)一++++}dV.mimicus河弧菌+dd+十++dd++++dV.fluialis创伤弧菌++++dd++V.uuluifbus梅氏弧菌d+d++d++dd一dV.metschnikaaii霍利斯弧菌+十VhollisaeV.damsel.+一d+注:十90%以上阳性，一90%以上阴性;d11%-89%阳性认十)迟缓阳性;(d)11%-89编迟缓阳性.7动物试验将上述各类反应的副溶血性弧菌接种3.5氯化钠陈水，经370C16-18h培养后，小鼠腹腔注射。，3mL，观察2--3d，将死亡小鼠进行解剖并做分离培养。1R0G

7、B4789.7一94附加说明:本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。本标准主要起草人周桂莲。本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。