DB34T 1390-2011 动物疫病监测样品（血清、棉拭子）采集技术规范

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1、ICS11.220B41DB34安徽省地方标准DB34/T1390—2011动物疫病监测样品（血清、棉拭子）采集技术规范TechnicalcodeforSerumandswabSamplescollectionforAnimalepidemicdiseasedetection2011-04-21发布2011-05-21实施安徽省质量技术监督局发布DB34/T1390—2011前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省畜牧兽医局提出。本标准起草单位：安徽省动物疫病预防与控制中心。本标准主要起草人：占松鹤、刘华、何长生、

2、汪彤、沈艳、王立、江定丰、陈静、潘鑫、朱良强。IDB34/T1390—2011动物疫病监测样品（血清、棉拭子）采集技术规范1范围本标准规定了国家规定的强制免疫病种监测用血清、棉拭子样品的采集、样品编号、采样单填写、保存和运输的方法。本标准适用于安徽省行政区域内春、秋两季国家强制免疫病种集中监测时所需血清、棉拭子样品采集、保存及运输。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T766-2004高致病性禽流感无

3、害化处理技术规范NY/T767-2004高致病性禽流感消毒技术规范NY/T768-2004高致病性禽流感人员防护技术规范3术语和定义3.1国家规定的强制免疫病种指猪瘟、口蹄疫、高致病性猪蓝耳病、高致病性禽流感。3.2双拭子样品指同一家禽的咽喉拭子和泄殖腔拭子，一并放置于一个加有0.8～1.0mLPBS（含有抗生素）离心管中的拭子样品。4采样前的准备4.1采样要求4.1.1根据采样目的，采集不同类型和不同数量的样品。4.1.2采样人员必须是兽医技术人员，熟悉采样器具的使用，掌握正确的釆样方法。4.2器具和试剂4.2.1器具1DB34/T1390

4、—20114.2.1.1血清采集器具：采样箱、镊子、75％酒精棉、2.5mL、5mL、10mL一次性注射器、样品容器（如1.5mL塑料离心管、10mL玻璃试管、自封塑料袋等）。4.2.1.2拭子采集器具：塑料盒（1.5mL塑料离心管专用）、无菌棉拭子、剪刀。4.2.1.3冷藏容器（如保温箱、保温桶、泡沫盒等）、冰袋。4.2.2试剂加有抗生素的pH7.4等渗磷酸盐缓冲液（PBS）（配制方法见附录A）。4.3记录和防护材料不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单、记录本等；口罩、一次性PE手套或乳胶手套、防护服、防护口罩、防护帽、胶靴等。5样品采集5.

5、1基本要求采样人员采样时按NY/T767-2004做好消毒工作，按NY/T768-2004做好防护工作。同种动物采样先到养殖场，后到散养户。采样过程要注意无菌操作，同时避免交叉污染。采样后的手套、防护服、口罩防、护帽、包装袋等废弃物要按NY/T766-2004进行无害化处理；保定器具要按NY/T767-2004做好消毒。5.2血清样品5.2.1采样方法采集家禽血样时，使用2.5mL或5mL一次性无菌注射器，心脏或翅静脉采血，每只禽采全血1.5～2.5mL；采集猪血样时，使用5mL或10mL一次性无菌注射器，仔猪或中等大小的猪前腔静脉采血，成年

6、猪可用耳静脉采血，每头采全血3～5mL；采集牛血样时，使用12号以上针头穿刺颈静脉，接5mL一次性注射器或10mL玻璃试管，每头采全血3～5mL；采集羊血样时，使用5mL一次性注射器（8号以上针头），颈静脉采血，每头采全血3～5mL。抽血时，不宜将注射器抽满，抽血完毕后，将注射器内芯活塞抽至最大量程，以便析出血清。5.2.2离心方法全血样品采集完毕后，不可立即放入冰盒中，最好在室温下（20℃）放置2～4小时（防止暴晒），环境温度较低时可在恒温培养箱20～37℃环境下放置1小时，待全血凝固并析出血清后，注入1.5mL或5mL离心管，8000转离

7、心4分钟或3000转离心20分钟，取上清液置于另一离心管内。5.2.3样品编号在离心管管盖或管壁上用防水记号笔做好标记（与采样注射器编号一致），以“A01,A02,A03……、B01,B02,B03……、C01,C02,C03……、D01,D02,D03……、E01,E02,E03……、F01,F02,F03……”（字母与数字间不要加任何符号）模式编写。不同种类动物，英文字母不同（猪A，羊B，牛C，鸡D，鸭E，鹅F），同一种动物英文字母相同，数字不同。编号不可出现重复。5.2.4血清要求要求无溶血、无腐败，每份血清不少于0.8mL，不同禽（或

8、畜）只的血样不能混合。2DB34/T1390—20115.3拭子与粪便样品5.3.1采集方法5.3.1.1禽双拭子将双头棉拭子（最好为木质）一端插入泄殖腔约1.5～