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1、ICS65.020.20B21备案号:DB11北京市地方标准DB11/T829—2011白菜品种纯度及真实性分子检测方法MethodsofidentifyingvarietalpurityandgenuinenessofChinesecabbagebyusingmolecularmarkers2011-11-10发布2012-03-01实施北京市质量技术监督局发布DB11/T829—2011目次前言.................................................
2、................................II1范围...............................................................................12规范性引用文件.....................................................................13术语与定义.................................................
3、........................14原理...............................................................................25仪器设备及耗材.....................................................................26试剂和溶液配制........................................................
4、.............27引物选用原则及筛选方法.............................................................38操作步骤...........................................................................49检测结果...........................................................................6
5、附录A(规范性附录)所用溶液的配置方法..............................................8附录B(资料性附录)白菜品种纯度检测常用的SSR引物名称及序列.......................11附录C(资料性附录)白菜真实性鉴定常用的ISSR引物名称及序列........................13附录D(规范性附录)白菜基因组DNA提取方法.........................................15附录E(规范
6、性附录)6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法...................................17附录F(规范性附录)5%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法.................................19IDB11/T829—2011前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由北京市农业局提出。本标准由北京市农业标准化技术委员会归口。本标准由北京市农业局组织实施。本标准起草单位:北京市种子管理站。标准主要起草人:田雷、赵山普、贾希海、赵青春、彭瑞迪
7、、王辉、福德平、高勇、张连平、黄寰。IIDB11/T829—2011白菜品种纯度及真实性分子检测方法1范围本标准规定了结球白菜和不结球白菜种子品种纯度及真实性鉴定的SSR、ISSR分子标记检测方法和对检测结果的判定标准。本标准适用于结球白菜和不结球白菜常规种子、杂交种子及其亲本的品种纯度和真实性鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T3543.4农作
8、物种子检验规程发芽试验GB/T3543.5农作物种子检验规程真实性和品种纯度鉴定3术语与定义下列术语和定义适用于本文件。3.1SSR标记simplesequencerepeatmarker,SSR简单重复序列(SSR),又称短串联重复序列或微卫星序列,它是一类以1bp~5bp的短核苷酸序列为基本单位串联重复状分布于整个基因组内的重复序列。3.2ISSR标记intersimplesequencerepeatmarker,ISSR内部简单重复序列(ISSR),是利用包含重复序列并在3’端或5’端锚定
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