《拓展与练习》PPT课件

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1、DNA分子的结构模式图3’C5’C5’C3’C3.4nm2nm小沟大沟两条DNA链反向平行，一条走向是5’→3’，另一条走向是3’→5’。DNA复制子及复制过程：DNA复制是从复制子起点开始的。合成的方向是5’→3’。高等生物染色体DNA的复制一般是多复制子表示复制起始点一个复制点与它的两个终止点组成一个复制子,一个DNA上可以有多个复制子.3’5’3’5’3’3’5’5’原核生物染色体DNA的复制一般是单复制子DNA测序仪显示的碱基排列顺序人类基因组是指人体DNA分子所携带的全部遗传信息。人的单倍体基因组由24条双链的DNA分子组成（包括1～22号染色体DNA与X

2、、Y染色体DNA），上边有30亿个碱基对，估计有3～5万个基因。人类基因组计划就是分析测定人类基因组的核甘酸序列.其主要内容包括绘制人类基因组的四张图，即遗传图、物理图、序列图和转录图。绘制这四张图好比是建立一个“人体地图”，沿着地图中一个个路标，如“遗传标记”、“物理标记”等，可以一步步地找到每一个基因，搞清楚每一个基因的核苷酸序列。体内DNA复制的条件?RNA引物DNA解旋RNA引物生成DNA生成切掉引物生成冈崎片段DNA片段的连接PCR技术的原理:聚合酶链式反应解旋酶DNA母链4种脱氧核苷酸DNA聚合酶引物（RNA）打开DNA双链模板合成子链原料催化子链合成使

3、DNA聚合酶能从引物3’端开始连接脱氧核苷酸变性（80-100）Taq聚合酶（耐高温）15—30个核苷酸构成DNA或RNA思考：体外扩增DNA如何进行？体内体外PCR技术的原理利用DNA分子的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合，从而完成体外DAN分子的扩增。体外DNA复制的条件：四种脱氧核苷酸、耐高温的聚合酶、引物、模板复制的方向：子链的5’端向3’端延伸DNA双链单链变性（加热）复性（缓慢冷却）DNA分子的热变性原理变性的目的：复性的目的：解开双链有利于引物与两条单链的结合TaqDNA聚合酶：热稳定性，具有逆转录活性。PCR的反应过程每个循环包括：变性

4、——复性——延伸温度（℃）时间（min）94726094℃变性（1min）60℃退火（1min）72℃延伸（1.5min）循环1循环2循环3PCR反应的温度循环周期PCR反应的每一个温度循环周期都是由DNA变性、引物退火和反应延伸三个步骤完成的。图中设定的反应参数是94℃变性1min，60℃退火1min，72℃延伸1.5min。如此周而复始，重复进行，直至扩增产物的数量满足实验需求为止。PCR技术与体内DNA复制的区别：1.PCR不需要解旋酶；体内DNA复制需要；2.PCR需要耐热的DNA聚合酶（常用TaqDNA聚合酶），而生物体内的聚合酶在高温时会变性；3.PCR

5、一般要经历三十多次循环，而生物体内DNA复制需要生物体自身的复制。练习1、下图是DNA复制的有关图示。A→B→C表示大肠杆菌的DNA复制。D→F表示哺乳动物的DNA分子复制片段。图中黑点表示复制起点，“　”表示复制方向，“　”表示时间顺序。（2）哺乳动物的DNA分子展开可达2m之长，若按A~C的方式复制，至少8h，而实际上约6h左右，根据D~F图分析，是因为____________________________________。（3）A~F均有以下特点：延伸的子链紧跟着解旋酶，这说明DNA分子复制是_____________。（4）C与A，F与D相同，C、F能被如

6、此准确地复制出来，是因为___________________________________。（1）若A中含有48502个碱基对，而子链延伸速率是105个碱基对/s，则此DNA分子复制约需30s，而实际上只需约16s，根据A~C图分析，这是因为_______________________。复制是双向进行的从多个起点同时进行复制边解旋边复制DNA分子独特的双螺旋结构为复制提供精确的模板，碱基互补配对原则保证DNA分子复制的准确无误