《徒手切片法》PPT课件

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1、基础生物学技术(2013)植物学部分实验大纲实验一植物细胞及细胞内容物的形态结构观察(涂片法)实验二植物组织及叶的解剖结构观察(徒手切片法)实验三植物根和茎形态结构的解剖与观察(徒手切片法)实验四植物花粉形态和气孔器构造的观察(整体封片法)实验五花的形态和结构实验一、植物细胞及细胞内容物的形态结构观察(涂片法)(一)石细胞形态结构观察取梨肉一小块,置载玻片上用镊子压碎,0.1%番红染液染色,盖上盖玻片。5分钟后,置显微镜下观察。注意石细胞的形态特征、纹孔的特点。番红是从藏红花柱头中提取的一种天然染色剂

2、,为橙红色粉末。是植物组织学实验中最常用的染色剂之一。可溶解于水和乙醇。通常配成1%水溶液染植物的木质部,也可以按照以下配方配成苯胺番红液对组织进行块染:番红5g,95%乙醇50mL,苯胺20mL,蒸馏水450mL。番红能够对植物的木质化、栓质化和胶质化部分进行染色,染色后的部分为红色。染色时间一般为2~24hrs,常与固绿等进行合作染色。(二)淀粉粒观察在马铃薯切口刮取少量白色浆液,蒸馏水装片。置显微镜下观察(光线调暗)。注意淀粉粒的形态特征:卵圆形或椭圆形颗粒,有脐、偏心轮纹。然后在盖玻片的一侧滴

3、一滴碘—碘化钾,调亮视野,观察淀粉粒颜色的变化(原因是什么)。实验二植物组织及叶的解剖结构观察(徒手切片法)(一)徒手切片法特点不需要机械设备,能保持活体的情况。主要用在组织化学、生药鉴定、石蜡切片选材等。方法要领切片最要紧是平而薄,无需切成完整的。例如茎的横切面,无须切成整圆形,只需一角就足够了。步骤①一般用左手的大拇指、食指和中指这三个手指拿住材料,使材料突出在指尖上面,使刀片不会割伤它们。用右手拿刀片。两只手应该可以自由活动,不要使它们靠紧身体,或压在桌子上。②刀片刀口放在切面上,从刀片刀口下方

4、起,斜向后拉切,切时要用臂力,不用腕力。不必太用力,否则就不易切薄。步骤③连续切几片后,取下切片,转移到载玻片上的一滴水中,放在低倍显微镜下检查。假如切片充分透明,细胞重叠不明显,就可使用。否则得重切。④过于柔嫩的植物器官,如叶片,难以直接拿住,可以用坚固而易切的材料夹后再切,如胡萝卜片。⑤作临时观察的话,直接用水或甘油封片就行。如果要更清楚地显示细胞结构及其化学成分,则可以进一步染色。(二)叶片的解剖结构观察(1)切片操作将夹竹桃叶片切成长和宽约1厘米小片;把材料夹在两片各长2厘米、宽1厘米和厚0.

5、3厘米的胡萝卜片间,作横切。(2)染色和观察用镊子选取薄而均匀的切片,置载片上;(用吸水纸吸取水液,加一滴0.01%亚甲蓝水溶液染色5分钟;95%乙醇洗涤后)加一滴甘油,再加盖片;在显微镜下观察。注意观察夹竹桃叶的一般结构(如两面叶,叶肉组织有栅栏组织和海绵组织之分;复表皮等)及其特有的气孔窝;同时注意不同组织在叶片中的位置及承担的功能。(三)厚角组织的观察(芹菜叶柄)(1)切片操作取新鲜的芹菜叶柄,作横切。(2)染色和观察用镊子选取薄而均匀的切片,置载片上;用吸水纸吸取水液,加一滴0.01%亚甲蓝水

6、溶液染色5分钟;95%乙醇洗涤后加一滴甘油,再加盖片;在显微镜下观察。着重观察其厚角组织的结构特征。

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