《吸光光度法工》PPT课件

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1、1第九章吸光光度法9.1吸光光度法的基本原理9.2光度计及其基本部件9.3显色反应及显色条件的选择9.4吸光度测量条件的选择9.5吸光光度法的应用29.1吸光光度法的基本原理一、概述：比色法：比较溶液颜色的深浅确定组分含量的一种方法。吸光光度法是基于被测物质的分子对光具有选择性吸收的特性而建立起来的分析方法。3经证明：不论溶液有无颜色，当一定波长的光通过该溶液时，总有一定程度的吸光作用。并且随单位体积内溶液中该物质的质点数目增多，对光的吸收越强。分光光度法：测量物质对一定波长光线的吸收程度确定组分含量的方法。4特

2、点：灵敏度高：测定下限可达10－5～10－6mol·L-1,10-4%～10-5%准确度能够满足微量组分的测定要求：相对误差2～5％操作简便快速应用广泛5化学分析与仪器分析方法比较化学分析：常量组分(>1%),Er0.1%～0.2%依据化学反应,使用玻璃仪器准确度高仪器分析：微量组分(<1%),Er1%～5%依据物理或物理化学性质,需要特殊的仪器灵敏度高例:含Fe约0.05%的样品,称0.2g,则m(Fe)≈0.1mg重量法m(Fe2O3)≈0.14mg,称不准容量法V(K2Cr2O7)≈0.02mL,测不准光度

3、法结果0.048%～0.052%,满足要求6二、光的基本性质电磁波的波粒二象性波动性光的传播速度:c－真空中光速2.99792458×108m/s～3.0×108m/sλ－波长，单位：m,cm,mm,m,nm,Å1m=10-6m,1nm=10-9m,1Å=10-10mν－频率，单位：赫兹（周）Hz次/秒n－折射率，真空中为17与物质作用电场向量磁场向量传播方向YZ8微粒性光量子，具有能量。h－普朗克(Planck)常数6.626×10-34J·s－频率E－光量子具有的能量单位：J(焦耳)，eV(电子伏特)9

4、波粒二象性结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越长(频率越低)，光量子的能量越低。单色光：具有相同能量(相同波长)的光。混合光：具有不同能量(不同波长)的光复合在一起。10光学光谱区远紫外近紫外可见近红外中红外远红外（真空紫外）10nm~200nm200nm~400nm400nm~780nm780nm~2.5m2.5m~50m50m~300m11三.溶液中溶质分子对光的吸收与吸收光谱不同颜色的可见光波长及其互补光p238溶质分子对光的吸收：具有选择性/nm颜色互补光400-450紫黄绿450-480

5、蓝黄480-490绿蓝橙490-500蓝绿红500-560绿红紫560-580黄绿紫580-610黄蓝610-650橙绿蓝650-780红蓝绿12吸收曲线：P239将不同波长的单色光透过某一固定浓度和厚度的有色溶液，测得每一波长下溶液对光的吸收程度（即吸光度A），然后将A对波长作图，即可得吸收曲线（吸收光谱，absorptionspectrum）。该图显示了物质对不同波长光的吸收能力。最高吸收峰对应下的波长称之为最大吸收波长，用λmax表示。定性分析：据物质不同吸收曲线的形状和最大吸收峰各不相同。定量分析：同一物

6、质，最大吸收峰位置不变，其吸光度随浓度增大而增大。13Cr2O72-、MnO4-的吸收光谱300350400500525545MnO4-600700/nm350Cr2O72-1.00.80.60.40.2Absorbance14苯(254nm)甲苯(262nm)A230250270苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱1516四、光吸收基本定律:１、Lambert-Beer定律ItI0bdxII-dIs朗伯定律(1760年)A=lg(I0/It)=k1b比尔定律(1852年)A=lg(I0/It)=k2c介质厚度(cm

7、)吸光度A=lg(I0/It)=kbc17２、T－透光率（透射比）（Transmittance）A=lg(I0/I)=lg(1/T)=-lgT=abc(9-1)18ATcA=kbcATcA=kbc吸光度A、透射比T与浓度c的关系19３、a吸光系数Absorptivity当c的单位用g·L-1表示时，用a表示，A＝abc（9-1）a的单位:L·g-1·cm-1当c的单位用mol·L-1表示时，用表示。ε－摩尔吸光系数MolarAbsorptivityA＝εbc（9-2）的单位:L·mol-1·cm-1当c的单位

8、用g·100mL-1表示时，用表示，A＝bc，叫做比消光系数20ε:数值上等于浓度为1mol·L-1吸光物质在1㎝光程中的吸光度。P240是物质吸光能力的量度。仅与波长、物质的性质、溶剂有关。物质不同，吸光系数不同———定性分析同一物质，随波长、显色剂的变化而变化———定量分析21ε↗，方法的灵敏度↗。由实验结果计算ε时，因以总浓度代替吸光物质的实际浓度，得出的是表观摩尔