《发酵车间消毒培训》PPT课件

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1、发酵车间消毒培训焦江涛一、消毒与灭菌消毒与灭菌在发酵工业中均广泛应用。1、消毒：。是指用物理或化学的方法杀死物体上的病原微生物，一般只能杀死营养细胞而不能杀死细菌芽孢。2、灭菌：是指用物理或化学的方法杀灭或除掉传播媒介上的所有微生物（包括芽孢），使之达到无菌程度。在生产上习惯叫做消毒但它与消毒是的严格意义上的区别。车间培训课件焦江涛二、灭菌方法灭菌的方法主要有：干热灭菌法、湿热灭菌法、化学药品灭菌法、过滤除菌法、过滤除菌法。根据灭菌的对象和要求选用不同的方法。1干热灭菌法干热灭菌法是指在干燥高温条件下，将微生物杀死。干热对微生物有氧化、蛋白质变性和电解质浓缩引起中

2、毒的作用，其中氧化作用是主要的。干热灭菌必须高温，工业生产中采用的条件是摄氏160℃，1h。主要使用于需要保持干燥的器械、容器的灭菌。生产实例：在接种操作和镜检涂片时用的灼烧灭菌法就是最简单的干热灭菌法，在投罐前的空消（125℃、30min)也属于干热灭菌，车间培训课件焦江涛所以在空消之前必须先把PH、溶氧电极拔掉，否则会大大削减其使用寿命。湿热灭菌法湿热灭菌是借助蒸汽释放的热能和水的参与，能使微生物细胞中蛋白质、酶、核酸分子内部的化学键（特别是氢键）受破坏，特别是蛋白质发生不可逆的凝固性变性，使微生物死亡。蒸汽在冷凝时释放出大量潜热，具有强大的穿透力，尤其适用于

3、大量培养基及发酵设备的灭菌。温热灭菌与干热灭菌相比具有以下特点：(1)湿热灭菌时，菌体蛋白质吸收热量容易变性凝固；(2)湿热的穿透力比干热大（如表1所示）(3)蒸汽冷凝时放出大量潜热，温度上升快；(4)蒸汽制取简便、成本低、数量大，适于工业生产。车间培训课件焦江涛加热类别温度(℃)加热时间(h)透过布层的温度(℃)结论20层40层100层干热130--1404857270以下不完全灭菌温热105.33101101101完全灭菌高温灭菌也会给培养基带来一些不利影响，所以在生产中就要求我们在实消时一定要严格按工艺要求来控制实消的温度和时间。超温超时对培养基的破坏主要有

4、两种情况：一造成培养基成分相互作用；二造成热稳定性差的原材料严重破坏。前者在降低培养基质量的同时还会引起培养基褐变、沉淀，褐变反应包括类黑色素褐变（主要是氨基化合物与羰基化合物在加热条件下生成棕红色的色素），焦糖化褐变（糖在没有含氨基化合物存在下，加热到其熔点逐步形成焦糖），糖类破坏后易和有机氮源结合，产生氨基糖，车间培训课件焦江涛对微生物产生一定的毒性，严重时将抑制微生物的生长发育破坏整个发酵所以在一、二步种子罐时，一旦发现料液发黑会发现其菌量很少，产糖或产酸会大受抑制甚至造成代谢停滞，严重时不得不倒罐。沉淀主要是在加热情况下，培养基中的钙铁离子等成分易与磷酸盐

5、碳酸盐发生反应生成无机物沉淀和无机物如多肽类沉淀。后者会使玉米浆和酵母膏中的微量元素、蛋白质及糖类遭到破坏，通常解决方案如下：①分开灭菌。对培养基中糖类等不耐高温的成份与培养基其它成分分开灭菌，冷却后再混合比如我们的二步糖采取流加而不是放在一起实消；将培养基中的钙铁等离子成分与磷酸盐分别灭菌可以避免发生沉淀反应②低温灭菌，低温灭菌几乎对培养基中的营养成分没有破坏。如我们一步的糖。培养基在达到完全灭菌时，灭菌温度和灭菌时间对维生素C培养基养分破坏的比较：车间培训课件焦江涛灭菌温度(%)110110115120130145150灭菌时间(min)400361540.5

6、0.080.01营养成分破坏率(%)99.367502782<1车间培训课件焦江涛3化学药品灭菌法一些化学药品易与微生物细胞中的某种成分产生化学反应，如使蛋白质变性、酶类失活，破坏细胞膜透性而杀死微生物。根据灭菌对象不同有浸泡、添加、擦拭、喷洒、气态熏蒸等。如我们车间环境消毒用的浓度为1%--0.25%的高锰酸钾溶液或0.25%的漂白粉，发酵罐发酵至终点前加入0.25%的新洁尔灭和染菌后加入0.15%--0.17%的甲醛熏蒸、加入5%的氢氧化钠浸泡，进入无菌室操作前人双手用75%的酒精消毒。三投罐前的几点注意事项发酵是否成功，很大程度上决定于准备工作，以下几点须注

7、意：1、清洗发酵罐，特别要注意死角的洗刷和与外界接触的零部位的清洗，清除罐底上批料的堆积物。2、检查取样阀的密闭性有无关不严或滑丝现象，罐体、法兰、轴封、移种阀、移糖阀、视镜等有无渗漏、穿孔、堵塞、死角等情况，并用肥皂水或洗衣粉水严格试漏。隔膜阀更是要定期拆检。车间培训课件焦江涛3、有机械搅拌装置的发酵罐一定要擦干轴封支承内的积水，气升式发酵罐的罐顶部和视镜处要经常保持干燥清洁。4、检查冲视镜管是否畅通，冲视镜阀是否内漏，发现问题要彻底处理。5、检查罐上的仪表指针的灵敏度，是否归零显示有无偏差。6、检查与罐上相连接的螺丝是否有脱丝现象，破旧的及时换新四消毒过程中的

8、注意事项1