《动物细胞组织培养》PPT课件

《《动物细胞组织培养》PPT课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、2.3动物细胞工程1、定义:2、选材：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中让这些细胞生长和增殖。它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养。动物细胞培养3、动物细胞培养条件：(1)、无菌、无毒的体外环境（添加一定量的抗生素定期更换培养液）防止培养过程中污染防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害(2)、培养基成分：种类：天然培养基：主要取自动物血清，组织提取液，营养价值高，成分复杂合成培养基：人工配置，成分明确，便于控制

2、试验条件葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等??(3)、温度和PH36.5+（-）0.5度,7.2-7.4(4)、气体环境O2和CO2和植物组织培养基相比有何独特之处？液体培养基、成分中有动物血清等4.动物细胞生长特性：细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养50代

3、细胞传代培养细胞株无限传代细胞系单个细胞加培养液遗传物质未改变遗传物质已改变5.过程：剪碎胰蛋白酶（贴壁生长）动物组织块细胞悬液原代培养传代培养胰蛋白酶处理幼龄动物的器官组织；动物胚胎动物细胞培养细胞贴壁接触抑制原代培养传代培养细胞株细胞系原代培养：一般细胞繁殖1-10代，就发生接触抑制不再分裂，这种培养就叫原代培养。传代培养：贴满瓶壁的细胞由于接触抑制不再分裂，需重用胰蛋白酶处理，再分瓶培养让细胞继续增殖。细胞株：原代细胞一般传至10代左右生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数存活到40~50代，这种传代细

4、胞为细胞株，遗传物质不改变。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，出现癌变特点，可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。1.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？2.细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？3.既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？胰蛋白酶水解蛋白质蛋白质蛋白质和磷脂能注意时间的控制不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶

5、的最适PH较接近思考讨论5、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养，使每个细胞与培养液接触不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，因为动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到抑制4、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？6、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？7、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处

6、理，然后继续增殖。这样的过程叫做传代培养8、如何理解原代培养和传代培养？9、传代培养的细胞能一直传代下去吗？10、有些为何能一直传下去？在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养不都能发生突变，朝着癌细胞方向发展11、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？保存10代以内的细胞，因为10－50部分细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果获得细胞或细胞产物快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清糖、植物激素培养基

7、特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物组织和动物细胞培养的比较6、动物细胞培养应用大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）作为基因工程中的受体细胞培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据1、下列属于动物细胞工程中的工具是（）A．限制性内切酶B．DNA连接酶C．胰蛋白酶D．果胶酶C2、在动物细胞培养的有关叙述中，正确的是（）A．动物细胞培养的目的就是为了获得大量的细胞分泌蛋白B．动物细胞培养前要

8、用胰蛋白酶处理使细胞分散C．细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中D．培养至50代后继续传代的细胞是细胞株B3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于（）A.培养基不同；B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。A4、07年江苏高考题动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。右图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验