蛋白质合成与加工(翻译)

蛋白质合成与加工(翻译)

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1、蛋白质的合成与加工ProteinSynthesisandProcessing第十八章1954年,PaulZamecnik及其同事实验证明体内蛋白质是由氨基酸合成的。1956年,他们发现了氨基酰-tRNA合成酶。1958年,M.B.Hoagland和Zamecnik又发现蛋白质生物合成需要可溶性RNA为中介。1961年,HowardDintzis证明血红蛋白肽链合成方向是从N-末端向C-末端进行。1961~1966年间,Nirencerg、Matthaei和Khorana先后确定了64个遗传密码。1973~1976年,麦胚无细胞体

2、系、兔网织无细胞体系分别建立,蛋白质合成的具体过程终于揭晓。蛋白质的生物合成,即翻译(translation)翻译的过程就是将核酸中核苷酸序列编码的遗传信息,通过遗传密码破译的方式解读为蛋白质分子中20种氨基酸的排列顺序。蛋白质合成体系的组成ComponentsRequiredforProteinBiosynthesis第一节参与蛋白质生物合成的三种RNA:mRNA(messengerRNA,信使RNA)rRNA(ribosomalRNA,核糖核蛋白体RNA)tRNA(transferRNA,转移RNA)辅助因子包括:起始因子(

3、initiationfactor,IF)延长因子(elongationfactor,EF)释放因子(终止因子)(releasefactor,RF)等氨基酰-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsynthetase)一、mRNA是蛋白质/多肽链合成的模板在遗传信息传递过程中,DNA转录生成mRNA,mRNA作为蛋白质合成的直接模板,指导蛋白质多肽链的合成。mRNA包括5-非翻译区(5-untranslatedregion,5-UTR)开放阅读框架区(openreadingframe,ORF)3-非翻译区(3-un

4、translatedregion,3-UTR)原核生物mRNA真核生物mRNA非翻译区核蛋白体结合位点起始密码子终止密码子编码序列PPP5'3'蛋白质PPPmG-5'3'蛋白质AAA目录(一)mRNA含有64种密码子mRNA分子上每3个核苷酸构建一个密码子,编码某一特定氨基酸或作为蛋白质合成的起始、终止信号,称为三联体密码(tripletcodon),也称遗传密码子(geneticcodon)。起始密码(initiationcodon):AUG终止密码(terminationcodon):UAA、UAG、UGA遗传密码表目录遗

5、传密码具有通用性(universal)(二)遗传密码具有几个特性从原核生物生物(包括病毒、细菌等)、真核生物以及人类都共同使用同一套遗传密码。已发现少数例外,如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。密码子具有方向性(direction)起始密码子总是位于mRNA开放阅读框架的5ˊ末端,终止密码子位于3ˊ末端。翻译的方向是从5ˊ到3ˊ末端。3.遗传密码具有连续性(commaless)密码子按5′→3′方向每3个一组阅读框架顺序翻译,无标点、不重叠,即连续性mRNA开放阅读框架内发生一个或两个碱基插入或缺失,可引起移码突变(frame

6、shiftmutation)。翻译的蛋白质氨基酸顺序则发生改变。4.遗传密码具有简并性(degeneracy)目录简并性,即同一种氨基酸具有多个密码子,或者多个密码子代表一种氨基酸的现象。遗传密码中,除色氨酸和甲硫氨酸仅对应一个密码子外,其余氨基酸均有一个以上密码子为其编码。简并性(degeneracy)目录5.遗传密码具有摆动性(wobble)编码同一氨基酸的不同密码子互称同义密码子;同义密码子之间的差异通常只在第3位碱基上,密码子第3位碱基与tRNA反密码子不严格遵守碱基配对规律,而是摆动碱基配对。U摆动配对目录密码子、反密

7、码子配对的摆动性tRNA反密码子第1位碱基IUGACmRNA密码子第3位碱基U、C、AA、GU、CUG二、一种tRNA只能转运一种氨基酸但一种氨基酸可由几种tRNA转运反密码环氨基酸臂tRNA的三级结构示意图三、rRNA与蛋白质组成核糖体——目录蛋白质合成场所核糖体的组成目录原核生物核糖体70SMt2.7×106真核生物核糖体80SMt4.2×106核糖体在蛋白质合成中有主要作用:核糖体两亚基上具有结合mRNA的位点,还有与起始因子、延长因子、释放因子及各种酶的结合位点;并且具有两个tRNA结合的位点;A位点是氨基酰tRNA结合

8、位点,P位点是肽酰tRNA结合位点。通过将mRNA、氨基酰-tRNA和相关的蛋白因子放置在正确的位置来调节蛋白质的合成。核糖体是合成蛋白质的场所。20种氨基酸(AA)酶及众多蛋白因子,如氨基酰-tRNA合成酶、起始因子(initiationfactor,IF)、

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