鸡类patatin脂肪酶家族

《鸡类patatin脂肪酶家族》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、鸡类patatin脂肪酶家族主要参考文献JaniSaarela,etal.Thepatatin-likelipasefamilyinGallusgallusBMCGenomics.2008,9:281GregoryR.Steinberg,etal.AdipocytetriglyceridelipaseexpressioninhumanobesityAmJPhysiolEndocrinolMetab.2007,293:E958–E964MartinaSchweiger,etal.AdiposeTriglycerideLipaseandHormone-sensitiveL

2、ipaseAretheMajorEnzymesinAdiposeTissueTriacylglycerolCatabolismJBIOCHEM.2006,281(52):40236–40241研究背景脂肪组织是机体最大的能量储存库，当机体需要能量的时候，储存在脂肪组织的甘油三酯在脂酶的作用下被分解为游离脂肪酸,释放入血液参与能量代谢。如果脂解作用出现障碍或病变，就会影响机体能量的平衡，进而引发肥胖和胰岛素抵抗等疾病。卵生动物的卵黄是胚胎发育所需营养和调控因子的主要来源，而卵黄是脂质和蛋白质从母体肝脏转运到卵泡中的卵子累积而成。研究背景胚胎正常生长依赖于从卵黄分泌到胚循

3、环当中的脂类等营养物质，参与该过程的基因主要有：脂肪酶、脂质转运蛋白和脂蛋白受体基因等，因此产蛋母鸡是一个分析脂质转运和全身脂质代谢精细调控分子机制的最好模型。而且产蛋母鸡的脂质代谢是一个研究激素调控的非常好的例子，因为雌激素不公直接调控合成卵黄前体物质的基因在肝脏中的表达，还可能与脂肪分解和卵黄沉积中脂质的转运过程及胚胎卵黄利用有关。实验动物1.Derco产蛋母鸡：30-40周龄公鸡：购自海德尔公司2.受精蛋在38度和70%的湿度条件下孵化11天后取出，取卵黄囊膜用于RNA抽提3.白色(<5mm)和黄色(5-12mm)有卵黄的小卵泡4.来自F5-F1级卵泡的颗粒细胞

4、5.白色脂肪组织：取自鸡的腹腔6.其它鸡组织样品，液氮保存。实验方法RT-PCR实时荧光定量PCRInsilicocharacterization实验结果一.鸡PNPLAs基因家族新基因鉴定及序列的获得PNPLA2又叫Adiposetriglyceridelipase(ATGL),desnutrin,iPLA2ζ,和TTS-2，是一种分解TG产生DG的关键酶，它的功能非常保守。Comparativegeneidentification58(CGI58,ABHD5)是ATGL的激活蛋白，人CGI58的异常会导致叫作Chanarin-Dorfman综合症的脂肪代谢疾病，患

5、者的许多组织都含有富含TG的脂滴。鸡CGI58蛋白与人的有79%的同源性，而与激活ATGL相关的氨基酸残基完全保守。PNPLA3也叫adiponutrin和iPLA2ε。在禁食情况下，它的表达量受到严重抑制，而AGTL表达量会提高。PNPLA3位于细胞膜，而ATGL位于胞质中。PNPLA4又叫genesequence2(GS2)和iPLA2η。它和TGs水解有关，在人的所有组织中有PNPLA4的表达。PNPLA6又名neuropathytargetesterase(NTE)。在人的血液淋巴细胞和老鼠大脑中有表达，与膜脂的代谢及与神经元和神经胶质细胞相互作用的信号传导有

6、关。PNPLA7也叫NTE-relatedesterase(NRE)，与PNNPL6有很高的相似性。它高表达于前列腺、胰腺和脂肪组织。胰岛素能抑制它的表达。有研究表明它是一种溶血磷脂酶。PNPLA8也叫iPLA2γ，中等水平表达于人的各种组织，在人脂肪细胞早期分化时表达上调。PNPLA9主要在脂肪组织和大脑中表达，脂肪细胞分化后期表达增加。从中国田鼠卵细胞分离的PNPLA9蛋白能够分解二棕榈酰磷脂酰胆碱，而锚蛋白重复序列是该酶活性所必需的。PNPLA1和PNPLA5类patatin脂酶蛋白结构示意图鸡PNPLAs蛋白Patatin结构域氨基酸序列比对图二.PNPLAs

7、各基因表达情况三.Insilicocharacterization预测ATGL在382-389位氨基酸残基处有一个核定位信号(VKKAKKKL)，而人的相应氨基酸残基VMRAKRKL并不被预测为枋定位信号。PNPLA1，6，7，8和9蛋白都含有一个或多个酪氨酸激酶磷酸化位点；而且PNPLA6和7还含有两个环核苷酸结合位点。和人的PNPLA9相比，鸡的PNPLA9含有几个锚蛋白重复序列，表明可能与蛋白互相有关。除了PNPLA8外，其它PNPLAs和CGI58蛋白都是球状蛋白。所有完全克隆的PNPLAs，只有PNPLA4含有信号肽。PNPLA4和7含有跨