水产动物疾病学实验

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1、水产动物疾病学实验实验目的与任务：本实验课程的教学旨在学生掌握水产动物疾病学的基本原理和基本技术，主要包括水产物疾病学的典型症状和诊断的一般方法。在教学基本理论和方法的基础上动，加强与生产实际相联系，引进一些最新技术扩大学生的知识视野。注重培养学生分析问题和解决问题的能力以及严格的科学作风，使学生具备从事水产动物疾病学研究和为水产业服务的过硬本领。本实验的任务是培养学生掌握水产动物疾病学中病毒、细菌、真菌、藻类、寄生虫和非寄生性疾病的典型症状及区别，疾病诊断的方法与步骤，疾病防治的方法。水产动物疾病学实验实验教学基本要求：1、运用所学的《水产动物疾病学》等理论课

2、中的概念和理论知识来指导实验，并通过实验获得相关的感性知识，从而更进一步地巩固所学的理论课知识。2、熟练地掌握水产动物疾病学实验的基本操作与基本技能，通过仔细观察和相互比较来熟悉水产动物常见疾病的主要症状、危害程度及流行情况；掌握水产动物疾病诊断的常规步骤与方法；了解主要疾病病原体的生物学与生态学特征及生活史等；了解水产常见药物的药理与使用方法；熟悉水产动物疾病大类的预防与治疗方法。3、按实验指导书上所述方法，在完成相关的实验操作后，通过观察、分析能认真仔细地独立撰写实验报告；并通过理论与实践知识的累积，不断提高自子解决问题的能力和实际动手操作能力。4.要求课前

3、，弄懂进行预习实验目的和原理，熟悉内容和步骤，写出相应的预习报告。实验项目实验一疾病常规检查方法与诊断实验二病毒疫苗土法制备安全及效率试验实验三虾蟹类病毒性疾病的观察实验四细菌性鱼病活体或病变标本的观察（一）实验五细菌性鱼病活体或病变标本的观察（二）实验六虾蟹类细菌性疾病的观察（一）实验七虾蟹类细菌性疾病的观察（二）实验八真菌性、藻类性疾病及病原体的观察实验九纤毛虫、鞭毛虫类的观察实验十孢子虫、吸虫类的观察实验十一绦虫、线虫类的观察实验十二甲壳动物病病原体的观察实验一疾病常规检查方法与诊断一、实验目的通过对本实验课的学习，了解常规的肉眼检查和显微镜检查疾病的方法

4、，对检查结果进行分析、比较，进行疾病诊断二、实验材料、仪器活的或刚死的病鱼，显微镜、介剖镜、介剖盘、介剖剪、介剖刀、镊子、吸管、载玻片、盖玻片等。三;疾病检查与诊断程序１基本情况２体表检查３体内检查４根据检查情况进行初步诊断５病原体确定进行确诊。四、实验方法一、基本情况调查：水质情况、吃食情况、用药情况、发病情况等。二、肉眼检查；（1）体表：大型寄生虫、发炎、充血、腐烂、体色变化等；（2）体内器官：大型寄生虫、发炎、充血、腐烂、器官色素变化等。三、显微检查：病灶部位和可疑部位取样制片在显微镜、介剖镜下检查。五：病原体检查1病原体分离与培养：2pcR仪器检测病原体

5、：3酶联体检测病原体：六　疾病诊断１：疾病诊断是一个复杂的．综合的分析判断过程，它是根据环境条件，发病对象，发病季节，发病症状与表现，病原体确定等因素做出的综合分析判断结果。２：疾病诊断是确定引起疾病发生的主要原因，疾病过程与发病机理。疾病诊断３：疾病诊断方法（１）根据症状诊断（２）根据病原体诊断（３）综合诊断作业一１疾病检查的一般程序？２疾病诊断的方法？正确诊断的意义？实验二：病毒疫苗土法制备一、实验目的1.了解土法疫苗免疫的原理，掌握其制备方法和注射方法（或了解细菌性灭活疫苗制备的基本过程）。2.掌握草鱼出血性病毒疫苗制备（或组织浆灭活疫苗制备）的基本过程。

6、二、仪器设备1.解剖工具（剪刀、镊子）、台秤（天平）、组织打浆机或匀浆机（或研钵）、水浴锅、温度计、注射器、量筒、三角锥瓶、漏斗、水壶；2.剪刀、天平、蔡氏过滤器、塑料微型滤器、冰箱、液氮罐、离心机。三、实验材料1.患草鱼三大病（赤皮、肠炎、烂鳃病）的草鱼，最好是三大病并发的濒死或刚死不久的草鱼；2.患典型出血病的濒死或刚死不久的草鱼。四、实验药品1.甲醛、生理盐水、70%的酒精；2.青霉素、链霉素、生理盐水、70%的酒精、50%缓冲甘油、PBS液、Earle培养液。五、实验内容1.病毒材料收集与保存（1）无菌操作收集，病毒不灭活，材料标本不能在太阳下曝晒，要在

7、阴暗低温处；（2）用发病早期的鱼（典型出血病），不用已经死亡的鱼，用水冲洗体表，再用70%的酒精消毒体表，然后才取出肌肉、内脏，随即放入50%缓冲甘油内保存，写好标签（地点、寄主、日期），野外收集最好用冰壶带回，保存在-20℃或5℃冰箱内。2.活苗的制备无菌操作取出病灶（肌肉、内脏组织），称重后剪碎，加10倍无菌生理盐水，匀浆，3000～3500转/分低温离心30分钟，取上清液，加青霉素1000IU/mL，链霉素1000μg/mL，混匀，再在4℃下过夜除菌后即为病毒悬液。2.灭活加入福尔马林，使成0.1%浓度，摇匀后，置于32℃恒温水浴锅灭活72小时。化学灭活：

8、以福尔马林作为化学灭活剂