第五节食用菌菌种的扩繁与培养

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1、第五节食用菌菌种的扩繁与培养引言：从外地购进或分离获得的母种数量有限，不能满足生产的需要时，要对初次获得的母种进行扩大繁殖，以增加母种数量。一、菌种扩大把接种物移至培养基上，在菌种生产工艺上称接种。在栽培工艺即生产中称播种。条件：无菌操作（接种箱或超净工作台、酒精灯火焰周围10cm）1、母种扩接方法（超净工作台内接种，由试管到试管）将试管菌种接到新的试管斜面上扩大繁殖，称为继代培养，转管。程序：P43（1）消毒手和菌种试管外壁。（2）点燃酒精灯。（3）用左手的大拇指和其他四指并握要转接的菌种和斜面培养基，在酒精灯附近拔掉棉塞。（4）在酒精灯灼烧接种锄和试管

2、口。（5）冷却接种锄，取少量菌种（绿豆大小），至斜面培养基上。（6）塞上棉塞，贴好标签。整个过程要快速、准确、熟练。1支→30支二、菌种的培养1、母种培养（1）适温培养在恒温箱（室）培养种块有萌发，并向培养基上蔓延后，将培养温度降低2～3℃，促使菌丝健壮生长。（2）注意通风通风不足，菌丝生长缓慢，棉塞上易滋生霉菌。（3）定期检查前几天，要逐管检查，以防掩盖杂菌。发现污染，及时淘汰。（4）详实记录记录菌株来源、转接时间、培养基种类、发菌的温湿度、菌丝生长情况，以及污染现象、数目。液体菌种的培养方法   常见的有采用摇床来生产的摇瓶培养法和采用发酵罐来生产的深

3、层培养法。若少量生产，可以用摇瓶培养法。深层培养需要一整套工业发酵设备，如锅炉、空气压缩机、空气净化系统、发酵罐等，故投资大，只适用于工厂化的大规模生产。而摇瓶培养投资少，设备技术简单，适合一般菌种厂生产使用。本节主要介绍摇瓶培养的技术方法。平菇：土豆100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸30克，蛋白胨1.5克，磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁0.75克，维生素B11片，pH值自然；   1.液体菌种培养基配方     (1)葡萄糖                  3%              豆粉             2%       玉米粉    

4、              1%              硫酸镁            0.05%       磷酸二氢钾              0.1%             酵母粉            0.5%    　　其余为水                                  pH值              自然     本配方适用于多种食用菌的液体培养。    (2)可溶性淀粉              3～6%            蔗糖               1%       硫酸镁             

5、     0.15%           酵母膏             0.1%        其余为水                                  pH值调至6    本配方适用于平菇、香菇、草菇、猴头和黑木耳等的液体培养。    (3)玉米淀粉                3%               磷酸二氢钾         0.1%       玉米浆                  1.2%            硫酸镁             0.07%       其余为水                  

6、                pH值调至5    本配方适用于香菇。     (4)玉米粉                  50g              麦芽汁             100ml        琼脂                    0.5g            维生素B1           100ug       水                      850ml            pH值自然    本配方适用于平菇。   2.摇瓶振荡培养技术   培养液配制好后，装入500mL容量的三角烧瓶中，每瓶装量为10

7、0mL，并加工0～15粒小玻璃珠，加棉塞后再包扎牛皮纸封口，在1.5kg/cm2压力下灭菌30分钟，取出冷却到30℃以下时，接入一块约2平方厘米的斜面菌种，于23℃～25℃下静置培养48小时，再置往复式摇床上振荡培养，振荡频率为80～100次/分，振幅6cm～10cm。如果用旋转式摇床，振荡频率为200～220转／分。摇床室温控制在24℃～25℃，培养时间因菌类不同而异，一般是在7天左右。培养结束的标准是：培养液清澈透明，液中悬浮着大量小菌丝球，并伴有各种菇类特有的香味。(二)液体菌种的检验方法   对液体菌种进行检验可采用感官检查和取样测验相结合的方法。

8、   1.感官检查 可采用“看、旋、嗅”的步骤进行检查。   看：