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时间:2019-06-10
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1、第五节食用菌菌种的扩繁与培养引言:从外地购进或分离获得的母种数量有限,不能满足生产的需要时,要对初次获得的母种进行扩大繁殖,以增加母种数量。一、菌种扩大把接种物移至培养基上,在菌种生产工艺上称接种。在栽培工艺即生产中称播种。条件:无菌操作(接种箱或超净工作台、酒精灯火焰周围10cm)1、母种扩接方法(超净工作台内接种,由试管到试管)将试管菌种接到新的试管斜面上扩大繁殖,称为继代培养,转管。程序:P43(1)消毒手和菌种试管外壁。(2)点燃酒精灯。(3)用左手的大拇指和其他四指并握要转接的菌种和斜面培养基,在酒精灯附近拔掉棉塞。(4)在酒精灯灼烧接种锄和试管
2、口。(5)冷却接种锄,取少量菌种(绿豆大小),至斜面培养基上。(6)塞上棉塞,贴好标签。整个过程要快速、准确、熟练。1支→30支二、菌种的培养1、母种培养(1)适温培养在恒温箱(室)培养种块有萌发,并向培养基上蔓延后,将培养温度降低2~3℃,促使菌丝健壮生长。(2)注意通风通风不足,菌丝生长缓慢,棉塞上易滋生霉菌。(3)定期检查前几天,要逐管检查,以防掩盖杂菌。发现污染,及时淘汰。(4)详实记录记录菌株来源、转接时间、培养基种类、发菌的温湿度、菌丝生长情况,以及污染现象、数目。液体菌种的培养方法 常见的有采用摇床来生产的摇瓶培养法和采用发酵罐来生产的深
3、层培养法。若少量生产,可以用摇瓶培养法。深层培养需要一整套工业发酵设备,如锅炉、空气压缩机、空气净化系统、发酵罐等,故投资大,只适用于工厂化的大规模生产。而摇瓶培养投资少,设备技术简单,适合一般菌种厂生产使用。本节主要介绍摇瓶培养的技术方法。平菇:土豆100克,红糖15克,葡萄糖10克,麦麸30克,蛋白胨1.5克,磷酸二氢钾1.5克,硫酸镁0.75克,维生素B11片,pH值自然; 1.液体菌种培养基配方 (1)葡萄糖 3% 豆粉 2% 玉米粉
4、 1% 硫酸镁 0.05% 磷酸二氢钾 0.1% 酵母粉 0.5% 其余为水 pH值 自然 本配方适用于多种食用菌的液体培养。 (2)可溶性淀粉 3~6% 蔗糖 1% 硫酸镁
5、 0.15% 酵母膏 0.1% 其余为水 pH值调至6 本配方适用于平菇、香菇、草菇、猴头和黑木耳等的液体培养。 (3)玉米淀粉 3% 磷酸二氢钾 0.1% 玉米浆 1.2% 硫酸镁 0.07% 其余为水
6、 pH值调至5 本配方适用于香菇。 (4)玉米粉 50g 麦芽汁 100ml 琼脂 0.5g 维生素B1 100ug 水 850ml pH值自然 本配方适用于平菇。 2.摇瓶振荡培养技术 培养液配制好后,装入500mL容量的三角烧瓶中,每瓶装量为10
7、0mL,并加工0~15粒小玻璃珠,加棉塞后再包扎牛皮纸封口,在1.5kg/cm2压力下灭菌30分钟,取出冷却到30℃以下时,接入一块约2平方厘米的斜面菌种,于23℃~25℃下静置培养48小时,再置往复式摇床上振荡培养,振荡频率为80~100次/分,振幅6cm~10cm。如果用旋转式摇床,振荡频率为200~220转/分。摇床室温控制在24℃~25℃,培养时间因菌类不同而异,一般是在7天左右。培养结束的标准是:培养液清澈透明,液中悬浮着大量小菌丝球,并伴有各种菇类特有的香味。(二)液体菌种的检验方法 对液体菌种进行检验可采用感官检查和取样测验相结合的方法。
8、 1.感官检查 可采用“看、旋、嗅”的步骤进行检查。 看:
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