微生物遗传变异与菌种保藏增加内容

《微生物遗传变异与菌种保藏增加内容》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第八章微生物遗传变异与菌种保藏(增加内容)本章内容：第一节遗传的物质基础第二节基因突变及修复第三节基因重组第四节微生物诱变育种第四节菌种的衰退、复壮及保藏第一节基因突变与诱变育种一、基因突变二、突变与育种三、营养缺陷型的筛选一基因突变（一）突变类型（二）突变的特点（三）基因突变自发性及不对应性证明（四）基因突变的机制（五）DNA的损伤及修复（一）突变类型细胞形态1、形态突变型菌落形态营养缺陷型2、生化突变型抗性突变型抗原性突变（包括细胞内部、表面成分的改变）3、致死性突变型（合成关键性酶的基因发生了突变，则表　　现出致死突变）条件致死突变型——如突变为温度敏感型突变（37℃死，25℃活）

2、4、其它突变型毒力突变、糖发酵突变、产量、产品突变等。（二）突变的特点1非对应性：环境与变异无对应性。2自发性：非人为的诱变因素下发生。3规律性：某一特定性的突变率具规律性。4独立性：一个基因的突变对其它基因突变无影响。5稀有性：生物自发突变率为10-6～10-12。6诱变性：诱变剂可提高突变率10~105X。7稳定性：突变性状稳定、可遗传。8可逆性：有回复突变。（三）基因突变自发性及不对应性的证明（自学）自发突变：没有人工诱变因素的参与，　　　　　　　生物体自然突变。1、彷徨试验：2、涂布试验：3、平板影印(Replicaplating)培养试验：彷徨试验（1）抗性细胞的出现，是在接触

3、噬菌体之前（2）喷上噬菌体，仅起淘汰野生型和鉴别抗性株作用；（3）于甲方高度彷徨，说明突变是随机的。平板影印培养试验涂布敏感菌5×104个共12个平板5×104个菌落5000个细菌/菌落喷入T1保温重新涂布后喷入T1保温6个平板共353个菌落6个平板共28个菌落（1）突变与噬菌体无关；（2）涂布使抗性菌株均匀分布；（3）抗性突变可在任何时间发生，与噬菌体存在无关。以上实验用统计学原理间接证明。影印培养无药培养基含药培养基影印培养试验原始敏感菌种（1）实验表明：从未接触str的菌株可发生抗性突变，分离可得到纯的str菌株。（2）由此表明：突变是自发的与环境不对应的。（四）基因突变的机制（自学

4、）1DNA的复制（核苷酸对掺入错误）微生物自身产生诱变物质（咖啡碱、硫氢化合物、重氮丝氨酸等）环境对微生物的诱变作用（辐射、加热等）（五）DNA损伤及修复（自学）1光复活作用2切除修复3重组修复4SOS修复二突变与育种（一）自发突变与生产育种（二）诱变育种（一）自发突变与生产育种1.生产选育：群体培养中个别的变异个体表现出生长优势，发现突变种后，随　　　　　　时分离、纯化。2.定向培育：用特定的环境长期处理某一微生　　　　　　物群体,同时不断对其移种、传代，以达到积累和选择合适的自发突变体的一种育种方法。（1）自发突变(spontaneous)：在非人为的情况下由于遗传物质的微小变化引起的

5、性状变异。（2）原因可能是：1）环境因素；2）自身有毒产物的积累；3）互变异构效应；3、自发突变的机制二诱变育种1、概念2、诱变剂3.诱变程序4、诱变的主要环节1、概念诱变育种是用物理或化学的诱变剂使诱变对象内的遗传物质（DNA）的分子结构发生改变，引起性状变异并通过筛选获得符合要求的变异菌株的一种育种方法。（1）概念：凡能提高基因突变频率的理化因素。（2）种类：1）物理因子（phisicalagents)物理诱变剂：U.V、χ、γ、快中子、超声波等。2）化学因子(chemicalagents)3）转座子(transposableelements)2、诱变剂烷化剂(alkylatinga

6、gents)：如：氮芥、硫酸二乙酯、亚硝基胍、NTG等机制：将烷烃加在含氮碱基上，改变氢键性质。化学诱变剂：碱基类似物(baseanalogs)：如：叠氮胸腺嘧啶（AIT）等；机制：在DNA复制时将碱基类似物插入DNA中，而碱基类似物没有正常碱基的氢键性质，在DNA复制时出现突变体。插入剂(intercalatingagents):如：溴化乙啶等一些三环分子。机制：与DNA中的一对碱基有大致相同的位点，这些分子不改变碱基的氢键性质，而插入在双螺旋中，加宽间距，引起碱基增加。t3.诱变程序：原始菌种原菌种特性鉴定纯化斜面/肉汤培养单孢子/单细胞悬液诱变剂处理计算存活率平板分

7、离观察形态变异，挑单菌落移至斜面初筛复筛小试良种保藏中试4诱变的主要环节（1）诱变剂的选择（2）出发菌株的选择（3）单孢子或单细胞悬液的制备（4）设计和采用效率高的筛选方案和方法（1）诱变剂的选择：1）了解诱变剂的性质、作用机理和使用方法。2）处理方式A、单一因子处理：先后使用B、复合因子处理：两种以上因素同时使用单一因子重复使用。3）处理剂量：测致死率。方法：平板菌落计数法、纸片法一般杀菌率为70%左右。