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1、不同驯化方式对微生物降解乐果的影响沈齐英,等不同驯化方式对微生物降解乐果的影响沈齐英,刘欢,张英俊(北京石油化工学院化工系,北京102617)摘要:为了获得有效降解有机磷农药乐果的微生物,采用北京大兴黄村施用过乐果的土壤为菌源,以乐果作为唯一碳源和能源采用一次性大剂量冲击驯化和逐渐加量的驯化方式分离得到7株对乐果有一定降解能力的微生物。微生物降解乐果实验结果显示:不同的驯化方式对微生物的降解能力有明显的影响,大剂量冲击驯化获得的微生物对乐果的降解能力优于逐渐加量驯化获得的微生物。关键词:乐果;微生物;驯化方式;降解中图分类号:Q939文献标识码:A文章编号:100326504(2005)022
2、0035203农药既是有毒又是农业生产中不可缺少的物质,2.1菌种的驯化因此,合理利用农药并解决由农药引起的环境污染问菌种的驯化为采用二种方式,其中方式一采用一题显得尤其重要。有机磷农药是一类使用非常广泛,次性加入大剂量乐果的驯化方式,方式二采用逐渐加效果较好的杀虫剂,在农业生产中起重要作用,对有机量的驯化方法。根据驯化时间的不同每种方式又分为磷农药引起污染的治理在农药污染防治中占有重要位2组,共4组,具体过程如下。置。研究表明利用微生物及其产生的降解酶对环境中逐渐加量驯化方式:有机磷农药的净化处理是行之有效的,并已显示出良(1)取离地面2cm的土样1g加入到装有100mL[1-2]好的应用前
3、景。无机盐培养液(含乐果原液1mL)的锥形瓶内,在温度为30℃,转速为120r/min的条件下振荡培养24h;取1实验材料振荡培养后的培养液10mL转接至装有90mL新鲜无菌源:北京市大兴区黄村施用过有机磷农药乐果机盐培养液(含乐果原液2mL)的锥形瓶内,与上述相的土壤。同的条件,继续振荡培养24h;之后顺序流加至含乐果无机盐培养基为:KH2PO40.5g,K2HPO40.5g,原液5mL,共5个周期,120h。MgSO40.2g,CaCl20.1g,NaCl0.2g,MnSO4痕量,(2)取离地面2cm的土样1g加入到装有100mLFeCl2痕量,NH4NO31.0g,H2O1000mL。无
4、机盐培养液(含乐果原液1mL)的锥形瓶内,在温度选择培养基(琼脂平板):牛肉膏2.5g,蛋白胨5.0g,为30℃,转速为120r/min的条件下振荡培养24h,取氯化钠2.5g,琼脂10g,乐果原液1mL,水500mL。振荡培养后的培养液10mL转接至装有90mL新鲜无斜面培养基:牛肉膏2.5g,蛋白胨5.0g,氯化钠机盐培养液(含乐果原液1mL)的锥形瓶内,与上述相2.5g,琼脂10g,水500mL。同的条件,继续振荡培养24h;取振荡培养后的培养液富集培养基:牛肉膏2.5g,蛋白胨5.0g,氯化钠10mL转接至装有90mL新鲜无机盐培养液(含乐果2.5g,水500mL。原液2mL)的锥形瓶
5、内,与上述相同的条件,继续振荡HZQ-C型空气浴振荡器,哈尔滨市东明医疗仪培养24h,取振荡培养后的培养液10mL转接至装有器厂;DH3600A电热恒温培养箱,天津市泰斯特仪器90mL新鲜无机盐培养液(含乐果原液2mL)的锥形瓶有限;XSP-18B型显微镜,上海光学仪器厂;SP-内,与上述相同的条件,继续振荡培养24h;之后顺序2102UV型紫外可见分光光度计,上海光谱仪器有限流加至含乐果原液5mL,共10个周期,240h。公司;YX-280B型蒸汽灭菌器,江阴市医疗设备厂;大剂量冲击驯化方式:LGR10-4.2型冷冻离心机,北京医用离心机厂;PHS(1)取离地面2cm的土样1g加入到装有10
6、0mL-3B精密pH计,上海雷磁仪器厂。无机盐培养液(含乐果原液5mL)的锥形瓶内,在温度[3-5]2实验方法30℃,转速为120r/min的条件下振荡培养24h后,取振荡培养后的培养液10mL转接至装有90mL新鲜无机盐培养液(含乐果原液5mL)的锥形瓶内继续振荡作者简介:沈齐英(1963-),女,硕士,从事生物化学及微生物学的教学和科研工作,(电话)010269208509(电子信箱)shenqiying@bipt.edu.24h;如此5个周期,120h。cn。(2)取离地面2cm的土样1g加入到装有100mL·35·环境科学与技术第28卷第2期2005年3月-无机盐培养液(含乐果原液5m
7、L)的锥形瓶内,在温度C1菌种:G、椭圆状、排列不规则;菌落乳黄色、30℃,转速为120r/min的条件下振荡培养24h后,取较大、圆形、个别为椭圆形、比较光滑、有光泽、生长尚振荡培养后的培养液10mL转接至装有90mL新鲜无好、凸起、易挑起。-机盐培养液(含乐果原液5mL)的锥形瓶内继续振荡C2种:G、球状、排列不规则;菌落乳白色、菌落24h;如此10个周期,240h。直径在3mm左右、圆形、个
