资源描述：
《结合条件对羊抗兔抗体连接到细菌磁小体影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2006,14(3):423~428·研究论文·结合条件对羊抗兔抗体连接到细菌磁小体的影响陈继峰1,2,3,1111112李颖,姜伟,王珍芳,孙建波,李健,李季伦,李绍华*(1.中国农业大学微生物系,北京100094;2.中国科学院植物研究所,北京10093;3.郑州大学生物工程系,郑州450001)摘要:用羊抗兔抗体进行抗体连接到细菌磁小体(BMPs)实验,以探讨结合条件对抗体连接效率(以每毫克BMPs上连接抗体的微克数表示,单位为μg/mg)的影响。实验表明,冷冻干燥后的B
2、MPs的抗体连接效率降低36%~55%;在液氮中(-196℃)预处理的抗体连接效率显著高于在-70℃和-20℃预处理的。室温(15℃)下反应18h的抗体连接效率最高,为64.06μg/mg,明显高于其它温度和连接时间的。反应体系中,BMPs用量由5mg降到0.1mg,抗体用量由10μg增加到300μg时,抗体连接效率逐渐上升,当BMPs用量为0.1mg,抗体用量为300μg时,抗体连接效率达762.37μg/mg。PBS、HEPES、Tris-HCl、MOPS、VBS以及磷酸盐等溶液可用于抗体连接到BMPs体系中,在通常使用的缓冲液pH和浓度下,几种溶液的抗体
3、连接效率变化范围为46.28±0.58~90.83±1.64μg/mg;并且不同的溶液有相应的使抗体连接效率达到最高时的pH和溶液浓度,当HEPES的pH为3.5,浓度为20mmol/L;Na3PO4的pH为5.6,浓度为5mmol/L时,抗体连接效率分别为108.01和76.78μg/mg。对连接到BMPs上的抗体进行SDS-PAGE定性检测结果表明,抗体连接到了BMPs的膜上。关键词:细菌磁小体;羊抗兔抗体;结合条件;抗体连接效率中图分类号:S182S188文献标识码:A文章编号:1006-1304(2006)03-0423-06EffectsofConj
4、ugatingConditionsonGoatAnti-rabbitAntibodyImmobilizationontoBacterialMagneticParticlesCHENJi-feng1,2,3,LIYing1,JIANGWei1,WANGZheng-fang1,SUNJian-bo1,LiJian1,LIJi-lun1,LIShao-hua2*(1.DepartmentofMicrobiology,CollegeofBiologicalSciences,ChinaAgriculturalUniversity,Beijing100094,China;
5、2.InstituteofBotany,ChineseAcademyofSciences,Beijing100093,China;3.DepartmentofBiotechnology,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450001,China)Abstract:Goatanti-rabbitimmunoglobulinG(antibody)wasappliedasasampleforstudyingantibodyconjugationontobacteri-almagneticparticles(BMPs).Thecondition
6、sforthisstudyweredifferentpre-treatmentBMPs(-196℃,-70℃and-20℃for5h)forfreeze-dry,temperatureswithvariedconjugationdurations,amountofBMPsandantibody,conjugationbuffers,andbufferpHandconcentrations.Theresultsshowedthatdifferentpre-treatmentsforfreeze-dryBMPshaddifferentlinkagerateofan
7、tibody(LRA).Liquidnitrogen(-196℃)asapre-treatmentfor5h,theLRAwassignificantlyhigherthanthatof-70℃and-20℃pre-treatments.Anykindsofpre-treatmentsandfreeze-dryBMPs,theLRAsweredecreased36%~55%comparedwithnofreeze-dryBMPs.Roomtemperature(about15℃),andincubationfor18hresultedinthehighestL
8、RA(64.06μg/mg)inthe
