GB8622-1988 大豆制品中尿素酶活性测定方法.pdf

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1、中华人民共和国国家标准UDC664.841.655大豆制品中尿素酶活性测定方法:543-062GB8622一88Methodforthedeterminationofureaseactivityinsoyabeanproducts1适用范围本标准适用于由大豆制得的产品和副产品中尿素酶活性的测定。本法可确认大豆制品的湿热处理程度。2定义本标准所指尿素酶活性定义如下:在3。士。.5℃和pH7的条件下，每分钟每克大豆制品分解尿素所释放的氨态氮的毫克数3原理将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合，在30℃保持30min，尿素酶催化尿素水解产生氨的反应用过量盐酸中和所产生

2、的氨，再用氢氧化钠标准溶液回滴。4仪器设备4.1样品筛:孔径200pm;4.2酸度计:精度0.02pH,附有磁力搅拌器和滴定装置;4.3恒温水浴:可控温30士。.5,C;4.4试管:直径18mm，长150mm，有磨口塞子;4.5精密计时器;4.6粉碎机:粉碎时应不生强热(例如球磨机)4.7分析天平:感量。.lmg;4.8移液管:lOmL,5试剂和溶液5.1尿素(GB696-77):分析纯;5.2磷酸氢二钠(GB1263-77):分析纯;5.3磷酸二氢钾(GB1274-77):分析纯;5.4尿素缓冲溶液(pH6.9至7.的:4.45g磷酸氢二钠(5.2)和3.40

3、g磷酸二氢钾(5.3)溶于水并稀释$'1OOOMI，再将30g尿素(5.1)溶在此缓冲溶液中，可保存1个月。5.5盐酸(GB622-77):分析纯，c(HCl)=0.lmol/L溶液;5.6氢氧化钠(GB629-77):分析纯，c(NaOH)=0.lmol/L标准溶液，按GB601标准溶液制备方法的规定配制。中华人民共和国农牧渔业部1987一08一20批准1988一08一01实施GB8622一886试样的制备用粉碎机(4.6)将log试样粉碎，使之全部通过样品筛(4.1)对特殊试样(水分或挥发物含量较高而无法粉碎的产品)应先在实验室温度下进行预干燥，再进行粉碎，

4、当计算结果时应将干燥失重计算在内。7测定步骤称取约。2g已粉碎的试样，称准至。lmg，转入试管(4.4)中(如活性很高只称0.05g试样)，移入lOmL尿素缓冲溶液(5.4)，立即盖好试管并剧烈摇动，马上置于30士。.5℃恒温水浴(4.3)中，准确计时保持30min,即刻移入lOmL盐酸溶液(5.5)，迅速冷却到200C。将试管内容物全部转入烧杯，用5m1.水冲洗试管两次，立即用氢氧化钠标准溶液(5.3)滴定至pH4.70,另取试管作空白试验，移入1OmL尿素缓冲液(5.4),1OmL盐酸溶液(5.5)。称取与上述试样量相当的试样，也称准至0.lmg，迅速加人此

5、试管中。立即盖好试管并剧烈摇动将试管置于30士。.5℃的恒温水浴，同样准确保持30min，冷却至20'C，将试管内容物全部转入烧杯，用5mL水冲洗试管两次，并用氢氧化钠标准溶液(5.3)滴定至pH4.70,8测定结果的计算8.1计算方法以每分钟每克大豆制品释放氮的毫克量表示的尿素酶活性u，按下式计算14XC(Va-V)30xm式中:。-—氢氧化钠标准溶液浓度，mol/L;V}—空白试验消耗氢氧化钠溶液体积，mL;V-一测定试样消耗氢氧化钠溶液的体积，mL;m—试样质量+g.注:若试样经粉碎前的预千燥处理时，则14Xc(V.-V)X(1-S)3OX刀了式中:S一预

6、干操时试样失重的百分率。8.2重复性同一分析入员用相同方法，同时或连续两次测定结果之差不超过平均值的10%，以其算术平均值报告结果附加说明本标准由中国兽药监察所负责起草。