多波长HPLC同时测定3种獐牙菜属植物中6种活性成分

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1、第34卷第11期Vo1．34。Issue112009年6月June，2009多波长HPLC同时测定3种獐牙菜属植物中6种活性成分’徐康平，申健，李福双，刘建锋，刘国如，谭健兵，谭桂山(中南大学药学院，湖南长沙410013)[摘要]目的：建立多波长同时测定3种獐牙菜属植物中6种活性成分含量的高效液相色谱方法。方法：采用HypersilBDS色谱柱(4．6mm×200mm，5Ixm)；流动相为乙腈．5％磷酸水溶液，梯度洗脱，流速为1．0mL·min；检测波长为240，274，325，334nm；柱温25℃。结果：在此色谱条件下，各组分在60rain内均得到较好分离；獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、去

2、甲当药苷、雏菊叶龙胆苷、去甲基雏菊叶龙胆酮和雏菊叶龙胆酮分别在0．520～20．8，0．202—8．06，0．107—4．28，0．097～3．86，0．094～3．77，0．101～4．02g线性良好，相关系数r均为0．9999，平均回收率分别为98．7％，98．1％，98．3％，98．8％，98．1％，98．6％，RSD均小于3．0％(n=6)。结论：本方法简单、快速、准确，重现性好，可为全面评价和控制獐牙菜属药材质量提供参考。[关键词]獐牙菜；环烯醚萜苷；口【【f酮；高效液相色谱法；含量测定龙胆科Gentianaceae獐牙菜属Swertia植物在全酮苷元(去甲基雏菊叶龙胆酮和雏

3、菊叶龙胆酮)，均世界约有170多种，分布广泛，其中做药用的约有为活性成分或功效成分，且同时兼顾了该属植物主35种，大多具清热利胆，舒肝健胃，除湿，平肝风等要活性成分中的强极性的、水溶性的苷类成分以及功效，可用于治疗肝炎黄疸、急性肠炎、痢疾、胆囊弱中极性的、脂溶性的苷元成分，质控指标选择更为炎、肺炎、流感、扁桃体炎、骨髓炎等疾病。其中该属合理，符合中药多靶点作用原理。该方法简单、稳的青叶胆SwertiamileensisT．N．HoetW．L．Shih定、快速，重复性好，可为獐牙菜属植物进一步综合被药典2005年版一部收载，用于黄疸尿赤、热淋涩开发应用提供分析实验依据，为全面评价和控制獐

4、痛，但其标准仅以齐墩果酸和獐牙菜苦苷为对照品牙菜属药材质量提供参考。进行薄层定性鉴别，未对主要活性成分或指标成分1仪器与试药进行定量控制，标准的可控性差。Agilent1100型高效液相色谱仪(低压四元泵，现代研究表明，獐牙菜属植物主要活性成分为自动进样器，柱温箱，DAD检测器，ChemStations色环烯醚萜苷类和口山酮类，较为常见的环烯醚萜苷类谱工作站；美国安捷伦科技有限公司)；BP2I1D成分有獐牙菜苦苷和龙胆苦苷等，口【【J酮类成分中较1／1万电子天平(塞多利斯公司，德国)。乙腈为色为典型的为雏菊叶龙胆酮及其苷等。獐牙菜属植物谱纯，水为纯净水并经0．45m水系滤膜过滤；磷的H

5、PLC含量测定方法近期已有不少报道驯，一般酸为分析纯。为测定1个或几个环烯醚萜苷类或／和咄酮苷类强对照品獐牙菜苦苷(swertiamarin)、龙胆苦苷极性成分，或是仅测定1个或几个苷元等弱中极性(gentiopicroside)、去甲当药苷(norswertianolin)、雏成分，未能同时兼顾弱中强不同极性段，质控指标菊叶龙胆苷(swertianolin)、去甲基雏菊叶龙胆酮选择不全面。作者首次建立一种高效液相色谱方(demethylbellidif0lin)和雏菊叶龙胆酮(bellidifolin)法，运用DAD多波长检测技术同时测定獐牙菜属植均为自行提取精制，经uV，IR，NM

6、R和MS鉴定结物中两种环烯醚萜苷(獐牙菜苦苷和龙胆苦苷)、两构，HPLC归一化法检测纯度均大于98％，结构式见种口山酮苷(去甲当药苷和雏菊叶龙胆苷)和两种口山图1。川东獐牙菜和显脉獐牙菜采自湖南湘西自治州，经本院李劲平副教授分别鉴定为S．davidi和S．[收稿日期]2008—11-06nervosa；川西獐牙菜S．mussotii为对照药材，由中国[通信作者]谭桂【IJ，E—mail：tgs395@yahoo．corn．cn药品生物制品检定所提供，批号121354—200401。·l384·第34卷第11期Vo1．34，Issue112009年6月June，2009_OoH、、，00

7、、、norswcrfianolin图16种化合物的结构式2方法与结果2．3对照品溶液制备取獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、2．1色谱条件HypersilBDS色谱柱(4．6mm×去甲当药苷、雏菊叶龙胆苷、去甲基雏菊叶龙胆酮200him，5Ixm)；流动相乙I~-o．5％磷酸水溶液梯度和雏菊叶龙胆酮对照品适量，精密称定，加50％洗脱(磷酸水溶液％，0min5％，20min15％，60min甲醇-水溶液制成520．3，201．6，107．1，96．6，45％