生物化学论文

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1、西葫芦、南瓜中可溶性蛋白质和糖含量的测定和探讨摘要:本实验通过对西葫芦、南瓜提取液中可溶性蛋白质和糖含量的测定,研究了不同种类植物组织中可溶性蛋白质和糖的含量。结果如下:西葫芦、南瓜中蛋白质的含量分别是:2.437(mg/g),13.225(mg/g)采用蒽酮法测定南瓜、西葫芦中可溶性糖的含量分别是:1.115(g/100g鲜重),0.491(g/100g鲜重)关键词:西葫芦;南瓜;可溶性蛋白质;可溶性糖引言:随着生活质量的提高,我们对食品价值与营养追求越高,身边的水果蔬菜的各种含量的多少,什么身

2、体素质应该多吃何种食物,怎样搭配可以物尽其用,平衡饮食,是我们现代人越来越高的追求。虽然我们可以吃出比如南瓜比较甜,但是具体含量多少,我们也得做一下实验,更加有个了解。参考百度文献各位学者的论文如百度文库:《考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量测定》作者:吕淑霞,百度文库:《植物组织中可溶性糖含量测定》。考马斯亮蓝可以方便测可溶性蛋白质含量,蒽酮法和苯酚法测定可溶性糖,我此次采用蒽酮法测定可溶性糖。主要是通过西葫芦和南瓜的蛋白质,糖的含量大致了解植物中蛋白质,糖含量的相关含量。对蔬菜的这些含量大致

3、了解,对人们生活起一定帮助。 1材料和方法1.1材料和试剂 实验材料为西葫芦、南瓜样品。标准蛋白质溶液:由25mg牛血清蛋白加水稀释而成。考马斯亮蓝试剂:100mg考马斯亮蓝,95%乙醇,85%磷酸加蒸馏水混合而成。标准葡萄糖溶液:由100mg葡萄糖加水稀释而成。蒽酮试剂:1g蒽酮,乙酸乙酯混合而成。1.2方法1.2.1蛋白质和糖类标准曲线的绘制:1.2.1.1蛋白质标准曲线的绘制取6支试管,按下表加入试剂后,在向各管中加入5ml考马斯亮蓝试剂,5min后,以0管为空白对照,在595nm下比色测定

4、吸光值。以蛋白质含量为横坐标,以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 试剂管号012345标准蛋白质(ml)00.200.400.600.801.00蒸馏水量(ml)1.000.800.600.400.200蛋白质含量(ug)0204060801001.2.1.2糖类标准曲线的绘制取6支具塞试管,按下表加入试剂后,在向各管中加入0.5ml蒽酮试剂,再缓慢加入5ml浓硫酸,在沸水浴中煮沸10min后冷却。在620nm下比色测定吸光值。以葡萄糖含量为横坐标,以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。管号123456标准葡

5、萄糖原液(ml)00.20.40.60.81.0蒸馏水(ml)2.01.81.61.41.21.0葡萄糖含量(ug)04080120160200 1.2.2样品测定:1.2.2.1蛋白质样品的测定分别取西葫芦、南瓜各0.25-0.5g,用5ml蒸馏水研磨成浆后,3000r/min离心10min,测上清液总体积。吸取样品提取液1.0ml稀释,加入5ml考马斯亮蓝试剂,摇匀,放置两分钟后在595nm下比色,测吸光度,并通过标准曲线查得蛋白质含量。1.2.2.2糖类样品的测定分别取西葫芦、南瓜各1g,置

6、于研钵中,用5ml蒸馏水研磨成浆,然后转入20ml试管中,用5ml蒸馏水充分洗涤研钵,洗液一并转入刻度试管中。置沸水浴中加盖煮沸10min,冷却后在4000r/min下离心10min,滤液收集到100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,摇匀备用。用移液管吸取1ml提取液于20ml具塞刻度试管中,加1ml水和0.5ml蒽酮试剂,再缓慢加入5ml浓硫酸,盖上试管塞后摇匀,再置沸水浴中10min,冷却至室温,在波长620nm下比色,测定吸光值。并通过标准曲线得知相应的葡萄糖含量。 2 结果 2.1蛋白质和

7、糖类标准曲线:各管中标准蛋白质的吸光值见表1 表1各试管中标准蛋白质的吸光值 管号012345蛋白质含量(ug)020406080100吸光度00.00080.0050.0120.0180.030各管中标准葡萄糖的吸光值见表2表2各试管中标准葡萄糖的吸光值管号123456葡萄糖含量(ug)04080120160200吸光度00.1050.2620.3880.4760.653蛋白质标准曲线的绘制:多糖标准曲线的绘制:2.2西葫芦、南瓜中蛋白质和糖吸光度:样品西葫芦南瓜蛋白质吸光度0.0960.646

8、糖类吸光度1.3092.436蛋白质提取液总体积(ml)8.16.6     2.3结果:C——查标准曲线值,ugVt——提取液总体积,mlVs——测样时加样量,mlWf——样品鲜重,g蛋白质含量(ug)提取液总体积ml测样时加样量,ml样品鲜重,g西葫芦260.754.31.00.46南瓜1635.753.81.00.47将西葫芦蛋白质吸光值代入y=0.0004x-0.0083,得x=260.75 所以西葫芦中蛋白质的含量=2.437(mg/g)将南瓜蛋白质吸光值代入y=0.00

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