男性不育实验诊断方法及临床应用

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1、男性不育症实验诊断方法及临床应用胡勇华一、男性不育症实验诊断基础1.男性不育症实验诊断概况男性不育症的实验诊断方法过去长期停留在较低水平，不育症病因临床诊断困难。WHO制定了多项男性不育实验和临床诊断技术规范。正确认识辅助生殖技术（ART）的作用和适用范围。男性不育症诊疗基本程序（WHO）：不育男性病因学诊断治疗或偿试治疗男科学考虑ART助孕选择最适ART助孕方式辅助生殖技术实验诊断男性不育症诊疗标准化实验诊断标准化临床诊疗标准化男性不育症实验诊断标准化的意义保障诊断的准确性实现诊疗(研究)数据共享男性不育症实验诊断标

2、准化的内容检测指标标准化检测方法标准化检测质量合乎标准病因分析标准化男性不育症现代实验诊断技术精液计算机辅助分析精子功能检测精液免疫生化检验细胞遗传学检查分子生物学尤以精液免疫生化检验发展得最快,具有十分重要的诊断价值。2.男性不育常用实验诊断指标方法学及临床意义精子发生精液在生殖管道中的运输精子质量生精功能评价指标：血激素：FSH、LH、T、PRL、E2血清抑制素B生殖细胞凋亡染色体及无精子候选基因常用血激素FSH特性：支持细胞分泌；不是总能准确预测生精功能状态；一般地,血FSH水平与精原细胞的数量紧密相关,精原细胞

3、缺乏或明显减少时,血FSH常常会升高.当精原细胞数量正常,但出现精母细胞或精子细胞完全性生精阻滞时,血FSH一般在正常范围。血激素检测注意事项:FSH浓度水平相对稳定可靠;LH、T、PRL浓度均易产生生理波动；应注意对抽血时间的有序把握，及注意对抽血前影响因素的控制。血清抑制素BInhibinB检测方法:ELISA临床意义：精子发生的血清标志物；非阻塞性无精症病人睾丸精子抽取(TESE)预测；青春期性腺功能评估；卵巢储备功能评价。精浆中性α葡糖苷酶精浆果糖精浆锌、柠檬酸、ACP感染性检测精液在生殖管道中运输检测指标附睾

4、分泌功能指标:精浆中性α-葡糖苷酶Seminalplasmaneutralalpha-glucosidaseWHO推荐检测方法：Cooper法（PNPG法）临床意义：中性α-葡糖苷酶作为附睾分泌功能指标较左旋肉毒碱和甘油磷酸胆碱更特异更灵敏。结合精浆果糖、激素和睾丸其他指标,对远端输精管阻塞有较好的诊断价值。精囊分泌功能指标:精浆果糖SeminalplasmafructoseWHO推荐检测方法：吲哚法或酶法临床意义：精囊分泌的果糖是精子能量的主要来源。先天性精囊缺如果糖测定为阴性。精囊炎、不完全射精或射精过频，果糖含量

5、降低。用于鉴别单纯性输精管阻塞所致的无精症（果糖含量正常）和输精管、精囊发育不良引起的无精症。前列腺分泌功能指标（WHO推荐）精浆柠檬酸定量（酶法）（Seminalplasmacitricacid）精浆酸性磷酸酶定量（PNPP法）（Seminalplasmaacidphosphatase）精浆锌定量（5-Br-PAPS法）（Seminalplasmazinc）前列腺分泌功能指标:精浆柠檬酸临床意义:精浆柠檬酸来自前列腺，其作用是络合钙离子，通过与钙离子结合，而调节精浆钙离子浓度，并影响射精后精液液化过程的功能。前列腺分

6、泌功能指标:精浆酸性磷酸酶临床意义：前列腺炎患者精浆酸性磷酸酶含量降低,前列腺肥大或早期前列腺恶性肿瘤者其含量增高。前列腺分泌功能指标:精浆锌临床意义:①锌缺乏可引起性腺发育不良或性腺功能减退。②锌可调节雄激素代谢，锌含量降低时可促进睾酮转变为双氢睾酮。③锌直接参与精子生成、成熟、激活和获能过程。可使精子免于男女生殖道对其潜在的损伤。锌可帮助抑制细胞膜发生脂质过氧化反应，保证精子的形态结构和功能正常。④锌是前列腺功能指标之一，与抗细菌感染有关。静止性生殖道感染性检测精液白细胞过氧化物酶染色（LeukocytePerox

7、idase）精液白细胞群组化酶免定量（LeukocyteSubpopulations）精浆粒细胞弹性蛋白酶定量（PMN-elastase）精液圆细胞(rouudcell)：生殖道上皮细胞、生精细胞和白细胞统称之。正常精液：圆细胞数<5×106/ml;白细胞数<1×106/ml。病体原分离培养（四步法）：背景知识:精液白细胞过氧化物酶染色(正甲苯胺法)精液白细胞群酶免组化定量检测图谱精浆弹性蛋白酶研究进展经ROC分析：判定生殖道感染临界值(Cut-off):>290ng/ml灵敏度：79.5%特异性：74.4%(欧洲泌尿

8、外科学会:Cut-off>690ng/ml)292例不育病人，34%elastase>290ng/ml；20例正常生育者，5%elastase>290ng/ml；264例非白细胞精子症者,25%elastase>290ng/ml60例阳性者经Norfloxacine治疗后:25%<290ng/ml.三种感染性检测方法比较检测方法被