诺贝尔学术资源网紫外可见吸光光度法

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1、第2章可见和紫外吸光光度法2.1可见吸光光度法概述2.2光吸收的基本定律—朗伯-比耳定律2.3可见分光光度计简介2.4分析方法的建立2.5可见吸光光度法的应用122.1可见吸光光度法概述吸光光度法：基于物质对光的选性吸收的分析方法比色法可见分光光度法紫外分光光度法其他32.1.1可见吸光光度法的特点：(1)灵敏度高，适用于微量组分的测定。通常所测试液的浓度下限达10-5~10-6mol·L-1。(2)准确度高微量组分的测定相对误差约为1%~5%。(3)操作简单快速，价格便宜。(4)应用广泛，几乎所有的无机物质和许多有机物质的微量成分都能用此法进行测定。42.

2、1.2光的基本性质(1)光是一种电磁辐射。M+热M+荧光或磷光M+hM*基态激发态E1（△E）E25(2)光具有能量，能量是量子化的。E=E2-E1=h选择性吸收：分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同（E不同）。（3）计算吸收1ev能量的波长。（4）电磁波的分区。可见光区-人的眼睛能感觉到的光（380-780nm).6量子化特征能级的跃迁使物质对光产生选择性吸收7说明：1、可见光区是分子吸收多种能级跃迁的叠加：（1）电子能级（2）振动能级（3）转动能级2、电子能级的跃迁是带状光谱。3、分子的多种能级跃迁是范围较宽的″带状光谱‶。与分子的电

3、子结构有关。82.1.3物质对光的选择性吸收表2-2物质颜色与吸收光颜色的互补关系92.1.4吸收曲线：物质对不同波长光的吸收特性的曲线。（1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax。图2-2不同物质的吸收曲线10（2）对于不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同。（3）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似λmax不变。（动画）图2-3不同浓度的吸收曲线讨论：浓度与吸收的关系。11（3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，是物质的重要的基本特性之一，并作为物质定性分析的重要依据之一。122.2光的吸收基本定律

4、─朗伯-比耳（Larnbert-Beer）定律2.2.1.朗伯定律吸光度与液层厚度2.2.2比耳定律吸光度与物质浓度符号说明：13式中A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度；b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位；c：溶液的摩尔浓度，单位mol·L-１；：摩尔吸收系数，单位L·mol-１·cm-１；：入射光强度；2.2.3朗伯—比耳定律：透过光强度；14或:A==abcc：溶液的浓度，单位g·L-１a：吸收系数，单位L·g-１·cm-１a与的关系为：=Ma（M为摩尔质量）15（1）物质的吸光能力的度量max越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵

5、敏度越高。>105：超高灵敏；=(6～10）×104：高灵敏；=104～103：中等灵敏；<103：不灵敏。（2）摩尔吸收系数在数值上等于浓度为1mol·L-1、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。（例题1：p6）摩尔吸收系数ε的讨论16透光度T:描述入射光透过溶液的程度.T=I/I0吸光度A与透射比T的关系:透射比T（透光度、百分透光度）：吸光度A与浓度C是线性关系。17(1)吸光度A与透射比T的关系是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。(2)吸光度具有加和性。18朗伯—比耳定律的相关符号：192.3可见分光光度计简介基本组成光源单色器样品室检

6、测器显示（动画）202.3可见分光光度计简介1.分光光度计21分光光度计22232.3.1可见分光光度计的主要部件和结构1.光源在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500nm。碘钨灯、激光光源242.单色器将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任意波长单色光的光学系统。2526②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束；③色散元件：棱镜或光栅,将复合光分解为依波长顺序排列的光谱，形成单色光;①入射狭缝：光源的光由此进入单色器；27实际上理想的1

7、00%的单色光是不可能达到的，只能获得的是具有一定“纯度”的单色光，即该“单色光具有一定的有效带宽。有效带宽越小，分析的灵敏度越高、选择性越好、分析物浓度与光学响应信号的线性相关性也越好。283.样品室-样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。吸收池294.检测系统光电检测器:将光强度转换成电流来进行测量。要求：对测定波长范围内的光有快速、灵敏的响应，产生的光电流应与照射于检测器上的光强度成正比。光电检测器有光电池、光电管、光电倍增管等。30(1)光电管31(2)光电二极

8、管阵列电容器再次充电的电量与每个二极管检测到的光子数