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时间:2019-06-02
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1、第十章细胞核与染色体本章重点1.名词解释:核孔复合体、染色质、染色体、核小体2.试述核孔复合体的结构及其功能。3.试述从DNA到染色体的包装过程。4.设计实验,分析中期染色体的三种功能元件及其作用。5.概述核仁的超微结构及其与其功能之间的关系。学习目的(1)典型的非有丝分裂细胞核包括多个主要成分。(2)核被膜与核孔复合物。(3)染色质(chromatin)的组分与染色体(chromosome)的包装(4)核仁1781年Trontana发现于鱼类细胞;1831年,Brown发现于植物。大小:植物1~4μm,动物10μm。常以核质比来估算核
2、的大小。正常细胞NP≈0.5,分裂期细胞NP>0.5,衰老细胞NP<0.5。形状:圆形,胚乳细胞(网状)蝶类丝腺细胞(分支状)。位置:细胞中央,成熟植物细胞的边缘。数目:通常一个,成熟的筛管和红细胞(0)、肝细胞、心肌细胞(1-2)、破骨细胞(6~50)、骨骼肌细胞(数百)、植物毡绒层细胞(2~4)。结构:①核被膜、②核仁、③核基质、④染色质、⑤核纤层。功能:①遗传、②发育。第一节核被膜与核孔复合物Nuclearenvelope一、核被膜是双层膜结构构成:①内核膜(innernuclearmembrane)②外核膜(outernu
3、clearmembrane)③核周隙(perinuclearspace)外核膜:内质网的一部分,胞质面附有核糖体。核周隙:宽20~40nm,与内质网腔相通。核孔复合体:内外膜在某些部位相互融合形成的环状开口。核纤层:位于内核膜的内表面的纤维网络,可支持核膜,并与染色质及核骨架相连。二、核孔复合物(Nuclearporecomplex)核孔由至少50种不同的蛋白质(nucleoporin)构成,称为核孔复合体(nuclearporecomplex,NPC)。一般哺乳动物细胞平均有3000个核孔。细胞核活动旺盛的细胞中核孔数目较多,
4、反之较少。在电镜下观察,核孔是呈圆形或八角形,现在一般认为其结构如fish-trap。三、物质通过核孔复合物进出细胞核双功能、双向选择性亲水通道(1)被动运输—被动扩散每个NPC包含1个或多个开放性的亲水通道:直径9nm,长15nm通过注入不同大小的胶体金颗粒,在电镜下可以分析这些通道的有效直径。直径<10nm可以进入细胞核球蛋白分子量<60kd3000-4000核孔复合物/细胞(哺乳动物);输入106组蛋白/3mins.(正在合成DNA的cell)=100组蛋白/min/NPC(2)主动运输——通过核孔的物质运输与信号序列有关核定
5、位信号(nuclearlocalizationsignal,NLS):引导蛋白质进入细胞核的一段信号序列。受体为importin。第一个被确定的NLS是病毒SV40的T抗原,序列为:pro-pro-lys-lys-lys-Arg-Lys-val。NLS对连接的蛋白质无特殊要求,完成输入后不被切除。核输出信号(nuclearexportsignal,NES),引导RNP输出细胞核,受体为exportin。Ran蛋白,一类G蛋白,调节转运复合体的解体或形成。NLS只出现在亲核蛋白内典型的NLS包括几个连续的碱性氨基酸(带正电荷的氨基酸:L
6、ys,Arg)正常的丙酮酸激酶:在包含SV40的NLS的嵌合体胞质内丙酮酸激酶:在细胞核内运输机制依赖于NLS与核importreceptors和核孔蛋白结合。RanGTP酶直接驱动蛋白质的跨核孔复合物的运输。Ran-GDP和Ran-GTP的区划。转运机制出核运输与入核运输方式一致,只是方向相反。第二节染色质Chromatin是细胞周期不同阶段可以互相转变的形态结构染色质:(间期)纤维,直径10-30nm,分散在细胞核中。DNA+Proteins+RNA.染色体:(M期——有丝分裂期)细胞分裂过程中,由染色质聚缩而成的棒状结构。
7、真核细胞基因组的复杂性基因组(Genome):一个生物储存在单倍染色体组中的总遗传信息。随着生物的复杂性提高,基因的数量也随之增加。如果每一个核苷酸对是1mm,那么人类的基因组将长达3200kmSpeciesGenomesizeSV405×103bpE.coli4.6×106bpYeast2×107bpFruitfly2×108bpHuman3×109bp一些两栖类动物和植物的基因长度超过人类。一、染色质的化学组成组成:DNA、组蛋白、非组蛋白、少量RNA比例:1:1:(0.5-1):0.05(一)染色质DNA蛋白质编码序列1.5
8、%编码蛋白质的基因序列是单一DNA序列。其它属于基因家族(genefamily)——编码相似的蛋白但是氨基酸序列不完全相同。串联重复序列:编码rRNAs,tRN
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