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时间:2019-05-31
《球孢白僵菌分生孢子乳悬剂的配方筛选》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、维普资讯http://www.cqvip.com第28卷第4期植物保护学报Ⅷ,28No.4200112月ACrAPIT,HYL^Ⅱ(SI~ICADee2001球孢白僵茵分生孢子乳悬剂的配方筛选应盛华冯明光(浙江大学微生物研究所,杭州310029)摘要从6种常用的食品乳化剂中,筛选适合于球袍白僵茵(Beuatcr~bass/aaa)分生孢子粉使用的乳化剂。除单二甘醋外,其余5种乳化剂的乳化性能与孢子浓度呈正相关。除十二烷基硫酸钠外,各种乳化剂均能与孢子极好地相吝。综合乳化性、生物相吝性、湿润力和其它理化特性,蔗糖脂肪酸酯S.1可作为白僵茵孢子粉较为理想的乳化剂,使用
2、浓度为02%。以0.3%的羧甲基纤维素钠为稳定剂和0.1%的抗坏血酸作为紫外线保护剂,能显著提高袍子悬液在2h内的稳定性,并能较好地保护孢子免受紫外线损伤关键词珠孢白僵茵,袍子乳悬剂,生物相吝性乳化剂,稳定剂,紫外线保护剂球孢白僵菌(Beautcdahm)在害虫的可持续控制和生态平衡的维护方面起着重要的作用,一直是国内外生物防治的研究热点,在国外已被开发成多种商品制剂_]·。该菌在我国虽有多年的研究及应用历史,但迄今仍未有正式的商品制剂问世。其主要技术难点之一是尚未确定合适的白僵菌剂型l3J。在实际应用中,白僵菌孢子粉剂的防虫效果不够稳定L4j。由于乳悬剂以水作为
3、稀释载体,近年白僵菌剂型有向乳悬剂或油剂方向发展的趋势。在白僵菌乳悬剂研制中,筛选生物学相容的乳化剂至关重要。我国在用白僵菌孢子乳悬剂防治马尾松毛虫的实践中,已研制出适于超低容量喷雾的乳化剂l4-。美国近年开发了以醇烷氧基化合物为乳化剂的白僵菌分生孢子乳悬剂_6j。为防止紫外线对白僵菌孢子的损伤J,常在菌剂中加入与孢子相容的保护剂J。作者通过筛选与球孢白僵菌孢子相容的乳化剂、稳定剂及紫外线保护剂,为设计适合新型实用的白僵菌孢子乳悬剂配方提供科学依据。1材料与方法1.1材料乳化剂均为食品级,包括吐温一8O(Tween-80)、聚甘油酯(polyglycvzolest
4、ersoffattyacid,PEFA)、单二甘酯(Ⅱ.oIanddi-glycefides,rC,DG)、十二烷基硫酸钠(dodeeylsodiumsulfate,SDS)、蔗糖脂肪酸酯(~lleI136eeslersoffattyacids)S-1及s_ll;稳定剂为羧甲基纤维素钠(sodiuInearboxymethyleelhlose,cM一№)和海藻酸钠(sodiumalginate,Atg.Na);紫外线保国家杰出青年科学基金(3952soo4)和国家自然科学基金(35g70513)资助。通讯作者(BⅡ:~a,g@ds日u.edum)维普资讯http:
5、//www.cqvip.com植物保护学报28卷护剂为对氨基苯甲酸(p-aminobenzoieacid,PAP,)、抗坏血酸(Vjta盯IfmC)、荧光素钠(fluores—eeinscdium,Flu.Na)和茶多酚(teapolyphenols,1胛)。1.2乳化剂筛选①孢子密度测定:将高纯度孢子粉配制的孢子悬液滴于血球计数板上,量出50个孢子的直径。按1200亿/g的含孢量计算出白僵菌分生孢子的密度。②乳化剂湿润力测定:先将乳化剂配成0.05%、0.1%、0.2%和0.5%的溶液,分别吸取10于50的烧杯中。在500r/rain的磁力搅拌下,将l0哗孢子粉
6、迅速倒人烧杯,继续搅拌5s后,从悬液中部取样测定孢子浓度,每浓度重复3次,以蒸馏水作对照。③悬浮稳定性测定:用上述不同浓度的各种乳化剂溶液配制成lo9个孢子/ml的高浓度孢子悬液,分别取2ml加入比色杯(1cm×1cm×4.5cm),在752光栅紫外分光光度仪(上海精密科学仪器有限公司生产)的470【町J处(汤坚等,1997),静置0、3、5、l0、l5、30、45、60、9o及120min后记录孢子悬液的吸光度。重复3次,以不加乳化剂的孢子水悬液作为对照。④乳化剂与孢子的相容性:用上述不同浓度的乳化剂溶液配制浓度为lo6个孢子/ml的悬液.分别在25±1℃下振荡
7、(100r/m_m)培养,24h后取样计数培养液中萌发与未萌发的孢子数,并计算孢子萌发率。重复3次,孢子水悬液作为对照1.3稳定剂筛选按0.05%、0.10%、0.30%及0.50%的浓度将不同稳定剂加人选出的0.2%S-1乳化剂溶液中,然后按前述方法分别测定加人稳定剂后乳化剂的湿润力、高浓度孢子悬液的稳定性及稳定剂与孢子的相容性。各稳定剂每浓度重复3次,以不加稳定剂的乳化剂溶液为对照。1.4紫外线保护剂筛选将孢子粉加入含0.2%S-1乳化剂和筛选而得的0.3%cM.Na稳定剂溶液中,配成浓度为lo6个孢子/ml的孢子液。然后按0.05%、0.10%、0.15%及
8、0.20%
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