动物细胞与组织培养

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1、讲课教师:刘哲黑龙江八一农垦大学第一章动物细胞与组织培养第一节动物组织细胞培养基础一、动物细胞特点动物细胞属于真核细胞，与细菌等原核细胞比进化程度更高，结构、成分更复杂，功能更全面。动物细胞的连接：封闭连接：紧密连接、间壁连接锚定连接：粘合带与粘合斑，桥粒与半桥粒通讯连接：间隙连接，胞间连丝，化学突触3.动物细胞的特点及生长特性动物细胞大，无细胞壁动物细胞生长缓慢，倍增时间长，易受污染需氧量少，对机械搅拌或剪切力敏感动物细胞间主要以聚集体形式存在原代细胞一般繁殖50代即退化死亡一些不同形状的人体细胞Hepatocy

2、tes(肝)血液凝块Ｔ细胞与Ｂ细胞巨噬细胞白血球巨噬细胞纤灭癌细胞Ｔ细胞与Ｂ细胞免疫细胞树突细胞:嗜中性粒细胞吞噬志贺杆菌巨核细胞骨细胞成骨细胞破骨细胞(紫色)胶质细胞正常衰老细胞正常衰老细胞（红色）和死亡细胞细胞凋亡的核变癌症细胞大片自由基和被其污染至病的细胞细胞变异，增大的癌症细胞乳腺癌细胞脑部细胞癌变由于营养过剩导致的细胞和由此导致死亡病死的肌细胞SEMofretinaofeyeshowingrodcells(photoreceptors）扫描电镜的眼睛显示视网膜视杆细胞Scanningelectronmic

3、rographofahumanspermcontactingahamsteregg.人上皮细胞培养7d尿路上皮细胞小鼠胚胎成纤维细胞体外培养的间充质干细胞黑色素细胞第二节动物细胞与组织培养基本概念一分类:动物细胞与组织培养：(CellandTissueCulture)指的是从动物组织或细胞从体内取出，在模拟体内生理环境，无菌、适当温度和一定营养条件下，使之生存和生长并维持其结构和功能的方法。细胞培养(CellCulture)培养物是单个细胞和细胞群。器官培养（OrganCulture）培养的是器官的原基、器官的一部

4、分或整个器官，使之在体外生存、生长和保持一定功能的方法。ClassificationofCellCulturesPrimaryCultureCellstakendirectlyfromatissuetoadish原代培养：直接取自动植体的组织或细胞的培养。SecondaryCultureCellstakenfromaprimarycultureandpassedordividedinvitro.传代培养：从原代培养的细胞的继续转接培养称为传代培养。Thesecellshavealimitednumberofdivi

5、sionsorpassages.Afterthelimit,theywillundergoapoptosis.ApoptosisisprogrammedcelldeathContactinhibitionWhencellscontacteachother,theyceasetheirgrowth.CellsarrestinG0phaseofthecellcycleTransformedcellswillcontinuetoproliferateandpileuponeachotherPrimaryCulture

6、retentionofthe3Dshapeoutgrowthandmigrationofcells细胞系(cellline)：原代细胞经第一次传代后，形成的细胞群体，即具有增殖能力，类型均匀的培养细胞，一般为有限细胞系。细胞株：细胞系经过克隆或其他方法而得的单一类型的细胞群体。二发展历史动物细胞组织培养的奠基人是美国生物学家哈里森，1907年盖玻片覆盖凹窝玻璃悬滴培养法。1923年，法国学者卡勒尔（Carrel）设计了卡氏瓶培养法，扩大了组织生存空间。1951年，厄尔（Earle）发明了体外培养动物细胞的人工合成培

7、养基。卡瑞尔把无菌技术带到组织培养中。三动物细胞培养的应用a.生物制品的生产b.转基因动物的培养c.检测有毒物质d.医学研究四培养细胞按生长方式分:（一）贴附型细胞（1）成纤维细胞型细胞：（2）上皮型细胞:（3）游走型细胞（4）多形型细胞（二）非贴附型细胞(悬浮型)但有些细胞既可贴附生长，也可悬浮生长。（一）贴附型细胞贴附生长是大多数细胞在体内生长的基本存在方式。贴附型细胞在培养时能贴附在支技物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞，常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。（1）成纤维细胞型细胞：长梭形或不规则，细胞在支持物

8、表面呈梭形或不规则三角形生长，细胞中央有卵园形核，胞质向外伸出2-3个长短不同的突起，生长时呈放射状、漩涡状走向。成纤维型细胞在培养中的细胞凡形态与成纤维细胞类似时，皆可称之为成纤维细胞。本型细胞由形态与体内成纤维细胞的形态相似而得名.除真正的成纤维细胞外，凡由中胚层间质起源的组织细胞常呈本类形态生长。人胚肺细胞在显微镜下呈现为典型的成纤维细胞型。成纤维细胞