Protein A亲和填料

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1、聚合物型生物纯化层析介质Sepromax®AProteinA亲和层析介质无锡加莱克色谱科技有限公司WUXIGALAKCHROMATOGRAPHYTECHNOLOGYCO.,LTD.Sepromax®A亲和层析介质拥有自主知识产权和与利保护，它是以固定化的重组蛋白A（rProteinA）作为配基，单分散多孔PS-DVB微球为载体，应用于高通量抗体纯化制备的新一代亲和层析介质。它不传统的多糖基质介质相比，具有耐压性更强，操作流速更高的优势。Sepromax®A40亲和层析介质经过加莱克与有的PS-DVB表面

2、镀膜技术的改造，克服了基材表面的非特异性相互作用，具有良好的生物兼容性；再通过加莱克独特的键合技术，充分利用和发挥了蛋白A的高效性，使Sepromax®A40在高流速下具有传统多糖基质介质无可比拟的抗体结合量，从而提高抗体纯化效率。加莱克在常规Sepromax®A40的基础上开发了Sepromax®A40Plus升级版，大幅度提高了介质的碱耐受性，可以保证Sepromax®APlus介质在较苛刻的碱性Clean-in-Place（CIP）下使用，从而简化了生物制药企业的抗体纯化工艺，节省生产成本。★特点

3、高通量、高载量、高产率更好的化学稳定性和更长的使用寿命高强度单分散球形PS-DVB、易装填、柱压低极佳的批次重现性★Sepromax®A层析介质技术参数技术参数描述Sepromax®A40Sepromax®A40Plus基材单分散、刚性、多孔PS-DVB微球粒径40μm配基RecombinantproteinA约30mghumanIgG/mL（采用10%穿透前沿分析法，以1.0mg/mlhIgG为样品，柱床高度动态载量5cm，流速500cm/h，停留时间0.6min）推荐流速300-700cm/

4、h最高耐受压力1500psi(100baror10MPa)pH稳定性2–8(长期)2-11(CIP)2–11(长期)2-13(CIP)操作温度4-40℃CIP溶剂8M尿素,6M盐酸胍等0.1~0.5MNaOH保存20％乙醇溶液于2-8℃★Sepromax®A层析介质流速与压力关系右图为Sepromax®A40不同为PS-DVB基材的POROSMabCaptureA介质（粒度平均45μm）在同样规格层析柱中的流速不压力曲线比较（柱高10cm，流动相为纯水）。结果表明，在同样线速度下，粒径更小的Seprom

5、ax®A40由于单分散的特点具有更低的反压，在大规模纯化制备中更具有优势。★Sepromax®A层析介质在不同线性流速下载量的变化测评填料柱规格柱体积来源Sepromax®A40ID4.6×50mm0.83ml自制Sepromax®A40PlusID4.6×50mm0.83ml自制MabSelectSuRe®HiTrap7.0×25mm1.0mlGE由于基材相同，A40和A40Plus具有几乎相同的变化趋势，相比多糖基材的MabSelectSuRe具有更优异的高流速传质性能，从而DBC丌会随着流速的提高

6、而显著降低！注：DBC测试采用10%穿透前沿分析法，样品为1.0mg/mlγ-球蛋白（hIgG）★Sepromax®A层析介质在不同停留时间(residencetime)下载量的变化40mg/ml★Sepromax®A层析介质在高样品浓度下的动态载量层析介质：SepromaxA40Plus,MabSelectSuRe层析柱尺寸：7mmI.D.x2.5cm(1mL)层析条件：0.02mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.4)+0.15mol/LNaCl动态吸附载量(DBC)：根据穿透曲线(breakthroug

7、hcurve)并允许5%的漏出条件下计算得出样品：人γ球蛋白(hIgG)在柱留时间低于2分钟的情况下，高浓度的IgG进样时，SepromaxA40Plus的动态吸附载量比MabSelectSuRe高出约20-50%。★Sepromax®A层析介质可提高纯化效率选择方案1、2能够显著提高抗体纯化效率，样品处理时间缩短一半（层析柱需要更高的压力耐受性能或者更大的内径）选择方案3，则可以在丌必升级层析柱及输液泵的前提下，用一半体积的填料达到不MabSelect近似的纯化效率！★Sepromax®A层析介质

8、的回收率如上图所示，Sepromax®A介质能够达到不多糖基材相似的亲水性和极低的非特异性相互作用，从而保证纯化抗体的回收率基本无差异。（样品为1.0mg/mlγ-球蛋白）★Sepromax®A40Plus层析介质的耐碱性CIP条件为0.5MNaOH，每个循环接触10min，每20个循环测定一次DBC，其变化曲线如左图：Sepromax®A40Plus耐受碱性CIP冲洗的能力不MabSelectSuRe无明显差别！120次循环后DBC仍保持