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1、KOD-Plus-使用PCR等的代表性实例TOYOBOCO.,LTD.BiochemicalOperationsDepartmentOSAKAJAPAN—目录—[1]KOD-PLUS-的特性.......................................................................................................1[2]PCR反应的准备及条件.....................................
2、...........................................................2[3]PCR实例.....................................................................................................................3实例1KOD-Plus与各种其它耐热性DNA多聚酶之间PCR可信度的比较................3实例2使用KOD-Pl
3、us对高GC含量样品进行PCR扩增.........................................5实例3使用KOD-Plus-进行Site-directedmutagenesis............................................8实例4使用KOD-Plus-进行各类长链PCR.............................................................11实例5通过菌落直接法PCR对金黄色葡萄球
4、菌进行基因特性分析.........................13TM实例6使用含KOD-Plus-的RT-PCR试剂盒“ReverTra-Plus-”进行基因扩增.......15实例7RT反应液量对下一步使用KOD-Plus-进行PCR时的影响..........................18[4]有关KOD-Plus-的问题与解答...........................................................................
5、.....20[5]TOYOBOPCR酶以及RT-PCR试剂盒目录..............................................................23购买者须知PCR（PolymeraseChainReaction，多聚酶链反应）知识产权归F.Hoffmann-LaRocheLtd.及Hoffmann-LaRocheInc.所有，受美国专利号4,683,195、4,683,202、4,965,188及5,075,216保护。IKOD-Plus-的特性K
6、OD-Plus-是一种新型的高保真PCR试剂，它允许对各种目标物进行PCR。KOD-Plus-是从日本鹿儿岛县小宝岛上发现的硫质喷气孔中分离出来的ThermococcuskodakaraensisKOD1菌株（超耐热原1)始菌）生成的KODDNA多聚酶进行改良的品种。1)在耐热DNA多聚酶中，KODDNA多聚酶具有最高的DNA合成效率以及PCR保真度。但是，其高校正功能可能会导致PCR过程中的一些问题。为此，我们已经根据最新的技术研制出了更优良的PCR试剂。特别是，添加了两种结合KODDNA多聚
7、酶的具有不同抗原决定部位的单克隆抗体以便提供更多的解决方案，另外包括对缓冲液组成进行了改变。因此，我们已将一种具有很高PCR性能的新型的高保真PCR试剂投放到了市场。KOD-Plus-主要具有以下特性。●高保真度●KOD-Plus-具有强3'→5'核酸外切酶活性以及多聚酶活性，并因此提供了大约比TaqDNA多聚酶高82倍的保真度。●高耐热性●KOD-Plus-对于各种PCR模板都很合适，某些PCR模板可能具有更高的高级结构并且某些PCR产物需用来进行克隆。●适合于“热启动”PCR●在室温下多聚酶
8、活性以及校正活性将受到抑制，并且通过两个单克隆抗体，PCR反应之前由引物导致的非特异性反应以及消化作用也将受到抑制。此外，由于这些抑制作用是由抗体引起，所以其作用在首次循环中的变性阶段中将消失并从此不再抑制随后的反应。●可用于高GC含量的模板●对模板很高的亲和性为扩增高GC含量的目标物提供了可能性。●最佳的缓冲液组成●对多种的目标物都可进行长链PCR。参考文献1)Takagi,M.,Nishioka,M.,Kakihara,H.,Kitabayashi,M.,Inoue,H.,Kawakami,
