酶学与酶工程第三章酶的生物合成学生

酶学与酶工程第三章酶的生物合成学生

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时间:2019-05-13

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1、第三章酶的生物合成微生物发酵产酶的优点:1)微生物种类繁多;2)微生物生长周期短,繁育快;3)微生物易改造,可通过多种手段育种。第一节微生物发酵产酶一、产酶微生物的种类用于酶的生产的细胞必须具备几个条件(1)酶的产量高(2)容易培养和管理(3)产酶稳定性好,不易变异退化,不易被感染(4)利于酶的分离纯化(5)安全可靠,无毒性(一)细菌1)无芽孢杆菌大肠埃希氏菌属(Escherichia):变形菌门(Proteobacteria))纲:γ-变形菌纲(γ-Proteobacteria)目:肠杆菌目(Enterobacteriales)科:肠杆菌

2、科(Enterobacteriaceae)属:埃希氏菌属(Escherichia)大肠埃希氏菌属(Escherichia):大肠埃希菌可用来制备多种酶假单胞菌属(Pseudomonas):革兰氏阴性,r-变形菌纲,β-酪氨酸酶(用于合成L-多巴,治疗帕金森病)、葡萄糖异构酶、溶菌酶、青霉素G酰化酶和脂肪酶(2)芽孢杆菌枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)枯草芽孢杆菌,是芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7~0.8×2~3微米,着色均匀。无荚膜,周生鞭毛,能运动。革兰氏阳性菌,芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米,椭圆到柱状,位于菌

3、体中央或稍偏,芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,在液体培养基中生长时,常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。(3)球菌微球菌属(Micrococcus):微球菌属拉丁学名(MicrococcusCohn,1872)细胞球形,直径0.5~2.0μm,成对、四联或成簇出现,但不成链。革兰氏阳性。罕见运动,不生芽孢。严格好氧。菌落常有黄或红的色调。链球菌属(Streptococcus):链球菌(Streptococcus)是一类球形的革兰氏阳性细菌,属于厚壁菌门的一个属。2.放线菌(actin

4、omycetes)放线菌是一群高GC含量的革兰氏阳性细菌。放线菌能产生各种胞外酶,如蛋白酶、葡萄糖异构酶、溶菌酶等,而且放线菌还是生产抗生素的主要微生物。链霉菌3.酵母菌酵母菌(yeast)是—类单细胞微生物,但不同于细菌,属于真核微生物。酿酒酵母球拟酵母假丝酵母拟酵母4.霉菌霉菌是一类丝状真菌,用于酶的发酵生产的霉菌主要有黑曲霉、米曲霉、青霉、木霉、根霉、毛霉等。黑曲霉:黑曲霉,半知菌亚门,丝孢纲,丝孢目,丛梗孢科,曲霉属真菌中的一个常见种。米曲霉:半知菌亚门,丝孢纲,丝孢目,从梗孢科,曲霉属真菌中的一个常见种。米曲霉菌落生长快,10d直

5、径达5~6cm,质地疏松,初白色、黄色,后变为褐色至淡绿褐色。背面无色。分生孢子头放射状,一直径150~300μm,也有少数为疏松柱状。分生孢子梗2mm左右。青霉:一般指青霉属。为分布很广的子囊菌纲中的一属,和曲霉属有亲缘关系,有二百几十种,代表种是灰绿青霉,从土壤或空气中很易分离。分枝成帚状的分生孢子从菌丝体伸向空中,各顶端的小梗产生链状的青绿—褐色的分生孢子。已知在生理学方面类似曲霉属,同时有很多能产生毒枝菌素木霉:木霉属于半知菌亚门,丛梗孢目,木霉属,常见的木霉有绿色木霉、康宁木霉等。根霉:接合菌亚门、接合菌纲、毛霉目、毛霉科真菌中的

6、一个大属。菌丝无隔、多核、分枝状,有匍匐菌丝和假根,借此可在基物表面广泛蔓延,不产生定形菌落。毛霉:毛霉又叫黑霉、长毛霉。接合菌亚门接合菌纲毛霉目毛霉科真菌中的一个大属。以孢囊孢子和接合孢子繁殖。菌丝无隔、多核、分枝状,在基物内外能广泛蔓延,无假根或匍匐菌丝。1.土壤中的产酶微生物2.水体中的产酶微生物3.空气中的产酶微生物4.极端环境中的产酶微生物二、产酶微生物的来源三、产酶微生物的分离和筛选菌种除了可以分离筛选得到,还可通过向菌保中心购买,中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC) 中国农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC) 中国普通微

7、生物菌种保藏管理中心(CGMCC) 中国兽医微生物菌种保藏管理中心(CVCC) 中国林业微生物菌种保藏管理中心(CFCC) 中国药用微生物菌种保藏中心(CPCC)中国医学微生物菌种保藏管理中心(CMCC)中国海洋微生物保藏中心(MCCC)国外菌种保藏中心:ATCC(AmericanTypeCultureCollection)美国典型菌种保藏中心NBRC(NITEBiologicalResourceCenter)日本技术评价研究所生物资源中心CBS(CentraalbureauvoorSchimmelcultures)荷兰微生物菌种保藏中心K

8、CTC(KoreanCollectionforTypeCultures)韩国典型菌种保藏中心DSMZ(DeutscheSammlungvonMikroorganismenundZ

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