杀虫剂生物测定技术

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1、第二章杀虫剂生物测定技术标准试虫杀虫剂生物测定方法毒力的表示方法杀螨剂生物测定方法杀虫剂田间药效试验一、标准试虫标准试虫是指数种被普遍采用的具有一定代表性和经济意义及耐药能力较稳定而均匀的昆虫群体。标准试虫的大量供应与质量均匀是影响生物测定结果正确、稳定与可靠的最基本因子,同时也是保证顺利地开展和完成生物测定最基本的条件之一。(1)粘虫(LeucaniaseparateWalker),代表鳞翅目咀嚼式口器食叶性害虫。(可人工饲养)(2)玉米螟(Ostrinianubilalis),代表为害杂粮作物的钻蛀性害虫。(可人工饲养)(3)二化螟(Chilosuppressa

2、lis),代表钻蛀性水稻害虫。(可人工饲养)常用的供试昆虫有:(4)还有三化螟、棉铃虫、地老虎农业害虫等。(5)卫生害虫(如蚊、蝇类)(6)仓库害虫(米象、赤拟谷盗等)(7)刺吸性害虫(蚜螨类)(1)在分类上或经济上有一定的代表性的不同种类的昆虫;(2)对药物敏感性符合要求;(3)容易饲养,能终年提供试材,使测定工作不受地区或季节的限制;(4)在试验中便于控制操作。供试昆虫的要求二、杀虫剂生物测定方法(1)胃毒作用(2)触杀作用(3)熏蒸作用(4)内吸作用夹毒叶片法液滴饲喂法口腔注射法胃毒作用(stomachaction)的测定方法叶片夹毒法适合于植食性、取食量大的

3、咀嚼式口器的昆虫,如鳞翅目幼虫、蝗虫等。其基本原理是用2张叶片,中间均匀地分布一层杀虫药剂,饲喂试虫,按吞食叶片的面积计算吞食药量。夹毒叶片法(sandwichmethod)对于舐吸式口器的昆虫不宜用夹毒叶片法,如家蝇、果蝇、蜜蜂等昆虫喜欢食糖液,可将一定量的杀虫剂加入到糖液中,用微量注射器形成一定大小的液滴(0.001~0.01ml),直接饲喂昆虫。液滴饲喂法(Feedingofmeasureddrops)一般适用个体较大的咀嚼式昆虫,如家蚕,鳞翅目幼虫等,处理时,将药剂溶解后用微量注射器或手细管点滴定量的药液注入试虫口器中,昆虫吞食药液后,转入放有新鲜饲料的容器

4、中培养观察。这种方法由于从口腔注入药液时易刺破口腔内软组织,技术难以掌握。因此,应用较少。口腔注射法触杀作用(contactaction)测定方法点滴法药膜法或残膜法浸液法室内定量测定触杀毒力最常用的方法。在测定触杀毒力时,应尽量避免药剂从口器或气孔进入虫体。直接将药液点滴到昆虫的某一部位。多为幼虫的前胸背板,溶剂迅速挥发,药剂在体壁上形成药膜而侵入体内。点滴法用喷雾法及喷粉法将药剂定量地分布于一定表面上,如滤纸、玻璃容器内壁及植物叶片等而形成一层均匀的药膜。使昆虫在药膜上接触一定时间(4~24h),检查击倒率或死亡率。求出药剂对试虫的毒力。药膜法或残膜法对于水生昆

5、虫(蚊幼虫、螨类和蚜虫) 将药剂配成5~7个不同浓度有药液,摘取有一定数量蚜虫的豆苗叶片,在不同药液中浸3~5s,取出后,用吸水纸吸去多余的药液,统计叶片上的蚜虫数量,对照用清水处理。保湿24h,检查蚜虫的死亡数,计算死亡率及校正死亡率,求出LC50。浸液法某些药剂有内吸性如许多有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂可以通过植株的根、茎、叶等部位吸收到植株的内部,随着植物体液在体内的传导,当害虫取食或刺吸植物时,药剂也随之进入害虫的体内并将其杀死。内吸作用(Systemicaction)的试验方法内吸杀虫剂毒力的测定方法分为直接测定法和间接测定法2种。直接法包括茎或叶的局部涂药

6、、根际施药及种子处理等。间接法是用处理后的植物,取其叶片研磨成为水剂,加在水中,测定对水生昆虫的毒力。定义杀虫药剂以气体的方式通过害虫的呼吸系统进入虫体,而起到毒杀的作用称熏蒸作用。目的熏蒸作用毒力的测定的目的主要有2个:一是用鉴别杀虫剂有无熏蒸作用;二是测定熏蒸剂的杀虫毒力。注意要求在一个密闭的条件下进行,且药剂不与试虫接触。熏蒸作用(fumigationaction)测定方法毒力的表示方法及计算致死中量(LD50:Medianlethaldose)或致死中浓度(LC50:Medianlethalconcentration):药剂杀死某种生物群体50%所需的剂量(

7、LD50)或浓度(LC50)。结果检查与LD50计算胃毒作用触杀作用以夹毒叶片法为例昆虫取食后放在干净容器中,加入新鲜的植物叶片,在24~72h后检查死亡率。由于各昆虫的取食量不同,因此必须单独观察记录。根据取食面积、单位面积上的着药量(µg/g),根据单位体重受药量,由小至大顺序排列,由于在取食量较小时试虫无死亡;随着取食量加大,出现死、活均有出现的剂量范围;再加大取食量,试虫全部死亡。这三种表现自然分成三组:(1)生存组(2)生死组(3)死亡组。如实验中三组数值均出现,则说明实验成功,如缺其中一组,应重做。生存组和死亡组是划分生死组(中间组)界线的。将中间组

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