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1、Agilent1200LC现场培训教材安捷伦科技有限公司化学分析仪器部1培训目的基本了解1200LC硬件操作掌握化学工作站的开机关机参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作二培训准备1仪器设备Agilent1200LC_G1310A:(单元泵)G1312A(二元泵)G1311A(四元泵)_G1313A自动进样器_G1316A柱温箱_G1314AVWD检测器_G1362A示差检测器_G1315A/B(DAD检测器)_G1321A(FLD检测器)_色谱柱:ZorbaxeclipseXDBC8,150mm4.6mm
2、i.d2溶剂准备_色谱级纯或优级纯乙腈ACN或甲醇_二次蒸馏水基本操作步骤:(一)开机1打开计算机,进入WindowsXP或Windows2000画面,并运行BootpServer程序2打开1200LC各模块电源3待各模块自检完成后双击Instrument1Online图标化学工作站自动与1200LC通讯进入的工作站画面如下所示4从View菜单中选择MethodandRuncontrol画面,单击”View”菜单中的ShowTopToolbarShowstatustoolbarSystemdiagram,”Sa
3、mplingdiagram”使其命令前有标志来调用所需的界面5把流动相放入溶剂瓶中6打开Purge阀7单击Pump图标出现参数设定菜单单击Setuppump选项进入泵编辑画面8设Flow5ml/min单击OK9单击Pump图标出现参数设定菜单单击Pumpcontrol选项选中On单击OK则系统开始Purge直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,切换通道继续Purge直到所有要用通道无气泡为止10单击Pump图标出现参数设定菜单单击PumpControl选项选中Off单击Ok关泵关闭Purgevalve11单击P
4、ump图标出现参数设定菜单单击Setuppump选项进入Pump编辑画面设Flow1.0ml/min12单击泵下面的瓶图标如图所示以二元泵为例输入溶剂的实际体积和瓶体积也可输入停泵的体积单击Ok二数据采集方法编辑1开始编辑完整方法从Method菜单中选择Editentiremethod项如上图所示选中除Dataanalysis外的三项单击Ok进入下一画面2方法信息_在MethodComments中加入方法的信息如方法的用途等_单击Ok进入下一画面3泵参数设定以二元泵为例在Flow处输入流量,如1ml/min在S
5、olventB处输入70.0,(A=100-B),也可Insert一行”Timetable”,编辑梯度在PressureLimitsMax处输入柱子的最大耐高压以保护柱子单击Ok进入下一画面4自动进样器参数设定:选择合适的进样方式,如图所示进样体积1.0ul,洗瓶位置为6号“StandardInjection”----只能输入进样体积此方式无洗针功能InjectionwithNeedleWash----可以输入进样体积和洗瓶位置此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针Useinjectorprogram---可
6、以点击Edit键进行进样程序编辑_点击Ok进入下一画面5柱温箱参数设定:在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more>>”键,如图所示,选中”Sameasleft”---使柱温箱的温度左右一致点击ok进入下一画面6VWD检测器参数设定:在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,在”Peakwidth(Responsetime)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间,如>0.1min(2s)在Timetable中可以Insert一行输入随时间切换
7、的波长如1min波长=300nm点击ok进入下一画面7DAD检测器参数设定:色谱条件:流动相:75%ACN,25%水进样量:5ul;检测波长:254nm,BW=30nm,参比波长=350nm,BW=100nm;柱温:30;流量:1ml/min;停止时间:出峰完毕样品波长--一般选择最大吸收处的波长样品带宽BW—一般选择最大吸收值一半处的整个宽度BWNoise_参比波长—一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域参比带宽BW—至少要与样品信号的带宽相等许多情况下用100nm作为缺省值PeakwidthRespon
8、setime其值尽可能接近要测的窄峰峰宽Slit—狭缝窄光谱分辨率高宽时噪音低同时可以输入采集光谱方式步长范围阈值选中所用的灯点击Ok进入下一画面8RID检测器参数设定:色谱条件:进样体积:20ul光学单元温度:Off极性:正峰宽(响应时间):4s如图所示:“OpticalUnitTemperature”---若环境温度控制在2,设定为Off,若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为高于
