ABEL细胞活力测试 cell activation Kenreal X...

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1、细胞活力分析测试测试自由基或其他活性物质的产生1上海市龙吴路51号1号楼208室电话:021-54488091,800-820-0526传真:021-54488095Email:support@kenreal.com.cnwww.kenreal.com.cnABEL细胞活力测试(PHOLASIN)ABEL(发光测试分析)细胞活性分析试剂盒针对检测全血和分离的细胞中产生的白细胞性的自由基和其他活性物质。这发生在超氧化物产生的NADPH氧化酶系统激活过程中,称之为呼吸爆发。这个测试也可以用于检测其他类型的包

2、含NADPH氧化系统的细胞的超氧化物的产生(如纤维原细胞,),同样可以用于如黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶等酶系统产生的超氧化物分析。此外,此试剂盒能够被用于检测白细胞脱粒和确定倾向于脱粒的细胞。这些独特的化学发光分析仅需要1μl的全血或几千个细胞就可以,并在10分钟内完成。试剂盒包含有独特的发光蛋白Pholasin,细胞刺激剂PMA和fMLP,以及配置和测试所需的缓冲液。针对全血测试的试剂也包含有血稀释缓冲液和稀释管,并有佐剂增强发光信号。细胞活性测试试剂盒简单易用,快速,超敏感(能用于毛细管血),化学发光测试

3、实时的自由基产生和脱粒。它们能用于:¢测试白细胞的呼吸爆发;¢研究NADPH氧化酶的异常,如发生在不同类型的CGD和多种多样性中¢区分受体活性和细胞内NADPH氧化酶活性;¢检测NADPH氧化酶对感染,发炎和医学干涉等的活性变化,因此可应用于:µ生物相容性监测µ药物评估和测试µ疫苗的QCµ外科µ疾病管理µ评估在化疗,移植后的嗜中性粒细胞的活性¢监测髓过氧化物酶的脱粒;¢超敏感检测多种细胞,如脑细胞,产生的自由基和氧化物。NADPH氧化酶在激活时形成一个蛋白复合物,在细胞膜内侧组装。这有一个超氧化物的连续

4、流,它是通过细胞膜到氧的持续的电子转移(从NADPH)释放到细胞外。这个”呼吸爆发”用于描述上述事件,因为大量的氧(比正常的高10-20倍)在葡萄糖氧化成NADPH的过程中消耗掉了,它的逆反不是通过线粒体的呼吸来进行的。NADPH氧化酶的膜成分也发生在次级颗粒膜上,在脱粒过程中次级颗粒膜与其他的颗粒融合,也包括细胞膜。频繁的脱粒伴随着的是依赖于刺激剂的氧化酶的激活。因为过量的自由基,氧化物和酶释放到细胞外。那些测试细胞内超氧化物岐化产生的过氧化氢只是对呼吸爆发的一小部分进行了定量测试。2上海市龙吴路51

5、号1号楼208室电话:021-54488091,800-820-0526传真:021-54488095Email:support@kenreal.com.cnwww.kenreal.com.cnPholasin的介绍Pholasin是来自海洋岩生的生物发光软体动物—Pholasdactylus的发光蛋白。Pholasin自身不会发光,需要有启动剂。白细胞(和其他细胞类型)产生的自由基和其他的反应氧能够激活Pholasin发光。对激活的白细胞,Pholasin能超敏感检测。Pholasin在以下物质存在下

6、能够发光:¢自由基:超氧阴离子,单线氧,羟基自由基和/或过渡自由基¢氧化物如:次氯酸和次溴酸,氯胺,溴胺和peroxynitrite¢酶:过氧化物酶和特定的氧化酶临床意义不同类型的白细胞用不同的途径对不时进入体内的外来细菌和病毒做出反应。一个重要的反应是负责超氧阴离子(可以转换成过氧化氢)产生的酶系统的激活。这些细胞也可以正常地释放出含有这些酶的颗粒,产生反应氧类物质如次氯酸和次溴酸。例如在心脏中,伴随心脏病的是白细胞移除死细胞。这些活力对辅助恢复是重要的。实际上,没有这些细胞我们的生命就不能存活,甚至

7、是很小的感染。然而在它们的工作中,这些细胞大量聚集释放出破坏性的反应氧(ROS)和颗粒酶到受伤组织,并引起炎症。在小范围,炎症能够辅助伤口愈合。但是一般炎症是破坏性的,当它失去控制时会导致一个接一个的器官的破坏,甚至是杀死个体。这有许多的疾病和状况中自由基,反应氧和氮类物质发挥着重要作用。白细胞是这些反应的主要制造者,经常预示着这些疾病的病理学和进程。白细胞功能¢它们可以直接被激活和产生超氧化物,其中一些可能转变成过氧化氢。¢它们可以脱粒和释放出大量的酶。¢它们可以因为其他物质(细胞因子,趋化因子,补体

8、,病毒,细菌,毒物,外来物质等)而致敏,对后来刺激因子的响应增强或减弱。¢它们可以离开这个循环而迁移到炎症位点,它们被进一步激活而产生自由基和脱粒。¢它们的蛋白水解酶可以破坏组织,例如肺和肾。¢初级脱粒酶和髓过氧化物酶涉及:µ通过产生次氯酸和较长寿命的氯胺而破坏组织,如软骨。µ在正常环境下通过激活抗水解蛋白酶阻止蛋白酶,如胰肽酶(另一颗粒酶)来损害组织。3上海市龙吴路51号1号楼208室电话:021-54488091,800-820-052

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