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1、生物技术通讯294LETTERSINBIOTECHNOLOGYVol.24No.2Mar.,2013doi:10.3969/j.issn.1009-0002.2013.02.035综述植物瞬时表达技术的主要方法与应用进展1,2212赵文婷,魏建和,刘晓东,高志晖1.东北林业大学园林学院,黑龙江哈尔滨150040;2.中国医学科学院药用植物研究所,北京100193[摘要]瞬时表达技术是一种获得目的基因短暂的高水平表达的技术。与稳定表达相比,瞬时表达所需时间短,但因未将外源基因整合到宿主植物染色体中,不能稳定遗传给下一代。我们简要综述了植物瞬时表达技
2、术的各种方法,介绍了各方法的原理、技术流程、影响因素及其应用。关于其应用,主要分析了生物制剂的合成、转录元件和转录因子的克隆与分析、基因沉默、亚细胞定位、蛋白互作分析、抑制子功能鉴定、选择性剪接调控、植物品种的改良和选育等方面。[关键词]瞬时表达;基因枪;农杆菌;聚乙二醇;植物病毒载体[中图分类号]Q943[文献标识码]A[文章编号]1009-0002(2013)02-0294-07AdvanceoftheMainMethodsandApplicationsofPlantTransientExpressionSystem1,2212ZHAOWen
3、-Ting,WEIJian-He,LIUXiao-Dong*,GAOZhi-Hui*1.CollegeofLandscapeArchitecture,NortheastForestryUniversity,Harbin150040;2.InstituteofMedicinalPlantDevelopment,ChineseAcademyofMedicalScience,MalianwabeiRoad,Beijing100193;China*Co-correspondingauthors,LIUXiao-Dong,E-mail:liu196316@
4、163.com;GAOZhi-Hui,E-mail:zhgao@implad.ac.cn[Abstract]Transientexpressionisatechnologytohighlyexpressthetargetgeneinashorttime.Comparedwithstableexpression,transientexpressionisspeedy.Ontheotherhand,exogenousgenedoesn'tintegrateintothehostchromosome,soitwon'tbeinherited.Webri
5、eflyintroducedthemainmethodsofplanttransientexpressiontechnology,includingtheirprinciples,techniqueprocedures,influencingfactors,andapplications.Thistechnologycouldbewidelyemployedinthesynthesisofmanyplantderivedbiologicals,cloneandanalysisofthetranscrip⁃tioncomponentsandtran
6、scriptionfactors,genesilence,observationofproteinsubcellularlocalizationandinterac⁃tion,identificationoftheinhibitor'sfunction,studyofalternativesplicing,aswellasintheplantimprovementandbreeding,etc.[Keywords]transientexpression;genegun;Agrobacteriumtumefaciens;polyethylenegl
7、ycol;plantvirusvector瞬时表达技术是在相对短的时间内将目标基因基因功能研究和利用提供了便利。转入靶细胞,在细胞内建立暂时高效的表达系统,获得该目的基因短暂的高水平表达的技术。与稳定表1植物瞬时表达技术的方法达相比,瞬时表达所需时间短,不需要将外源基因整合到宿主植物染色体中,比较适用于基因-蛋白的一植物瞬时表达技术导入目标外源基因的方法与些细胞生物学研究。瞬时表达近年来在国内外已被[10]稳定表达技术类似,使用较多的有基因枪法、农杆应用于多种植物的研究和应用开发,从农作物的小[11][12][13]菌渗透法、聚乙二醇(PEG)法
8、、电击法及植物麦(Triticummonococcum)、玉米(Zeamays)、水稻[14]病毒载体介导的方法。[1-5](Oryza