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时间:2019-05-25
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1、动物体液采集(一)实验动物尿液的采集实验动物尿液的采集可分为自然排尿收集法和强制排尿收集法。1.大鼠、小鼠、沙鼠的尿液收集(1)自然排尿法通常用代谢笼配上粪尿分离漏斗收集尿液。收集时将大鼠、小鼠、沙鼠装入特制的代谢笼里,笼下放置洁净、干燥的玻璃粪尿分离漏斗,将漏斗与代谢笼的锥形漏斗口连接,侧口接一个150~200ml集尿容器,按试验要求定时收集、量取一定时段的尿液,供进一步实验用。我们还可根据采尿目的来选择不同的代谢笼,也可根据不同的采尿目的对代谢笼进行适当的改良。(2)强制排尿法将大鼠、小鼠、沙鼠固定好后,按压骶骨两侧的腰背部或者轻轻压迫膀胱的体表部位,使
2、其排尿后,将尿液收集到预先准备好的平皿或铝箔容器中。2.豚鼠尿液的收集(1)自然排尿法:使用大鼠或家兔用的代谢笼收集。(2)强制排尿法:同大鼠、小鼠、沙鼠的收集法。3.家兔尿液的收集(1)自然排尿法也称留尿法,通常用代谢笼配上粪尿分离漏斗收家兔尿液。收集时将家兔置于兔代谢笼里,笼下放置玻璃的粪尿分离漏斗与代谢笼的锥形漏斗口连接,侧口接一个较大集尿容器收集尿液。或在通常使用的饲养笼下放置收集尿液的容器(金属网或采尿盒等)。(2)强制排尿法:包括逼尿法和导尿法(1)逼尿法是一人把家兔抱住,另一人右手由家兔腹腔向下逐渐用力压迫膀胱,逼出尿液。(2)导尿法则是把家兔
3、仰卧固定于手术台上,先在尿道口周围常规消毒,左手将尿道口充分暴露,且固定之,右手握幼儿导尿管(尖部涂一层凡士林或甘油),顺尿道往里送入,一旦导尿管进入膀胱腔,即见尿液流出,有时无尿流出,可将导尿管适当上下左右转动,见尿流出为此。采集雄性动物时,用一只手握住阴茎,另一只手将阴茎包皮向下拽,暴露龟头的龟裂,使尿道口张开,缓慢将导尿管从外尿道口插入,在尿道括约肌部有少许抵抗感。不要强行插入,轻轻地向膀胱部导入,尿自然导出。采集雌性动物时,外尿道口在阴道前庭的里面,从外面看不到,沿着阴道腹侧的阴蒂在阴道前庭腹侧壁将导尿管的尖端插入,也可以插入尿道口,此后方法同雄性动
4、物。4.犬尿液的收集(1)托盘法收集尿液待犬下午进食完毕后,撤去饲料关闭饮用水,换上干净无水的笼底托盘。次日晨用吸管吸取托盘中的尿液约1mL,放入5ml的一次性离心管中。(2)收集管法收集尿液收集尿液前,收去残留的饲料,关闭饮用水,将笼底板冲洗干净,在盘后放置特制尿液收集管,约4小时后取下尿液收集管,将尿液倒入实验容器中根据需要取用。(二)实验动物血液的采集实验动物的采血方法很多,按采血部位不同可分为尾部采血、耳部采血、眼部采血、心脏采血、大血管采血等。选择什么部位与采用何种实验方法,需要根据实验动物种类、检测目的、试验方法而定。一般而言,实验动物血液的总量
5、为55-77mL/kg,单次动物采血量一般应低于实验动物总血量的15%,常见实验动物的采血部位及采血量见表4-2-14。表4-2-14实验动物常见采血部位及采血量部位采血量采血前置小鼠大鼠部分采血尾静脉0.03-0.050.30-0.50麻醉或不麻醉均可尾动脉0.10-0.300.50-1.00足背中静脉0.10-0.30眼眶静脉丛0.05-0.100.5-1.00.50-0.803.00-5.00全采血颈静脉0.50-1.003.00-5.00麻醉手术颈动脉0.50-1.00麻醉手术断头0.50-1.005.00-10.00麻醉手术心脏0.50-0.803
6、.00-5.00麻醉手术后大静脉0.50-1.002.00-4.00麻醉手术腹大动脉5.00-8.00麻醉手术股静脉麻醉手术股动脉麻醉手术部位采血量采血前置豚鼠家兔部分采血耳动脉<0.505.00-10.00耳静脉<0.502.00-5.00全采血颈静脉麻醉手术颈动脉80.00-120.00麻醉手术断头麻醉手术心脏5.00-10.0080.00-100.00麻醉手术后大静脉3.00-5.00麻醉手术腹大动脉麻醉手术股静脉麻醉手术颈静脉3.00-5.00麻醉手术引自:中国协和医科大学主编“实验动物技术与管理”(内部教材)421.大鼠、小鼠断头采血(1)准备好试
7、管并编号,置试管架内。根据实验需要可选用1%肝素钠溶液0.1ml或0.2%乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na)0.1ml作抗凝剂。(2)戴上棉纱手套,用左手拇指和食指捉持鼠头部,以手掌握住动物的身体及双前肢,抓牢动物将鼠颈部朝下。(3)右手持剪刀果断剪断鼠颈,使血液滴入事先准备好的试管内。2.大鼠、小鼠断尾采血(1)准备离心管并编号,置试管架中,如需要抗凝剂可选用1%肝素钠溶液或0.2%乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na),按相应的SOP进行处理。(2)将动物装入鼠筒内固定,露出鼠尾。(3)用酒精棉球涂擦鼠尾,或用温水(45~50℃)加温鼠尾,使鼠尾静脉充分充血
8、后搽干。(4)用剪刀剪去尾尖(大鼠5~10mm,小鼠
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