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时间:2019-05-24
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1、猪流行性腹泻1病原学2流行病学3发病机理4临床症状5病理变化6流行现状7诊断8综合防治9综合防治重点难点解析参考文献最近几年,因病毒性腹泻疫情流行,给我国养猪产业乃至整个国民经济带来沉重打击。2011年4月,因该年春节前后的猪病毒性腹泻流行,猪价一改之前一年多逐波下行的萎势,出人意料地快速飚升,使始于2010年初,经过近一年的财政紧缩,已于当年12月见顶回落的CPI再度扭头向上,紧缩的财政政策被逼再度紧缩。2011年7月,CPI上升6.5%,猪肉价格上涨56.7%,推动CPI上升1.46个百分点。对于近几年猪病毒性腹泻的主要病因,
2、虽然学者们至今仍意见不一,有人认为猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻仍然是主要致病病原,有人指出是猪流行性腹泻病毒发[1]生了变异,还有研究指出是新的病毒博卡病毒或CUBO病毒。但据珠海市赛比奥(原安富来)生物科技有限公司(以下简称赛比奥)猪病诊断实验室对广东省内外几十个病毒性腹泻发病猪场的临床调查和病原学检测:2011年和2012年春节前后的猪病毒性腹泻疫情,70%以上的猪场是因猪流行性腹泻发病所引起;在母猪免疫过来源正当的猪病毒性腹泻三联弱毒苗(含猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和轮状病毒三种抗原,以下简称腹泻三联弱毒苗)的猪场,100
3、%是因猪流行性腹泻发病所引起。在现有技术条件下,来源正当的腹泻三联弱毒苗或某些实验室制作的腹泻二联弱毒苗(仅含有猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻两种抗原)对猪流行性腹泻的免疫效果均不够理想,或根本无效,但采取一些非常规的免疫手段对该病作免疫预防,可使该病得到有效控制。1病原学猪流行性腹泻病毒(PorcineEpidemicDiarrheaVirus,PEDV),与猪传染性胃肠炎病毒、猫冠状病毒、犬胃肠炎病毒和人冠状病毒,同属于冠状病毒科(Coronaviridae)1冠状病毒属(Coronavirus)属1群。PEDV在肠上皮细胞的形
4、态特征与其他冠状病毒相同,病毒通过胞浆内膜以出芽的方式进行装配。但在粪样中检测到的病毒粒子则具有多形性,并倾向于球形,直径约95~190nm(包括纤突在内)。大多数病毒粒子有一个电子不透明的中央区,顶端[2]膨大的纤突长18~23nm,从核衣壳向外呈放射状排列。基因组为单股正链具有感染性的RNA,全长28033nt。5ˊ端非翻译区(5ˊUTR)长296nt;3ˊ端非翻译区(3ˊUTR)长334nt。剩余基因组序列包括6个ORF,从5ˊ~3ˊ端依次为编码复制酶多聚蛋白1ab(pp1ab)、纤突蛋白(S)、ORF3蛋白、小膜蛋白(E)
5、、膜糖蛋白(M)和核衣壳蛋白(N)的基因。pp1ab基因占全基因组2/3,长20346nt;S基因、ORF3蛋白基因、E基因、M基因和N基因长度依次为4152,675,[3,4]231,681,1326nt。pp1ab分子质量约753ku,主要功能包括负链RNA、前导RNA、sgmRNA和子代病毒RNA的转录以及对多聚蛋白切割产生具有功能产物的蛋白酶切割,其在病毒[2,5][5]感染早期发挥重要作用。ORF3蛋白分子质量约25.3ku,据认为与病毒毒力有关。以上两种蛋白,为病毒的非结构蛋白;其余S,E,M,N蛋白,则属于结构蛋白。
6、S蛋白是位于病毒粒子表面的纤突糖蛋白,分子质量180~220ku,由1383个氨基酸组成,在病毒粒子与细胞表面受体结合后通过膜融合侵入宿主细胞和在感染宿主体内介导[6]中和抗体产生的过程中发挥重要作用。N蛋白为磷酸化的核衣壳蛋白,分子质量55~58ku,由441个氨基酸组成,与病毒基因组RNA相互缠绕形成病毒核衣壳。N蛋白在PEDV的结构蛋白中所占比例最大,在感染的细胞中能得到大量表达。猪在感染PEDV早期,体内就能产生高水平的抗N蛋白抗体,又鉴于冠状病毒N蛋白的保[7]守性强,利用N蛋白来建立PEDV分子生物学诊断技术具有很好的
7、应用前景。M蛋白分子质量27~32ku,由226个氨基酸组成,在病毒粒子的组装和出芽过程中具有重要作用。因它能介导机体产生α干扰素,可以作为PEDV基因工程疫苗的候选[8]抗原。E蛋白分子质量约8.8ku,由76个氨基酸组成,为位于病毒囊膜上的小包膜[9]蛋白,其对于病毒的组装和出芽,是非常必要的。与其他冠状病毒相比,PEDV分离培养相对比较困难。从PEDV发现开始,很多[10]学者尝试用不同的方法将PEDV适应于细胞,但经过近10年努力未获成功。直到1988年,Hofmann等首次在培养基含胰酶的Vero细胞上成功繁殖出PEDV
8、。此后,Kadoi等又相继在仔猪膀胱、肾脏的原代细胞和KSEK6、IB-RS-2、MA104、CPK、[11]ESK的传代细胞系上成功培养出PEDV。在国内,中国人民解放军农牧大学于1982年首次将本病毒接种胎猪肠组织上皮细胞和胎猪小肠组织绒毛上皮
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