枯草芽孢杆菌Bs-208制剂保护剂研究

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1、华中农业大学硕士学位论文枯草芽孢杆菌Bs-208制剂保护剂研究姓名：张凯申请学位级别：硕士专业：农药学指导教师：林开春20070601华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书擎檀论文否如需保密，解密时间年月日是否保密独创性声明本人声裙所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取褥的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以椽注和致谢的地方外，论文中不包含萁德人已经发袭或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其能教育规拘的学位或证书丽使用过的材料，撩导教师对此进行了审定．与我一网工作的同志对本研究所敛的任钶贡献均已在论文中做

2、了明确的谎胡，并表示了谢意．研究生签名：g最饬矿时闽：≯舯7年萝月刀葑掌位论文使用授权书本人完金了解“华中农韭大学关于保存．使闺学位论文的规定”，印学生赫须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本：学校有权保存提交论文的印捌版和电子版，并提供目录捡索和阕览服务，可以采甩影印．缩印或扫描等复制手段保存，j[编学位论文。本人同惠华中农业大学可以用不砑方武在不同缀体上发袭，传播学位论文的全都或部分内容。注：保密学位论文在解密后适用于本授权带．学位论文作粼：戥射导獬：律碜签名日期：必07每5月增日签名B期：≯·7年，月’5目注：请将本袁直

3、接装订在学位论文的扉页和目隶之问摘要枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)208菌株在菌剂加工过程中存在着芽孢死亡率较高的问题，而且加工的粉剂和液体制剂在储存中存在芽孢存活率低的问题，影响产品的货架寿命。本文通过正交设计试验以及以贮存稳定性试验对Bs一208热保护剂和粉剂、液剂保护剂进行了研究，筛选到了Bs．208的保护剂配方，这些配方都能有效的提高制剂稳定性。通过单一因子的筛选和两轮正交优化试验筛选出对Bs．208具有良好作用的热保护剂，配方为0．10％PEG4000+0．30％蔗糖+O．20％NaCI，可以提高Bs．2

4、08的收率达18．10％。通过对Naa等10个单因子试验浓度确定，进而通过递进四轮正交试验筛选出了3种效果较好的液剂保护剂，其中效果最好的液剂保护剂配方为8．00％NaCI+1．00％乙酸钠，Bs一208液剂的芽孢存活率提高可达22．53％。通过比较蔗糖等12个单一化合物对Bs一208的存活的影响，并通过两轮正交试验筛选出了两种效果较好的粉剂保护剂，最后比较的出效果最好的配方为5．00％NaCI+2．50％蔗糖+1．25％苯甲酸钠，可使粉剂中Bs一208的芽孢存活率提高达18．72％。另外本文还考察了加有保护剂的BS．208液剂和粉

5、剂在54±2℃和40±2℃两种热贮条件下存活率和存活提高率的变化。结果发现未加保护剂的液剂和粉剂在两种温度下随着时间变化，存活率下降比较快，加有保护剂的液剂和粉剂能使存活率维持在较高的水平。添加了保护剂液剂和粉剂均能提高Bs．208制剂的存活率．关键词：枯草芽孢杆菌，保护剂，热贮稳定性，正交试验，存活提高率注：本课题属武汉天惠生物工程有限责任公司自选课题，由武汉天惠生物工程有限责任公司提供全部经费1AbstractDuringthespraydryprocess，BacillussubtilisBs一208hashightherma

6、ldeathrate．Alsohaslowsurvivalrateinliquidandpowderformulationduringstocking．Tllisshortenedtheshelf1ireofBs一208product．Inthisthesis，studiesonthermalprotectant，liquidandpowderdeposhprotectantforBs-208werecarriedoutthroughorthogonaldesignandstoragestabilitytest．Someprotec

7、tantscombinationsshowedhigllerefficiencytoincreasethesporesurvivalrateinpreparationandformulation．ThrotIghsinglefactorssCreeningandtworoundsorthogonaldesignedexperiments，abetterthermalprotectantprescriptionforBs-208wasfoundout．ItisO．10％PEG4000,0．30％sucroseand0．20％NaCI．

8、Thisprotectantcanincrease18．10％livingsporeyieldunder75℃．Threegoodliquidprotectantswereacquiredthrough10single—factors