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《紫花地丁抑菌活性成分的研究初报》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、第34卷第11期西北农林科技大学学报(自然科学版)Vol.34No.112006年11月Jour.ofNorthwestSci2TechUniv.ofAgri.andFor.(Nat.Sci.Ed.)Nov.2006a紫花地丁抑菌活性成分的研究初报abbab张武岗,李定刚,宋毓民,周乐,靳亚平(西北农林科技大学a.生命科学学院,b.动物科技学院,陕西杨凌712100)[摘要]采用活性跟踪法从紫花地丁的氯仿萃取物中分离得到1个抗菌活性成分(化合物1),并以停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌、乳房链球菌和沙门氏菌为
2、供试菌,对紫花地丁的抑菌活性及其活性成分进行了初步研究。结果表明,化合物1初步鉴定为黄酮类化合物;紫花地丁的主要活性成分位于甲醇-水(V(甲醇)∶V(蒸馏水)=1∶1)萃取物和氯仿萃取物中;化合物1对以上6种供试菌的最小抑菌浓度依次为0.039,0.078,0.156,0.313,0.625和1.25mgömL;对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和乳房链球菌的最小杀菌浓度≤2.5mgömL,对停乳链球菌、沙门氏菌和大肠杆菌的最小杀菌浓度>2.5mgömL。[关键词]紫花地丁;抗菌活性;抗菌成分;抗菌活性跟踪;分离纯化[中图分类号]
3、S567.9[文献标识码]A[文章编号]167129387(2006)1120125204紫花地丁(ViolayedoensisMakino)系堇菜科多(Salmonella),均由西北农林科技大学动物科技学[1]年生草本植物,以全草入药,性苦、辛、寒,具有清院家畜生殖内分泌研究室从患有乳腺炎的奶牛乳腺热、消肿、消炎和抗菌功能,主治黄疸、痢疾、乳腺炎、中分离并保存,用前将保存菌种接种于营养肉汤中,目赤肿痛和咽炎,外敷可治跌打损伤、痈肿、毒蛇咬于37℃条件下培养18～20h后备用。[223]伤等。关于紫花地丁化学成分的研究报道
4、较1.2方法[425]多,但对其抗菌单体成分的研究目前尚属空白。1.2.1分离纯化方法参考文献[4,627]的方法进[6]刘湘新等曾对紫花地丁的抗菌活性进行了初步研行。取1.8kg紫花地丁全草粉末,用12.6L甲醇超究,认为其有效成分为黄酮苷类和有机酸。本研究旨声提取2次,每次40min,合并2次提取液,浓缩至浸在了解紫花地丁的抑菌活性及其活性成分,以为紫膏(A)。用适量乙酸乙酯完全溶解浸膏A,加等体积花地丁的临床应用和质量控制提供理论依据。的水进行萃取。将乙酸乙酯相和水相分别浓缩后依次得浸膏B和C。再用适量甲醇-水(V(甲
5、醇)∶V1材料与方法(蒸馏水)=1∶1)混合溶剂溶解浸膏B,依次用石油1.1材料醚和氯仿各连续萃取3次,分别浓缩醇水萃取液、石原料紫花地丁全草,购自西安药材市场。油醚萃取液和氯仿萃取液,依次得浸膏D,E和F。将仪器ZF2C型三用紫外分析仪(上海康禾光电浸膏F进行反复硅胶柱层析,氯仿为洗脱剂,收集具仪器有限公司),303型电热恒温培养箱(北京科伟有天蓝色荧光(365nm)的组分,浓缩至干后得到化永鑫实验仪器设备厂)。合物1(56mg)。分离过程中活性部位的确定均由抑试剂琼脂粉和牛肉膏均由北京奥博星生物技菌活性试验(纸片扩散法)
6、来完成。术责任有限公司生产,蛋白胨由天津市英博生化试1.2.2活性测定方法(1)纸片扩散试验。培养基剂有限公司生产,0.9göL生理盐水自制,其他化学和药敏纸片的制备参考文献[8]的方法进行。将供试试剂均为分析纯。物配成50mgömL的供试液,取制备好的纸片(直径菌种金黄色葡萄球菌(S.aureas)、无乳链球为6mm)放入供试液中浸泡2h,然后取出纸片置于6菌(S.agalactiae)、乳房链球菌(S.uberis)、停乳链球40℃烘箱中烘干;将菌液浓度为10ömL的大肠杆菌(S.dysagalactiae)、大肠杆菌(
7、E.coli)和沙门氏菌菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、乳房链球菌、无乳链a[收稿日期]2005211214[基金项目]陕西杨凌科研开发基金项目(2003JB0321)[作者简介]张武岗(1979-),男,陕西宝鸡人,在读硕士,主要从事天然产物化学研究。[通讯作者]周乐(1965-),男,陕西蒲城人,教授,主要从事天然产物化学研究。E2mail:betterzl@163.com;zhoule863@sina.com126西北农林科技大学学报(自然科学版)第34卷球菌和停乳链球菌分别均匀涂抹在普通琼脂培养基照管相同表示无抑菌活性
8、,混浊度越大表明抑菌活上。最后,再将制备好的药敏片均匀贴于培养基的3性越小,将未见细菌生长的管内肉汤转接到普通琼个位点,然后置于37℃恒温培养箱中培养18h,分脂培养基平皿上,再于37℃条件下培养18～24h。别测定各自的抑菌圈直径。取3个重复的平均值作将琼脂平皿上未见细菌生长的药物浓度作
