有机污染物对藻类毒性的测定

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1、维普资讯http://www.cqvip.com第3期环境化学5月ENVIRONMENTALCHEM1STRY、r，有机污染物对藻类毒性的测定卷年董旦兰戴树桂孙红文(南开大学环境科学系．天律．300071)兰廷恺兰怀瑾夏哺娟(中国科学院生态环境研究中心．北京，100085)t九一刘静玲郎佩珍陆光华(东北师范大学环境科学系，长春．130024)摘要A藻类是研究承生毒理学的很好的材料之一．对其毒性是评价化合物危害的基率敦据，也是研究化合物结树与生物赦应的手段之一-通过穗定工业废水·教种硝基芳烃及多种有机锡对藻类的毒性，发

2、现剂量与效应间有很好的相关性．化台物结构-f效应之问也有一定的规律．，、翔半数生长抑制浓竖墼抽藩警物-T藻类广泛存在于各种天然水体，它种类繁多，个体小，生长繁殖遗蘧，对毒物的毒性敏感．它长时间在水体中生长，能较好地反映有害物的综合效应．它又是水体的初级生产力之一，藻类种群和数量的变化，将影响鱼、虾等水产的发展．藻类中有许多是世3界性品种，实验室培养也比较容易，方法简便，实验周期短，因此是研究水生生态毒理学很好的也是必不可少的材料之一．3¨1．仪器、试剂及藻种1．1仪器光照培养箱、恒温振荡器、离心沉淀器、显微镜、分光光

3、度计、照度计、血球计数板、烧杯和三角瓶玻璃仪器．1．2培养液’(1)EuropeanCommunities培养液[：NH‘C115~／I，MgCl2·6H2o12mg／1，CaCIz·2H2o18mg／l，MgSO‘·7H2O15mg／1，KH~PO‘1．6mg／l，FeCI~·6H2O0．08rng／1，Na~EDTA·2H2o0．1mg／1，HaBOa0．185mg／I，MnCI2·4H2O0．415mg／I，ZnCI23X10一mg／l，cua22H2o10～mg／1，CoCl~·6H2O1．5×1O～ms／i

4、，NaiMoO··2H2O7×10一mg／1，NaHCO~50mg／1．可将国家自然科学基金资助项目维普资讯http://www.cqvip.com环境化学l3卷常量成分及微量成分分别配成储备液，再混合，并调pH至7．2—7．5．(2)SE培养液(中国科学院武汉水生所提供配方)：NaNOa250mg／1，CaC1z26ms／~，MgSO(·7H2075mg／l，K2FIPO475rag／1．KHPO{175rag／1．NaCI25roSA，土壤浸出液40ml／,，EDTA—Feling／1，Aslml／1．其中，土壤

5、浸出液为500g花园土加1000ml水，搅匀浸泡48h以上，取上清液灭菌后备用；EDTA—Fe为0．901gFeCI3溶于10mllmol／lHCI中．与10ml0．1mol／!EDTA-Na混合稀至1L；A5为每升水中含H3BO92．86S，MnC12·4H2O1．81g，ZnSO(·7H2O0．22S，CuSO··5H2O0．08g，Na2MoO

6、0．02lg．(3)D1培养液(中国科学院武汉水生所提供配方)：NaNOs120mg／1，M0。·7HO70mg／J，HPO(40mgB．KH2PO{80rag／1．C

7、aC1220mg／l，NaCI10mg／l，Na2Si·9H2O100roag／l，MnSO·2ms／~，Fe．-Cit5rag／!，土壤浸出液20ml／1，A5lml／~待测化学品以水配制成不同浓度．1．3藻种常用有小球藻(mCOar／z．C．PUr~)，栅列藻(＆女E!一如幽，．／a~da，．)，月芽藻(＆她∞呦m)，扁藻(P6!帕sp．)等．2．操作步骤2．1藻种预培养实验前两周将保存的藻种转移到三角烧瓶中进行扩繁和驯化培养，4d移种一次，使藻种达到纯化和同步生长，并记录每天的生长速度．做出生长曲线．2．2实验

8、条件将培养好的藻种，在3000r／rain离心5rain，吸去上清液，加入适量等渗缓冲液，悬浮洗涤，再离心，以去除营养物及其他物质，在60ml试验液中加入适量藻液，使初始浓度约10-10个细胞／ml，培养温度20—25士1℃，不同种类的适宜温度有所不同，以白色日光灯连续照明或12h照明，12h黑暗，平均照度4000lux‘往复或旋转振荡培养．除对照外，各待测化合物设5个浓度，每个浓度最少做两个重复．实验前及实验后12，24，36，48，96h，分别记录藻类的生长情况．通常有细胞计数法、光密度法、叶绿索a法、ATP测法

9、、荧光法、“C同位素法等[“]．a．计算方法3．1阻碍生长实验法计算EC·--n一一t一：相对最大生长速度；，札：分别为对数期开始期()和后期()的细胞数阻碍率一X100仉对照组的生长速度，：有供试化合物时的生长速度．将供试化合物浓度与生长速度阻碍率进行一元线性回归，求Bco值．3．2概率单位法计算EC。维普资讯http://www.cqvip