实验七植物病原原核生物和植物病毒的形态及所致病害的观察

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1、实验七植物病原原核生物和植物病毒的形态及所致病害的观察实验目的了解植物病原原核生物和植物病毒的形态特征和分类依据，及所致病害的症状特征。几类植物病原物的大小比较原核生物(Procaryotes)是指含有原核结构的单细胞生物。一般是由细胞膜和细胞壁或只有细胞膜包围的单细胞微生物。它的遗传物质(DNA)分散在细胞质中，没有核膜包围，没有明显的细胞核。细胞质中含有小分子的核蛋白体(70s)，但没有内质网、线粒体等细胞器。一、植物原核生物的形态及所致病害原核生物界的成员很多，包括细菌、放线菌以及无细胞壁的菌原体等，通常以细

2、菌作为原核生物中有细胞壁类群的代表，以菌原体或螺原体作为无细胞壁但有细胞膜类型的典型侵染植物可引起许多重要的病害，如水稻白叶枯病、茄科植物青枯病、十字花科植物软腐病、桑萎缩病和泡桐丛枝病等。内容与方法(一)植物病原原核生物的分类薄壁菌门：细胞壁的厚度为10-13nm，肽聚糖含量8%-10%厚壁菌门：细胞壁的厚度为10-50nm，肽聚糖含量50%-80%较壁菌门：无细胞壁疵壁菌门：细胞壁中无胞壁酸和肽聚糖原核生物界1.薄壁菌门：假单胞杆菌属黄单胞杆菌属欧文氏菌属2.厚壁菌门：芽胞杆菌属棒型杆菌属3.软壁菌门：植原体属

3、螺原体属1坏死是细菌性病害中最常见的一类，以叶部、果实上出现的斑点、枯斑为最多。病斑在初期呈水渍状半透明，有的菌脓从病组织中溢出，干燥后成鱼卵状粘附在病斑部，有的病斑在后期会自动脱落而成穿孔状。（二）细菌病害的症状类型水稻白叶枯病（X.o.pv.oryzae）普通型褐变型凋萎型水稻条斑病（X.oryzaepv.oryzicola）桃穿孔病（X.c.pv.pruni）2腐烂当柔软幼嫩多汁的组织遭受细菌侵害以后，细胞间果胶质分解，组织解体而造成软腐症状，与此同时还伴有恶臭气味。观察白菜或的马铃薯软腐病病状特征。白菜软腐

4、病（E.chrysanthemi）马铃薯软腐病3萎蔫典型的萎蔫是维管束组织受到细菌的侵染，破坏了导管的供水能力。初期暂时性凋萎或青枯，后期为永久性枯萎。观察番茄和马铃薯等茄科植物的青枯病（P.solanacearum）症状标本。番茄青枯病（P.solanacearum）4瘤肿和畸形由于薄壁细胞的分裂加速和细胞体积的增大，促使局部组织过度发育而成肿瘤。观察冠瘿病菌（A.tumefaciens）（又称根癌土壤杆菌）危害植物引起的冠瘿病。悬钩子冠瘿病葡萄冠瘿病苹果冠瘿病由于各种细菌病害症状的变化很大，比较可靠的方法还是用

5、显微镜检查病组织中有无大量的细菌存在。切取小块新鲜的病组织（最好是病健交界出的病组织）平放在载玻片上，加蒸馏水一滴，盖上盖玻片后立即放在低倍镜下观察（注意光线要弱，除净气泡）。如果是细菌病害，则在切口出有大量细菌成烟雾状从病组织流出。观察水稻白叶枯病标本。（二）细菌性病害诊断的基本方法－－喷菌现象（bacteriaexudation.BE）（1）在干净的载玻片上用移菌环移菌少许涂片，晾干后在火焰上通过两次，固定涂片。并写上标记。（2）结晶紫染色1分钟（3）水洗数秒种，甩去余下的水，并轻轻吸干。（4）碘液处理1分钟（

6、5）水洗数秒种，并轻轻吸干。（6）用酒精褪色。时间不能超过30秒。（7）水洗数秒种，并轻轻吸干。（8）滴加复染剂复染10秒种。（9）水洗、吸干，镜检。革兰氏阳性菌呈紫色或蓝黑色；阴性菌呈红色。（三）革兰氏染色方法革兰氏阴性G-革兰氏阳性G+（四）细菌的鞭毛大多数植物病原细菌有鞭毛（flagellum），无芽孢。着生在菌体一端或两端的鞭毛称为极鞭，着生在菌体四周的鞭毛称为周鞭。鞭毛的有无、着生位置和数目多少是分类的重要依据。周鞭极生多根鞭毛极生一根鞭毛二、植物病毒及所致病害病毒(virus)是包被在蛋白或脂蛋白保护性

7、衣壳中，只能在适合的寄主细胞内完成自身复制的一个或多个基因组的核酸分子，又称分子寄生物。病毒区别于其它生物的主要特征是：病毒是个体微小的分子寄生物，其结构简单，主要由核酸及保护性衣壳组成；没有细胞结构，没有新陈代谢。最常见的症状。植物叶片部分褪绿而形成斑块状不均匀变色边缘清晰的称为“花叶”，边缘不清晰的称为斑驳，全面褪色的称为黄化。花叶是植物感染病毒后最常见的症状，因此很多病毒病都称为“花叶病”。（一）植物病毒病害的症状类型1褪绿或变色（2）黄花：观察马铃薯卷叶病的症状，注意病株变黄，叶片上卷，教健叶稍厚等特点。烟

8、草花叶病毒病黄瓜花叶病毒病芜菁花叶病毒引起的褪绿、皱缩和花叶症状番茄黄化卷叶病毒病小麦黄花叶病毒受病植物组织局部枯死，枯死发生于叶片的称为枯斑，发生于茎干和果实上的称为条纹或条斑。2组织坏死全株或部分器官表现各种畸形，观察水稻矮缩病、番茄蕨叶病的标本，注意区分矮化与矮缩，班驳与花叶的症状。3畸形番茄蕨叶病水稻矮缩病(二)病毒病的内含体一些植物遭受病毒侵害后，