生物技术在植物病理学中的应用

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1、生物技术在植物病理学中的应用生物技术的概念在植物病理学中应用的生物技术生物技术在植物病理学中的应用什么是生物技术？我们的祖先早就在几千年前就已经学会利用发酵、酿酒、制酱、育种等传统生物技术，但是当代概念的生物技术与之有着根本的区别。当代生物技术是应用现代生物科学及某些工程原理，利用生命有机体（从微生物到高级动物）及其组成（含器官组织、细胞、细胞器甚至基因）来发展新产品或新工艺的一种技术体系。从严格的意义上讲，生物技术是以生命科学为基础，利用生物的特性或功能，设计构建具有预期性状的新物种或新品系，以及与工程原理和技术

2、相结合进行社会生产或为社会服务的综合性技术领域。从下个世纪人类面临的能源、食品和环境三大危机来看，生物技术具有巨大潜势。生物技术在植物病理学中的应用在植物病理学中应用的生物技术组织培养脱毒技术单克隆抗体技术转基因抗病植物组织培养脱毒技术基本程序无菌条件下取茎尖或根尖0.5mm分生组织，至培养基上培养成试管苗ELISA检测是否带毒将无毒苗切段快繁经练苗后移栽防虫网室内长成后收集微型薯组织培养脱毒技术马铃薯组织培养脱毒8个技术要点茎尖培养试管苗试管苗病毒检测试管苗的切段快繁培养瓶选择合适的封口塑料改善光质条件注意培养室

3、温度控制和经常消毒选择生长健壮的脱毒苗作为扩繁材料使用B9培养壮苗马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之一茎尖培养试管苗取健康薯在室内催芽（38℃for14d），无菌条件下剥取带1-2个叶原基的生长点，接种到培养基上，培养温度21-25℃，200Lx。培养基配方：MS+6-苄基腺嘌呤（6-BA）0.05mg/L+萘乙酸（NAA）0.1mg/L+赤霉素（GA3）0.1mg/L+3%蔗糖植物组织培养流程马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之二试管苗病毒检测聚丙烯凝胶电泳法-检测纺锤块茎类病毒酶联免疫吸附测定法-检测PVX、PVY等

4、病毒指示植物接种法-辅助方法马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之三试管苗的切段快繁采用简化的MS培养基成分：大量元素、微量元素、铁盐、3%食用白糖、琼脂和自来水。该培养基的优点：6-8d即可生根，叶芽萌发率高，植株健壮。马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之四培养瓶选择合适的封口塑料-聚丙烯制成的耐高压盖子马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之四培养瓶选择合适的封口塑料-聚丙烯制成的耐高压盖子马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之五改善光质条件尽量利用散射光，即将培养室建成玻璃温室状马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之六注意培养室温度控制和

5、经常消毒室温20-25℃为宜，26℃顶部易烧苗，33℃瓶苗停止生长。培养室经常用福尔马林和高锰酸钾熏蒸消毒，每7d一次。马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之七选择生长健壮的脱毒苗作为扩繁材料健壮的试管苗转接后，生长整齐健壮，繁殖效率高，可形成良性循环。马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之八使用B9培养壮苗脱毒苗移栽前的最后一次转接，可在MS简化培养基中加入生长延缓剂B910-15mg/L，加B9的脱毒苗生长健壮，节间短，叶色深绿，移栽成活率高。马铃薯组培苗的练苗移栽试管苗从无菌到光、温、湿稳定的环境进入自然环境，必须进行炼

6、苗。一般移植前，先将培养容器打开，于室内自然光照下放3天，然后取出小苗，用自来水把根系上的营养基冲洗干净，再栽入已准备好的基质中，基质使用前最好消毒。移栽前要适当遮荫，保持较高的空气湿度。马铃薯组织培养脱毒苗移栽到温室马铃薯组织培养脱毒生产的微型薯返回单克隆抗体技术免疫反应原理当动物体受抗原刺激后可产生抗体。抗体的特异性取决于抗原分子的决定簇，各种抗原分子具有很多抗原决定簇，因此，免疫动物所产生的抗体实为多种抗体的混合物。用这种传统方法制备抗体效率低、产量有限。此外，要把这些不同的抗体分开也极困难。单克隆抗体技术的

7、出现，是免疫学领域的重大突破。单克隆抗体技术单克隆抗体的基本概念抗体主要由B淋巴细胞合成。每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系，含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞产生抗体。如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体，称为单克隆抗体。单克隆抗体技术基本原理要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞

8、，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖，应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一，得到杂种的骨髓瘤细胞。这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性，它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性，用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群，可制备抗一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。其制备原理示