南京椴组织培养的研究

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1、摘要本研究以南京椴(Tiliamiqucliana)无菌试管苗的茎段、叶片、根系为外植体，进行器官发生研究，探讨了不同因素对南京椴直接器官发生以及愈伤组织诱导的影响。主要结果如下：1．茎段是南京椴直接器官发生的适宜外植体，最适宜诱导不定芽的培养基为MS+BAl．0mg·L—q-NAA0．1mg·L。1+蔗糖309·L以+琼脂5．29·L～。接种40d后，该培养基能诱导分化出较多的不定芽，且不定芽生长健壮，有利于继代繁殖。适宜增殖培养基为MS+BA0．5．1．0mg·L’1+NAA0．05rag·L。+蔗糖309·L“+琼脂5．2

2、9·L一，不定芽能获得较大的增殖系数(4倍以上)。同时，适当降低大量元素浓度(1／2MS)及延长继代周期(40d左右)对不定芽的伸长都有较好的效果。适宜的生根培养基为1／2MS+BA0．1mg·L’1+IBA0．5mg·Ld+蔗糖209。L4+琼脂5．29·Ld+活性炭59-L～。不定芽培养40．60d后可形成根，最高生根率达到56．6％，生根质量高并且整个植株生长状况良好、长势旺盛。在根长6-8cm时进行开瓶炼苗5d，移栽至腐殖质土壤，成活率可达80％以上。2．南京椴愈伤组织的诱导较容易，利用叶片作为外植体诱导出的愈伤组织质量

3、较为理想。适宜的诱导培养基为MS+BA0．1mg·L。+2，4-D0．5—1．0mg‘L。+蔗糖309·L‘1+琼脂5。29·L～，40-50d后能获得大量生长良好的愈伤组织。为使愈伤组织保持旺盛的活力和分化能力，在继代培养中逐渐以NAA代替2，4一D。浓度在O．5一I．0mg·L’1的NAA对南京椴愈伤组织增殖来说较为适宜，愈伤增殖倍数较高且生长状态良好。在培养基中加入5mg·L。1的vc能够有效控制暗培养条件下产生的褐化现象，但对于光培养条件下的褐化防止尚未找到有效的措施。因时间有限，没有系统地研究南京椴间接器官发生的完整过

4、程，如何促进愈伤组织的分化的诱导有待进一步的深入研究。关键词：南京椴(Til．iamiqucliana)；组织培养；直接器官发生；植株再生；愈伤组织StudiesontheTissueCultureofTiliamiquclianaAbstractThreetypesofinitialexplantsfromTiliamiqucliana，includingstemofseedlings，leafandrootofaxenicplantlet，wereusedtostudytheorganogenesisinthisthesis

5、，Differentfactorsweretestedfortheireffectsondirectorganogenesisandcallusinducement．Themainresultsshowedthat：1．Stemofseedlingwastheoptimalexplantfordirectorganogenesis，andthemostsuitablemediumforinducingadventitiousbudwasMS+BA1．Omg·L。1+NAA0．1mg。L。+sugar309。L“+agar5．29

6、’L～．onwhichthemostadventitiousbudscouldbeinducedin40--daycultivationwhichwerepropitioustothecontinuousgeneration．ThemostsuitablemediumforplantproliferationwasMS+BAO．5．1．0mg·L。1+NAAO．05mr’L“+sugar309’L“+agar5．29‘L～．onwhichthemultiplicationcoefficientofadventitiousbuds

7、couldbeenlargedmorethan4times．Meanwhile，toappropriatelylowerthecontentsofmultitudeelements(1／2MS)andprolongthecultureperiods(40d)couldbebeneficialfortheelongationoftheadventitiousbud．Thebestrootingmediumwas1／2MS+BA0．1mg·L。+IBAO．5mg‘L“+sugar209’L“+agar5．29·L“+AC59‘L一，

8、onwhichtheadventitiousbudcouldgrowouthigh—qualityrootsin40-60dayswiththehighestrootingrateof56．6％．Whentherootlengthdevelopedto6-8cm