发表论文3.21

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1、醒脑开窍法对阳明腑实证发热大鼠神经肽类分子的影响[摘要]目的：探讨醒脑开窍法对阳明腑实证发热大鼠下丘脑中促肾上腺激素释放激素（CRH）、血管加压素（AVP）、P物质（SP）、神经降压素（NT）的含量影响。方法：参照樊氏[1]造模法，建立大鼠阳明腑实证发热模型，随机分为6组：空白组、模型组和4组给药治疗组，各治疗组应用醒脑静注射液、大承气汤、醒脑静合用大承气汤（简称开窍通腑组）、扑热息痛治疗，体温下降期处死动物，观察其下丘脑、胃、结肠及血浆中CRH、AVP的含量变化。结果：神经肽类物质的含量治疗组与模型组间存在显著性差异（P＜0.05），通过药物作用提高机体AVP含量来抑制

2、内生致热源CRH的生成，从而使CRH的含量降低，抑制体温升高；通过药物作用使P物质、NT的含量增加来降低体温。结论：醒脑开窍法对大鼠阳明腑实证发热有很好的解热作用，但开窍法兼顾通腑法治疗效果最佳。其解热机制与神经肽类物质CRH、AVP、P物质、NT的含量有关；在脑-肠轴的调控下，药物作用于机体，通过改变机体神经肽类分子的含量参与体温调节，维持机体内环境的稳态，使体温恢复正常。关键词：醒脑开窍法；神经肽；阳明腑实证；发热；开窍法，是开通心窍，苏醒神志的治法，传统上用其治疗窍闭时表现的意识昏迷、谵语等，但近年来，被广泛应用于临床各种发热的治疗，如肺系疾病发热[2-6]、中枢性

3、发热[7-11]、癌性发热[12-15]、流行性出血热发热[16-19]等，并取得良好疗效。其临床常用代表方剂醒脑静注射液治疗各种发热亦有诸多报导，但其作用于机体的解热机制尚不明确。本研究基于脑肠相通理论和同病异治的治疗原则，旨在研究醒脑开窍法对体温正负调节因子的影响，揭示醒脑开窍法对阳明腑实证的解热机制，为指导临床治疗发热性疾病提供实验依据。1材料与方法1.1药品试剂Elisa试剂盒（由上海江莱生物科技有限公司提供）；大肠杆菌内毒素（由西格玛奥德里奇（上海）贸易有限公司,批号L-2630）称取1mg（3×106EU/mg），加300ml生理盐水配制成10000EU/ml

4、的母液，取1ml母液加250ml生理盐水，配制成40EU/ml的大肠杆菌内毒素注射液；附子、干姜、肉桂（购自山东中医药大学中鲁医院）以1:1:1做水煎剂，先泡一个小时，加十倍量的水，水沸后半小时，过滤药液，再加八倍量的水，煎煮40分钟，过滤药液，两次药液混合后，将药液浓缩至2g/ml，4℃保存；大承气汤（购自山东中医药大学中鲁医院）大黄12g，厚朴24g，枳实12g，芒硝9g，先煎厚朴、枳实，水沸30分钟，后下大黄，约十分钟后，过滤药液，第二遍煎约20分钟，两遍和在一起溶入芒硝，浓缩至1g/ml，4℃保存；醒脑静注射液（购自山东省中医院）；扑热息痛片：（购自山东省中医院）

5、根据换算系数，取一片扑热息痛，加33.3ml蒸馏水，给药量即是体重/100ml；1.2实验仪器离心机（微量高速离心机（国产）仪器型号：TG16W）；微型电动匀浆机(购于北京优尼康生物科技有限公司)；酶标仪芬兰（LabsystemsMultiskanMS）仪器型号(352型)；洗板机：芬兰（ThermoLabsystems）仪器型号(AC8)；培养箱(隔水式恒温培养箱（国产）仪器型号：GNP-9080型)；电子体温计（欧姆龙）仪器型号LM-142。1.3动物分组取Wistar大鼠40只随机分为A、B、C、D、E、F组，每组10只，雌雄各半，A组（空白组）、B组（模型组）、C

6、组（醒脑静组，造模后尾静脉注射醒脑静注射液，0.06ml/100g体重）、D组（大承气汤组，造模后灌服大承气汤，1ml/100g体重）、E组(醒脑静合用大承气汤，等效剂量)、F组（扑热息痛组，造模后灌服体重/100ml）。1.4造模给药除空白组外，用制好的附子、干姜、肉桂水煎剂，每天按20g/kg体重，对模型组和治疗组进行灌胃，空白组灌等量蒸馏水，连续12天后，禁食（不禁水）12h。将大鼠自身粪便制成100g/L的混悬液，给模型组和各治疗组大鼠2ml灌胃，每天两次，连续两天，空白组灌等量蒸馏水。根据40EU/100g体重于实验的第15天对模型组和治疗组进行腹腔注射，空白组

7、注射等量生理盐水。治疗组于注射大肠杆菌内毒素后，分别进行给药治疗。1.5标本制备麻醉各组大鼠，在冰台迅速取出各组大鼠的动脉血、下丘脑、胃、结肠。将动脉血置37℃水浴30分钟后以3000转/分的速度离心10分钟，取血清置于5ml冻存管-20℃保存，下丘脑、胃、结肠分别匀浆后离心取上清液装入5ml冻存管置于-20℃冰箱保存。1.6指标检测体温测量使用电子体温计测量大鼠肛温。各组织CRH、AVP、SP、NT的测量采用Elisa试剂盒进行检测。1.7统计处理采用GraphPadPrism4进行统计学处理，所有数据结果均以±s表示，组间