国家自然科学基金技术路线图大全,共95份

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1、多变量药物技术路线形态学观察、倍增时间、细胞活率检测mES标准体系培养生物学特性检测染色体核型分析、AP检测免疫组化、FACS特异标志物、RT-PCR检测EBs形态学观察mESRT-PCR检测非分化增殖mES分化为EBsLN,FN,E-cadherin表达差异检测FACS检测免疫组化检测流式细胞术、RT-PCR检测MSP检测Nanog等CpG岛甲基化状态mESniche模拟培养甲基化修饰检测ChIP检测H3修饰的位置免疫组化检测H3R2等的表达甲基化抑制/启动剂作用EBs后的基因表达分析技术路线：临床资料淋巴瘤患者病理活检常规病理组织学诊断与分型制成单个核RT-PCR诊断：t（14；18）,细

2、胞悬液t（11；18）,t（11；14）,t（8；14）,t（9；14）,t（2；5）等染色体易位后形成的融合基因相关探针直接间期FISH：CCND1，BCL2，BCL6，PAX5，ALK，NPM，MYC，IgH对象药物有效组分/成分的制备半制备液相色谱有效中药的化学成分分析分离过氧化氢造成葡萄糖消耗降低，能量生成减HPLC-MS少正常脑神经细胞质谱检测流式细胞检测仪比较药物对葡萄糖消耗的影响比较药物对ROS、抗氧化酶活力的影microarray分析中药以PGC-1α依赖的途径为核心的相关基因表达的影二维电泳-质谱分析中药对以上途径相关蛋白表达的影响揭示中药影响ROS和葡萄糖/能量代谢调节平衡

3、的作用物质、靶点和调控网络代表性药物文献研究样品采集、提取物制备毒性及其致毒机制效应物质基础（肝微粒体、线粒体功能）（色谱、质谱、核磁、联用技术…)生理/病理状态下机体对毒性物质的应答差异表达（系统生物学）有毒中药的安全使用窗口（毒性与药效的相关分析）纯度检测、药效检测a-溶血链球菌33#菌株工艺培养流程条件优化绿豆水培养基优化肉膏培养基生活废水培养基绿豆水培养基培养基改良葡萄糖及12种氨基酸MCF7、K562细胞模型标准品加入多品种、多剂量快速HPLC方法已知细胞凋亡诱导药品人工制造多种不同确定最优MS条件细胞凋亡状态的细胞显微形态及凝胶电泳确定样品前处理方法鉴别细胞状态葡萄糖氨基酸消耗量不

4、同细胞凋亡状态高精密度检测方法标准训练集化学计量学数据处理抗癌细胞药理评价新方法中药组分相互比对传统方法新方法评价结果相互补充评价结果对新方法的总结评价新方法的推广应用技术路线铝接触剂量/尿铝含量调查60岁以上铝接尿铝含量与年龄和细胞丢触人群及对照遗传基因多态性失的关系检测尿铝含量与Caspase-3,外周血淋巴细胞MLC3-II蛋白表达的关系受体表达认知功能检查，MCI铝致神经细胞丢失和/或诊断，AD诊断，脑遗传因素与MCI、AD的部核磁及磁共振波关系谱分析Nec-1神经行为改变铝致神经铝染毒SD大鼠Ca和s细胞死亡p/或不同死亡通路阻断剂处理as的方式检e-APP、Tau蛋白3,测LC水平

5、3-II基因氧化应激水平蛋白表达/铝染毒大鼠神经Nec-1阻细胞断神经细神经细胞凋亡胞坏死性/坏死/坏死性凋亡通路凋亡/自吞噬与铝致痴呆的关系生理负荷超负荷体外培养的成骨细胞体外培养的成骨(OB)(OB)和破骨细胞(OC)细胞和破骨细胞(OC)基因芯片基因芯片体外OB、OC基因体外OB、OC基因表达谱的时序变化表达谱的时序变化1、RT-PCR法检测OB、OC表达差异最大的几个基因；研究骨形成到骨吸收质的变化过2、结合基因数据库，明确“标记”基因及功能。程中，OB、OC基因调控机理。骨界面OB、OC基因骨界面OB、OC基因表达谱的时序变化表达谱的时序变化基因芯片基因芯片提取骨界面取材的提取骨界面

6、取材的OB和OCOB和OC激光捕获激光捕获体内种植体—骨界体内种植体—骨界面区域的骨组织面区域的骨组织生理负荷超负荷正常组SD大鼠分组正常组、模条件应激制备内脏型1组和模型2组各10高敏感大鼠模型正常组和模型1、2组样品的制备腹腔注射白蛋白制备DIGE试剂(Cy2、Cy3、Cy5)标记内脏高敏感大鼠模型蛋白样品的IEF和PAGE电泳分离差异蛋白质点的切取荧光扫描、分析差异蛋白质胰酶对脱色后蛋白质的消化质谱的多肽指纹图、微测序分析大鼠结肠黏膜WesternBlot验证生物信息学分析，获得差异蛋白质DNA序列健康人和IBS患者各6例结肠黏膜WesternBlot验证初步筛选出IBS差异蛋白质和分子

7、标记物根据其DNA序列，按照同源重组原理，建立打靶载体筛选某个差异蛋白质进行功能研究导入胚胎干细胞（ES）打靶载体注射入胚泡中ES细胞培养,以筛选发生定点重组的ES细胞植入子宫通过鉴定，获得嵌合体小鼠繁殖，获基因敲除纯合体小鼠1.观察和检测其基因敲除小鼠生物学特征的改变，以明确此基因功能2.用AWR评分评估此基因敲除小鼠的内脏敏感性，以明确此基因是否为IBS的致病原因EGFP基因pMJ67PCRE